時(shí)間：2023-06-05 10:16:09
開(kāi)篇：寫(xiě)作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇生物免疫療法，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過(guò)程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
克莉絲汀?克雷恩霍費(fèi)爾（Kristin Kleinhofer）的抗癌故事始于七年前。最初，她的頭頂上悄悄長(zhǎng)出一個(gè)針尖樣小凸點(diǎn)，她以為那是一個(gè)囊腫，沒(méi)有在意。但它不是。后來(lái)，克莉絲汀被確診為急性淋巴母細(xì)胞性白血病。
走運(yùn)的是，她在2014年11月參加了美國(guó)弗雷德?哈欽森癌癥研究中心（Fred Hutchinson Cancer Research Center）開(kāi)展的一項(xiàng)稱(chēng)作CAR-T療法的臨床試驗(yàn)――研究人員運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造她的免疫細(xì)胞，然后回輸?shù)剿w內(nèi)，殺死癌細(xì)胞。
2016年2月，在美國(guó)科學(xué)促進(jìn)會(huì)（AAAS）年會(huì)上，參與這項(xiàng)臨床試驗(yàn)的免疫專(zhuān)家斯坦利?里德?tīng)枺⊿tanley Riddell）博士體驗(yàn)了一回當(dāng)“學(xué)術(shù)明星”的感覺(jué)，他公布的初步臨床試驗(yàn)結(jié)果引起轟動(dòng)：在29位接受治療的晚期急性淋巴細(xì)胞白血病患者當(dāng)中，有27位患者病情有某種程度的緩解，有效率高達(dá)93%，其中超過(guò)一半的患者甚至完全緩解。
要知道，參與這項(xiàng)臨床試驗(yàn)的都是晚期白血病患者，此前全都接受過(guò)化療等其他治療，并證明是無(wú)效的。
在基本無(wú)藥可救的狀態(tài)，僅剩幾個(gè)月的存活時(shí)間，CAR-T療法治療有效率竟高達(dá)90%以上，里德?tīng)栐谠u(píng)價(jià)自己的研究結(jié)果時(shí)，也稱(chēng)“不可思議”。
同樣的治療方法在非霍奇金淋巴瘤患者和慢性淋巴細(xì)胞性白血病患者身上，有效率分別在80%和50%以上，表現(xiàn)也不俗。
近五年，包括CAR-T療法在內(nèi)的免疫療法突飛猛進(jìn)，以至于有業(yè)內(nèi)專(zhuān)家稱(chēng)，在未來(lái)五年內(nèi)，免疫療法有望成為癌癥治療的“標(biāo)準(zhǔn)療法”。
美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理系終身教授卡爾?朱恩（Carl June）曾表示，一直以來(lái)，醫(yī)學(xué)界做出了很多醫(yī)治癌癥的承諾，現(xiàn)在，免疫療法正在將這些承諾變成現(xiàn)實(shí)。
癌癥治療史上最大的一次革命正在發(fā)生。 用自己的身體對(duì)抗癌癥
里德?tīng)枅F(tuán)隊(duì)人員從克莉絲汀的血液中提取出的T細(xì)胞，經(jīng)過(guò)基因修飾后，能夠識(shí)別并干掉腫瘤細(xì)胞，這些“殺手”被派遣回克莉絲汀體內(nèi)。
CAR-T療法中的“CAR”，有個(gè)拗口的名字，叫嵌合抗原受體，“T”是指T細(xì)胞，它是人體免疫系統(tǒng)中最優(yōu)秀的“獵人”。
帶有這種“嵌合抗原受體”的T細(xì)胞如果發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞，不僅會(huì)殺死它，還會(huì)開(kāi)始分裂，創(chuàng)造出一支滅癌大軍。
這一思路就是激活人體免疫系統(tǒng)，依靠人體自身的免疫機(jī)能去消滅癌細(xì)胞和腫瘤組織。
回輸T細(xì)胞的過(guò)程大約一個(gè)小時(shí)，克莉絲汀回憶，當(dāng)時(shí)她在腦海中想象，這些細(xì)胞像游戲里的吃豆人一樣，去吃光自己體內(nèi)的癌細(xì)胞。試驗(yàn)結(jié)果顯示，通常需要30天到60天后，很多患者體內(nèi)的癌細(xì)胞就消失了。
在絕大多數(shù)癌細(xì)胞剛出現(xiàn)的時(shí)候，人體的免疫系統(tǒng)就會(huì)識(shí)別并清除它們，將之扼殺，這就是身體的“免疫監(jiān)控”。然而，總有極少數(shù)癌細(xì)胞進(jìn)化出“偽裝”能力，掌握一套逃脫免疫系統(tǒng)識(shí)別的辦法。
人類(lèi)嘗試多種辦法來(lái)截殺癌細(xì)胞，皆不盡如人意。最直接的方式是手術(shù)切除，可一旦癌組織沒(méi)有切除干凈，就會(huì)復(fù)發(fā);放射療法和化學(xué)療法威力強(qiáng)大，但殺死癌細(xì)胞的同時(shí)，會(huì)消滅大量正常細(xì)胞，殺敵一千，自損八百。
消滅癌細(xì)胞，又不會(huì)傷害健康細(xì)胞的“靶向藥物”，在近些年問(wèn)世，遺憾的是，絕大多數(shù)靶向藥物在使用一段時(shí)間后，療效明顯下降，原因在于狡猾的癌細(xì)胞只要在靶向位點(diǎn)稍微發(fā)生一點(diǎn)基因變異，就能躲過(guò)靶向藥物的攻擊。 一名6歲的白血病患兒小磊（化名）接受cAR一T細(xì)胞免疫療法。圖/cFP
克莉絲汀經(jīng)歷的免疫療法似乎解決了以上缺陷。科學(xué)家認(rèn)為，CAR-T療法和檢查點(diǎn)阻斷藥物一起，將共同引領(lǐng)新一代免疫抗癌革命。
免疫系統(tǒng)不但能夠被激活，也會(huì)被抑制。免疫系統(tǒng)在發(fā)動(dòng)大規(guī)模攻擊之前，需要經(jīng)過(guò)一些被稱(chēng)為免疫檢查點(diǎn)的“關(guān)卡”，通^后才能發(fā)起“戰(zhàn)爭(zhēng)動(dòng)員”，以防攻錯(cuò)目標(biāo)。也就是說(shuō)，這些檢查點(diǎn)決定著T細(xì)胞的活化還是抑制。
癌癥能夠發(fā)病的原因，可能就在于癌細(xì)胞竊取了“口令”，將免疫系統(tǒng)一直卡在檢查點(diǎn)，使其無(wú)法被激活。如此一來(lái)，醫(yī)生可以通過(guò)阻斷這些檢查點(diǎn)，以釋放免疫系統(tǒng)的活力。
科學(xué)家已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CTLA-4、PD-1和PD-L1這三種抗體，可卡住免疫系統(tǒng)。其中，PD-1和PD-L1能夠特異性結(jié)合，一旦發(fā)生，T細(xì)胞便會(huì)進(jìn)入無(wú)應(yīng)答狀態(tài)，失去獵殺癌細(xì)胞的功能。
2011年，第一個(gè)針對(duì)“檢查點(diǎn)阻斷”的免疫治療藥物Yervoy獲得美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)上市，目前已有5種以上的腫瘤免疫治療藥物在美國(guó)上市，廣泛用于治療晚期黑色素瘤、腎癌、前列腺癌和肺癌等。 需要更多的驚喜
在加入免疫療法前，克莉絲汀曾經(jīng)歷過(guò)兩年化療，病情得到緩解。但好景不長(zhǎng)，一年半后癌癥復(fù)發(fā)，且惡化的速度比以前更快。此時(shí)，常規(guī)的放療和化療都不再適用。
FDA規(guī)定，腫瘤患者只有在標(biāo)準(zhǔn)療法失敗后，才可以考慮一種新的治療方法。克莉絲汀因而能夠參與到CAR-T療法的臨床試驗(yàn)。加入CAR-T療法的都是癌癥晚期或者其他治療方法無(wú)效的患者。
理論上講，腫瘤在早期階段體積較小，患者的免疫系統(tǒng)也相對(duì)更健康，免疫療法應(yīng)該能夠發(fā)揮更積極的效果;而那些接受過(guò)放療、化療的患者，免疫細(xì)胞被大量殺死，直接影響治療效果。
不過(guò)，免疫治療還沒(méi)能成為一線的用藥和治療，是因?yàn)镃AR-T療法、檢查點(diǎn)阻斷藥物都面臨著關(guān)鍵性的難題。同其他治療方法相比，科學(xué)家對(duì)免疫療法的研究尚未透徹，患者想便利地接受免疫治療需要時(shí)日。
“CAR-T療法在一些患者中有不良反應(yīng)，但大多數(shù)患者的不良反應(yīng)是可控的。”里德?tīng)柛嬖V《財(cái)經(jīng)》記者。
在前述臨床試驗(yàn)中，29位接受治療的癌癥患者當(dāng)中出現(xiàn)好幾例嚴(yán)重的全身過(guò)敏反應(yīng)，最終導(dǎo)致兩名患者死亡。盡管這些患者本來(lái)就是不治之癥，但這畢竟屬于嚴(yán)重的不良反應(yīng)事件，需要更多研究搞清楚原因。
在接下來(lái)的試驗(yàn)中，里德?tīng)柎蛩銣p少T細(xì)胞的數(shù)量，預(yù)期能降低不良反應(yīng)的程度。
至少在克莉絲汀的感受中，CAR-T療法的不良反應(yīng)比她曾經(jīng)接受的化療要小得多。化療讓她長(zhǎng)期處于疲勞狀態(tài)、皮膚膿腫、心臟也受損。在CAR-T細(xì)胞輸注后，她高燒五天，血壓也在下降，伴隨著發(fā)熱、打顫、全身酸痛。當(dāng)她早上醒來(lái)時(shí)，病號(hào)服都被汗水濕透。
好在這種痛苦是暫時(shí)的。一星期后，她感覺(jué)恢復(fù)得很好，甚至去逛了西雅圖的幾個(gè)著名景點(diǎn)。
除了不良反應(yīng)，治療癌癥種類(lèi)的局限性，是免疫療法面臨的另一大問(wèn)題。
從理論上說(shuō)，檢查點(diǎn)阻斷藥物應(yīng)該是對(duì)多種癌癥都有效的廣譜藥，但現(xiàn)實(shí)是，它目前只對(duì)一些癌癥種類(lèi)的一部分患者有效果，對(duì)霍奇金淋巴瘤有效率接近90%，然而在消化道腫瘤如胃癌、食管癌和肝癌的有效率僅30%左右。
此外，對(duì)卵巢癌、結(jié)直腸癌、胃癌和胰腺癌等實(shí)體瘤，檢查點(diǎn)阻斷藥物也不那么好用。
這說(shuō)明，對(duì)檢查點(diǎn)阻斷藥物的研究尚未完全成熟。“未來(lái)會(huì)有新的免疫檢查點(diǎn)被發(fā)現(xiàn)。”里德?tīng)栒f(shuō)。
CAR-T療法無(wú)論在美國(guó)還是中國(guó)，都未正式通過(guò)批準(zhǔn)。從2010年CAR-T療法第一次臨床試驗(yàn)以來(lái)，絕大多數(shù)臨床研究都針對(duì)白血病的治療，缺少其他實(shí)體腫瘤的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，如何推廣到其他種類(lèi)的癌癥，是一個(gè)重要挑戰(zhàn)。
不過(guò)，F(xiàn)DA對(duì)CAR-T療法給予了優(yōu)先評(píng)估的待遇。里德?tīng)柟烙?jì)，由于在白血病治療的“突破”，可能會(huì)讓CAR-T細(xì)胞較快被批準(zhǔn)，“在2017年，CAR-T細(xì)胞將被批準(zhǔn)用于治療B細(xì)胞急性白血病，在此后某個(gè)時(shí)間，會(huì)被批準(zhǔn)用于治療某些類(lèi)型的淋巴瘤”。
醫(yī)學(xué)界和產(chǎn)業(yè)界都在努力將免疫療法推向一線治療，也就是在患者剛發(fā)現(xiàn)患癌時(shí)，就嘗試使用免疫治療。
2016年10月25日，一個(gè)標(biāo)志性的時(shí)刻來(lái)到：免疫藥物Keytruda被FDA批準(zhǔn)，用于一線治療肺癌。這宣告肺癌治療正式邁進(jìn)了免疫時(shí)代。
免疫療法成為和化療、靶向藥物平行的主流選擇之一。它意味著很多肺癌患者將不再需要先化療，而可以直接使用免疫藥物。
美國(guó)諾華制藥公司癌癥新藥開(kāi)發(fā)部資深研究員李治中告訴《財(cái)經(jīng)》記者，免疫治療藥物的興起，使醫(yī)藥界對(duì)靶向藥物沒(méi)有以前那么狂熱了。以后追求的是混合療法，即靶向藥物+免疫治療。 中國(guó)的競(jìng)爭(zhēng)者
奧巴馬在自己任期內(nèi)的最后一次國(guó)情咨文演講中，倡導(dǎo)投入更多資源對(duì)抗癌癥，主攻免疫療法。
免疫療法的興起將逐漸改變癌癥的治療方式，它吸引著越來(lái)越多的研究機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)以及生物公司投入進(jìn)來(lái)。
專(zhuān)門(mén)投資醫(yī)療健康領(lǐng)域的Leerink Partners公司預(yù)測(cè)，全球腫瘤免疫治療市場(chǎng)規(guī)模到2020年將達(dá)167億美元，2025年將實(shí)現(xiàn)超2倍增長(zhǎng)，達(dá)到361億美元。其中，抗非小細(xì)胞肺癌藥物占據(jù)大約50%的市場(chǎng)份額。
CAR-T療法的研發(fā)十分熱鬧，全球多個(gè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)、研發(fā)類(lèi)公司聚焦于此。但受限于臨床研究患者數(shù)目，均處于實(shí)驗(yàn)室階段。
據(jù)才金資本創(chuàng)始合伙人宮惠珉觀察，在臨床試驗(yàn)上取得效果后，憑著技術(shù)再融資，“從商業(yè)上還不是很成熟”，生產(chǎn)成本和復(fù)雜性都可能直接限制CAR-T療法的市場(chǎng)容量。
中國(guó)市場(chǎng)尚沒(méi)有癌癥免疫治療藥物獲批。無(wú)論成藥在手的國(guó)外制藥巨頭，還是快馬加鞭的國(guó)內(nèi)公司，若能在中國(guó)市場(chǎng)拔得頭籌都意義重大。
中國(guó)有眾多的創(chuàng)新型醫(yī)藥公司加入了癌癥免疫治療藥物的研發(fā)競(jìng)賽。國(guó)家藥審中心首席科學(xué)家何如意曾表示，現(xiàn)在國(guó)內(nèi)有幾十家企業(yè)都在做這類(lèi)藥物的研發(fā)，這種熱情是別的國(guó)家比不了的。
百濟(jì)神州（北京）生物科技有限公司研發(fā)的PD-1單抗腫瘤免疫藥物“BGB-A317”，在進(jìn)行晚期實(shí)體瘤的臨床I期試驗(yàn)，它與國(guó)外已經(jīng)上市的兩種PD-1抗體藥相比，設(shè)計(jì)上有顯著差異性，即通過(guò)生物工程技術(shù)特異性去除了某個(gè)受體的結(jié)合能力。
百濟(jì)生物藥研發(fā)總監(jiān)李康博士曾表示：這一設(shè)計(jì)可能會(huì)在一部分腫瘤中顯示出優(yōu)勢(shì)。當(dāng)然，這種差異能否轉(zhuǎn)化成臨床用藥上的優(yōu)勢(shì)，有待證實(shí)。
通過(guò)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)網(wǎng)站Clinicaltrials.gov查詢(xún)，截至2017年3月30日，全球注冊(cè)的關(guān)于CAR-T的臨床試驗(yàn)有310項(xiàng)之多，其中中國(guó)研究者貢獻(xiàn)89項(xiàng)：2015年共有15項(xiàng)，2016年注冊(cè)49項(xiàng)，2017年前三個(gè)月新增10項(xiàng)，中國(guó)的臨床研究增長(zhǎng)勢(shì)頭迅猛。
不過(guò)，國(guó)內(nèi)的諸多研究都處于臨床前研究和臨床試驗(yàn)階段，距離通過(guò)審批上市遙遠(yuǎn)，且沒(méi)有明確的時(shí)間表。
可是，國(guó)內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)細(xì)胞免疫療法被濫用的現(xiàn)象。
2016年5月，21歲的癌癥患者魏則西在武警北京總隊(duì)第二醫(yī)院（武警二院）接受生物免疫療法治療后，醫(yī)治無(wú)效死亡。事件引發(fā)了廣泛、多視角的爭(zhēng)論與交鋒。
單從技術(shù)迭代的角度看，CAR-T療法屬于免疫細(xì)胞療法的第四代技術(shù);武警二院所采用的CIK-DC療法屬于免疫細(xì)胞療法的第二、三代療法，美國(guó)也曾開(kāi)展過(guò)臨床研究，可惜沒(méi)有大規(guī)模臨床試驗(yàn)證明其有效，美國(guó)已鮮有開(kāi)展相關(guān)的研究。
在中國(guó)，有一批機(jī)構(gòu)在缺少大規(guī)模、正規(guī)的臨床試驗(yàn)的情況下，直接開(kāi)始推廣已經(jīng)過(guò)時(shí)的免疫療法，并收取高額費(fèi)用。
2016年5月4日，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委明確要求細(xì)胞免疫治療須停止應(yīng)用于臨床治療，而僅限于臨床研究。
歷經(jīng)這場(chǎng)風(fēng)波，免疫治療的名聲在一定程度上受損，但免疫治療進(jìn)入中國(guó)是大菟趨。
一個(gè)利好消息是，國(guó)家食藥監(jiān)總局啟動(dòng)了進(jìn)口藥審批的變革。3月17日，《關(guān)于調(diào)整進(jìn)口藥品注冊(cè)管理有關(guān)事項(xiàng)的決定（征求意見(jiàn)稿）》，簡(jiǎn)化境外未上市新藥進(jìn)入中國(guó)的多項(xiàng)限制。比如鼓勵(lì)境外未上市的新藥經(jīng)批準(zhǔn)后在境內(nèi)外同步開(kāi)展臨床試驗(yàn)，并取消進(jìn)口藥應(yīng)當(dāng)獲得境外制藥廠商所在生產(chǎn)國(guó)家或者地區(qū)的上市許可要求的限制。
【關(guān)鍵詞】早產(chǎn)兒;呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎;口腔免疫療法
接受機(jī)械通氣的早產(chǎn)兒呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(VAP)發(fā)生概率較高，是造成患兒死亡的主要原因［1］。早產(chǎn)兒由于口腔自?xún)裟芰Φ停谇火つけ∧郏资軗p傷和發(fā)生局部感染，因此做好機(jī)械通氣患兒口腔免疫干預(yù)十分重要。口腔免疫療法指用無(wú)菌棉簽蘸取少量的初乳(通常為0．2ml)，涂抹于患兒的口腔兩頰，通過(guò)口腔黏膜吸收達(dá)到免疫效果。初乳中含有豐富的細(xì)胞因子和免疫制劑，可提供抑菌、殺菌、調(diào)節(jié)免疫、抗感染等保護(hù)作用［2］。為此，本研究觀察口腔免疫療法對(duì)早產(chǎn)兒VAP的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1．1一般資料
選取我院2018年1月至2019年1月接收的早產(chǎn)兒120例作為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn):符合早產(chǎn)兒診斷標(biāo)準(zhǔn);出生體質(zhì)量1．5～2．5kg;出生后24h內(nèi)入院;需經(jīng)氣管插管接呼吸機(jī)輔助通氣。所有家長(zhǎng)自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):患兒存在嚴(yán)重威脅生命的疾病(如嚴(yán)重的心臟病等)，且預(yù)計(jì)存活時(shí)間＜7d;母親存在下列情況之一，即不能提供初乳者，患有活動(dòng)性結(jié)核、艾滋病、肝炎，正在接受放射性治療或化療，母乳檢測(cè)巨細(xì)胞病毒(CMV)陽(yáng)性;患兒存在本次入院期間需進(jìn)行外科干預(yù)的疾病［3－4］。剔除標(biāo)準(zhǔn):中途退出放棄研究者。隨機(jī)等分為3組，對(duì)照組1:男22例，女18例;胎齡29～37周，平均(34．22±1．56)周;體質(zhì)量1．3～5．2kg，平均(2．69±0．45)kg。對(duì)照組2:男20例，女20例;胎齡28～38周，平均(34．36±1．42)周;體質(zhì)量1．2～5．1kg，平均(2．70±0．41)kg。試驗(yàn)組:男21例，女19例;胎齡29～38周，平均(34．61±1．44)周;體質(zhì)量1．4～5．0kg，平均(2．68±0．47)kg。3組患兒性別、胎齡、體質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)，具有可比性。
1．2方法
120例患兒均經(jīng)氣管插管接Stephanie小兒呼吸機(jī)輔助呼吸，采用靜脈營(yíng)養(yǎng)、藥物治療等常規(guī)治療措施;由護(hù)理人員協(xié)助患兒取半坐臥位，抬高暖箱或者調(diào)高搶救臺(tái)床頭30°，根據(jù)患兒情況吸痰，規(guī)范吸痰流程，嚴(yán)格執(zhí)行手消毒［5］及無(wú)菌操作原則。2h為患兒翻身、叩背1次，患兒取俯臥位通氣，必要時(shí)應(yīng)用新生兒面罩制作的叩背器為其叩背;2h添加1次濕化水，每天更換濕化罐與濕化水，其中濕化水應(yīng)用滅菌注射用水;每2h清除1次患兒呼吸機(jī)冷凝水，同時(shí)放置含氯消毒液(500mg/L)的冷凝水收集桶，加蓋;每天擦拭搶救臺(tái)、監(jiān)護(hù)儀、暖箱以及呼吸機(jī)等設(shè)備，呼吸機(jī)管路每周更換1次;留置胃管患兒，必須2h及鼻飼前回抽胃內(nèi)空氣，避免影響通氣效果、發(fā)生胃食管反流等情況;密切觀察患兒生命體征，若有異常及時(shí)匯報(bào)醫(yī)師［6］。對(duì)照組1采用0．9%氯化鈉溶液進(jìn)行口腔護(hù)理，對(duì)照組2采用5%碳酸氫鈉溶液進(jìn)行口腔護(hù)理，兩組均由護(hù)理人員洗手后應(yīng)用無(wú)菌棉簽蘸取0．9%氯化鈉溶液或5%碳酸氫鈉溶液擦拭患兒口腔;擦拭順序:頰黏膜、牙齦、硬腭、舌面、舌下;每3h1次，持續(xù)72h。試驗(yàn)組給予口腔免疫療法:護(hù)理人員洗手后從冷藏室取出儲(chǔ)奶袋，使用1ml注射器抽取0．2ml初乳，放置于室溫條件下5min，使用低負(fù)壓將早產(chǎn)兒口腔淤積分泌物輕柔吸出，然后取初乳0．2ml，用無(wú)菌棉簽蘸取初乳擦拭口腔，擦拭順序:頰黏膜、牙齦、硬腭、舌面、舌下，每3h1次，持續(xù)72h。
1．3觀察指標(biāo)
觀察3組患者口腔護(hù)理72h后口咽部分泌物及氣管導(dǎo)管分泌物陽(yáng)性率，以及口腔感染率、VAP發(fā)生率。口腔感染:參考《實(shí)用口腔內(nèi)科學(xué)》，口腔黏膜有水腫、紅斑、鵝口瘡、潰瘍、水腫、糜爛則判斷為口腔感染。VAP［6］:若體溫高于37．5℃，胸片有新的或進(jìn)行性肺浸潤(rùn)，肺部可聞濕啰音，呼吸道分泌物細(xì)菌培養(yǎng)為陽(yáng)性(檢出克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌或者葡萄球菌等)，WBC＞10×109/L，CRP＞8mg/L即可診斷。患兒上機(jī)1h內(nèi)、72h后及撤機(jī)時(shí)采集口咽部分泌物、氣管導(dǎo)管分泌物，應(yīng)用一次性無(wú)菌咽拭子擦拭咽部深處分泌物，應(yīng)用無(wú)菌吸痰管，于下呼吸道取分泌物，采集完成20min內(nèi)送檢，以上操作均在無(wú)菌操作下完成［7］。
1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS19．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料的比較用多樣本的χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0．05。
2結(jié)果
2．13組患兒細(xì)菌培養(yǎng)情況比較
試驗(yàn)組口咽部分泌物陽(yáng)性率、氣管導(dǎo)管分泌物陽(yáng)性率分別為2．50%，2．50%，低于對(duì)照組1和對(duì)照組2，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)，見(jiàn)表1。
2．23組患兒口腔感染、VAP發(fā)生率比較
試驗(yàn)組口腔感染、VAP發(fā)生率分別為2．50%，2．50%，低于對(duì)照組1和對(duì)照組2，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)，見(jiàn)表2。
單細(xì)胞基因組測(cè)序
隨著微流控技術(shù)、罕見(jiàn)細(xì)胞分離技術(shù)以及對(duì)單基因組破譯能力的提高，單細(xì)胞基因組測(cè)序研究于2012年悄然崛起，并有望于2013年獲得重大突破。
多數(shù)的基因組測(cè)序是通過(guò)提取大量細(xì)胞中的DNA后進(jìn)行的。為了獲得足夠的DNA進(jìn)行測(cè)序，通常需要數(shù)以千計(jì)、甚至數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的細(xì)胞。這種測(cè)序方法，忽略了細(xì)胞與細(xì)胞之間的差異。而這些差異對(duì)于控制基因表達(dá)、細(xì)胞行為和藥物反應(yīng)有可能是至關(guān)重要的。近年，科學(xué)家們發(fā)明了一種可以對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行基因組測(cè)序的單細(xì)胞基因組測(cè)序技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了從生命活動(dòng)的最基本單位——細(xì)胞這個(gè)層次，去研究生物的生長(zhǎng)、發(fā)育、生殖、遺傳和變異等過(guò)程。如今，在微生物生態(tài)學(xué)、癌癥基因組、法醫(yī)學(xué)、微量診斷和遺傳印記等研究中，單細(xì)胞基因組測(cè)序技術(shù)使其研究和檢測(cè)更深入、更細(xì)致，從而帶動(dòng)基礎(chǔ)科學(xué)新的發(fā)現(xiàn)，也將給人類(lèi)對(duì)抗疾病、保障健康和提高生命壽命和質(zhì)量帶來(lái)很多新的機(jī)會(huì)。
單細(xì)胞基因組測(cè)序技術(shù)的建立需要兩個(gè)必備條件：一是高質(zhì)量的全基因組擴(kuò)增技術(shù)，二是高通量低成本的測(cè)序技術(shù)。2012年元月，測(cè)序巨頭們幾乎同時(shí)推出了新一代測(cè)序儀，為單細(xì)胞基因組測(cè)序提供“利器”。在這一年里，幾乎每個(gè)星期都有重要成果在頂級(jí)期刊發(fā)表。
美國(guó)斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)中心的研究人員借助單細(xì)胞基因組測(cè)序技術(shù)首次對(duì)源自一名男性的91個(gè)細(xì)胞的全部基因組進(jìn)行了測(cè)序，發(fā)現(xiàn)許多新的重組熱點(diǎn)和與間接方法發(fā)現(xiàn)的相一致的比率。隨后他更深程度地測(cè)序了8個(gè)足以確定突變率。這將有助于了解自然發(fā)生的個(gè)體遺傳突變，對(duì)于不孕不育癥的研究具有重要意義。
美國(guó)艾伯特愛(ài)因斯坦醫(yī)學(xué)院的研究人員在2012年冷泉港的基因組生物學(xué)會(huì)議上報(bào)告說(shuō)，對(duì)近200個(gè)細(xì)胞進(jìn)行的測(cè)序，估算出捐精給他們的男子的重組率。研究者發(fā)現(xiàn)每個(gè)細(xì)胞平均有24.5個(gè)重組事件，與來(lái)自間接實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相一致。
加拿大英屬哥倫比亞大學(xué)等處的研究人員研發(fā)出了一種稱(chēng)為Strand-seq的新型測(cè)序方法，這種單細(xì)胞基因組測(cè)序新方法能分別對(duì)單細(xì)胞的雙親DNA模板鏈進(jìn)行測(cè)序，獲得高分辨率的姊妹染色體交換圖譜。在細(xì)胞分裂過(guò)程中，當(dāng)雙螺旋解旋后，兩條染色體上的遺傳信息偶然會(huì)出現(xiàn)交換，如果這樣的交換水平不斷提高，也就是DNA損傷和癌癥的一個(gè)標(biāo)志，那么傳統(tǒng)的基因組測(cè)序方法就無(wú)法檢測(cè)出來(lái)。利用Strand-seq方法，研究人員可以完成單鏈DNA測(cè)序，并發(fā)現(xiàn)了首個(gè)基因組壓力和不穩(wěn)定性的痕跡。這種方法能來(lái)捕捉DNA一條鏈上的信息，并且能令研究人員對(duì)親本DNA模板鏈進(jìn)行單細(xì)胞基因組測(cè)序。
目前，單細(xì)胞基因組測(cè)序仍然處于不成熟的階段，在技術(shù)上和成本上還遠(yuǎn)沒(méi)有達(dá)到大規(guī)模應(yīng)用的地步。但我們有理由相信：在2013年，單細(xì)胞基因組測(cè)序有望揭示更多信息，如了解癌細(xì)胞如何在腫瘤內(nèi)變化以及每個(gè)細(xì)胞內(nèi)“定居”著多少版本的基因，相關(guān)技術(shù)有望用于癌癥診斷。在不遠(yuǎn)的未來(lái)，單細(xì)胞基因組測(cè)序?qū)?huì)使組織器官內(nèi)細(xì)胞基因組的異質(zhì)性研究、干細(xì)胞的異質(zhì)性研究、生殖細(xì)胞的遺傳重組研究和胚胎的植入前遺傳學(xué)診斷研究更加精準(zhǔn)。
NO.2
“普朗克”衛(wèi)星
探測(cè)宇宙微波背景輻射
宇宙微波背景輻射（又稱(chēng)3K背景輻射）是一種充滿(mǎn)整個(gè)宇宙的電磁輻射。目前科學(xué)界普遍認(rèn)為，宇宙誕生于距今137億年前的一次大爆炸，微波背景輻射是大爆炸的“余燼”，它均勻地分布在整個(gè)宇宙空間。更精確地觀測(cè)宇宙微波背景輻射，對(duì)于揭開(kāi)宇宙形成和演變等宇宙奧秘至關(guān)重要。為此，宇宙背景輻射的發(fā)現(xiàn)與類(lèi)星體、脈沖星、星際有機(jī)分子一道，并稱(chēng)為20世紀(jì)60年代天文學(xué)“四大發(fā)現(xiàn)”。美國(guó)貝爾實(shí)驗(yàn)室的工程師阿諾·彭齊亞斯和羅伯特·威爾遜也因發(fā)現(xiàn)了宇宙微波背景輻射而獲得1978年的諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。
根據(jù)1989年11月升空的宇宙背景探測(cè)者（簡(jiǎn)稱(chēng)COBE）測(cè)量到的結(jié)果，宇宙微波背景輻射譜非常精確地符合溫度為2.726±0.010K的黑體輻射譜，宇宙背景輻射具有高度各向同性，溫度漲落的幅度只有大約百萬(wàn)分之五。2006年，負(fù)責(zé)COBE項(xiàng)目的美國(guó)科學(xué)家約翰·馬瑟和喬治·斯穆特因?qū)Α坝钪嫖⒉ū尘拜椛涞暮隗w形式和各向異性”而獲得諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。
2003年，美國(guó)發(fā)射的威爾金森微波各向異性探測(cè)器對(duì)宇宙微波背景輻射在不同方向上的漲落的測(cè)量表明，宇宙的年齡是137±1億年，在宇宙的組成成分中，4%是一般物質(zhì)，23%是暗物質(zhì)，73%是暗能量。宇宙目前的膨脹速度是每秒71公里每百萬(wàn)秒差距，宇宙空間是近乎于平直的，它經(jīng)歷過(guò)暴脹的過(guò)程，并且會(huì)一直膨脹下去。
為了精確探測(cè)宇宙微波背景輻射，歐洲航天局于2009年5月14日發(fā)射升空“普朗克”探測(cè)衛(wèi)星。這顆以德國(guó)物理學(xué)家馬克斯·普朗克的名字命名的衛(wèi)星，攜帶了一系列高靈敏度儀器，能夠?qū)τ钪嫖⒉ū尘拜椛溥M(jìn)行深入探測(cè)。“普朗克”衛(wèi)星的靈敏度是“威爾金森微波各向異性探測(cè)器”的10倍。“普朗克”衛(wèi)星具有更高的角分辨率，比“威爾金森微波各向異性探測(cè)器”高2.5倍，比“宇宙背景探測(cè)器”高了50多倍。該衛(wèi)星可繪制宇宙微波背景圖，角分辨率在10弧分以上，能確定宇宙的空間曲率，并能分辨某處天區(qū)中百萬(wàn)分之一度的溫度差異，而且繪制的宇宙微波背景圖能夠自動(dòng)將來(lái)自銀河系和河外星系的光譜輻射從宇宙背景信號(hào)中去除。2013年，“普朗克”衛(wèi)星將對(duì)宇宙微波背景輻射進(jìn)行迄今最精確的繪圖，以更高的精度檢測(cè)現(xiàn)在的宇宙學(xué)理論，并可能發(fā)現(xiàn)證據(jù)補(bǔ)充或修正“大爆炸”理論。
NO.3
人腦連接組計(jì)劃
人腦連接組計(jì)劃是美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院資助的一個(gè)為期5年的科研項(xiàng)目。該計(jì)劃投資3850萬(wàn)美元，于2010年正式啟動(dòng)，華盛頓大學(xué)等4所大學(xué)承接了這個(gè)艱巨任務(wù)。
人腦連接組計(jì)劃旨在通過(guò)腦成像技術(shù)（主要是靜息態(tài)功能磁共振成像，彌散磁共振成像，傳統(tǒng)的腦電圖、腦磁圖等作為補(bǔ)充），掃描1200名健康成年人（其中包括300對(duì)雙胞胎）的大腦，比較他們大腦各區(qū)域神經(jīng)連接的不同，以及如何由此導(dǎo)致認(rèn)知和行為方面的個(gè)體差異，最終描繪出人類(lèi)大腦的所有神經(jīng)連接情況和功能、結(jié)構(gòu)“圖譜”。這一計(jì)劃不僅樣本量非常大，而且使用比較先進(jìn)的技術(shù)。當(dāng)然還少不了問(wèn)卷、行為、基因測(cè)序等，進(jìn)行綜合研究。這是目前腦成像界最大的項(xiàng)目了。
人腦連接組計(jì)劃可以幫助人們?nèi)婕?xì)致地刻畫(huà)大腦內(nèi)部的組織模式，改變長(zhǎng)久以來(lái)大腦的研究方式，即不再將大腦視為數(shù)量巨大的離散的解剖單元或者化學(xué)物質(zhì)的集合體，而是由彼此縱橫交叉相互連接的神經(jīng)元細(xì)胞構(gòu)成的復(fù)雜統(tǒng)一體。整個(gè)大腦連接圖就像地圖一樣，也包括交通樞紐、交通要道等，這些區(qū)域的不同可能會(huì)帶來(lái)明顯的個(gè)體差異。
2013年，人腦連接組計(jì)劃有望取得重要進(jìn)展。一旦采集到的所有數(shù)據(jù)被公開(kāi)，研究者可以更全面地了解整個(gè)人腦的結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)一步推動(dòng)腦、行為認(rèn)知等方面的深入研究。
NO.4
探索南極冰下世界
2012年2月5日，俄羅斯科考隊(duì)員經(jīng)過(guò)十幾年努力，鉆透3769米冰層，觸及覆蓋在南極冰川下超過(guò)2000萬(wàn)年的巨大淡水湖，這也是人類(lèi)首次鉆開(kāi)南極冰下淡水湖。這一消息的，引起世界各國(guó)科學(xué)家，尤其是極地科學(xué)家們極大的關(guān)注和濃厚的興趣。
從發(fā)現(xiàn)到觸及南極冰下最大的淡水湖，俄羅斯研究人員花了近20年。早在1994年羅馬召開(kāi)的第23屆國(guó)際南極研究科學(xué)委員會(huì)會(huì)議上，俄羅斯研究人員卡皮茨亞博士就宣布，在俄羅斯南極內(nèi)陸考察站“東方站”的冰蓋之下約4000米深處，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)巨大的湖泊，命名為東方湖。
南極冰下淡水湖是由冰凍圈-水圈-生物圈-巖石圈組成的低溫大約零下30攝氏度）、高壓（大約350大氣壓）、低營(yíng)養(yǎng)輸入和黑暗的封閉系統(tǒng)，冰下湖已經(jīng)被冰封了2000萬(wàn)年之久，擁有獨(dú)特的與世隔絕的環(huán)境，是一個(gè)天然實(shí)驗(yàn)室。可用于研究生命如何適應(yīng)極端環(huán)境以及如何在這種環(huán)境下進(jìn)化。例如，在南極冰雪中和冰下淡水湖中可能存在的主要是菌類(lèi)微生物，而且處于休眠狀態(tài)，但可能仍具有生物活性或本來(lái)就存活著。研究這些細(xì)菌的種類(lèi)和群落結(jié)構(gòu)的多樣性，可能獲得生命起源的多樣性，并揭示不同地質(zhì)條件下地球生物的演化規(guī)律。
科學(xué)家猜測(cè)，如果東方湖中有生命存在，那也只能是極端微生物。是一種適合生存于極端環(huán)境中的生命形態(tài)，它可以耐得住極端高壓、永恒的嚴(yán)寒、低營(yíng)養(yǎng)輸入、高濃度氧氣以及無(wú)陽(yáng)光等各種極端情況。研究這些細(xì)菌的種類(lèi)和群落結(jié)構(gòu)的多樣性，可能獲得生命起源的多樣性，并揭示不同地質(zhì)條件下地球生物的演化規(guī)律。據(jù)悉，俄羅斯計(jì)劃在2013年的南極夏季，將一個(gè)水下機(jī)器人送入湖中采集湖水樣本和湖底沉積物樣本。到那時(shí)，神秘的南極冰下世界將有更多的奧秘被揭開(kāi)。
NO.5
腫瘤免疫療法
腫瘤免疫療法是一類(lèi)應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)手段對(duì)患者自身的免疫細(xì)胞進(jìn)行活化增殖，提高抗腫瘤活性，由免疫的力量抑制或殺滅腫瘤細(xì)胞，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)的治療方法。它是繼手術(shù)療法、放射療法、化學(xué)療法、中醫(yī)療法之后，近幾年國(guó)際上最新采用的一種新型腫瘤治療方法。
腫瘤免疫療法根據(jù)是否主動(dòng)促進(jìn)機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答分為主動(dòng)免疫治療及被動(dòng)免疫治療；前者如腫瘤疫苗，后者主要包括抗體、殺傷性細(xì)胞和細(xì)胞因子等。腫瘤疫苗包括細(xì)胞瘤苗、蛋白多肽瘤苗以及核酸瘤苗等，通過(guò)提取腫瘤抗原進(jìn)行免疫接種，從而促進(jìn)機(jī)體抗腫瘤特異性免疫應(yīng)答。
腫瘤免疫療法的優(yōu)點(diǎn)在于：被激活的人體自身免疫活性細(xì)胞不僅能夠直接清除體內(nèi)的殘存腫瘤細(xì)胞，而且能夠提高機(jī)體的整體免疫功能，同時(shí)還能把患者個(gè)體特異性的腫瘤抗原信息傳遞給體內(nèi)腫瘤免疫殺傷細(xì)胞。免疫細(xì)胞能夠正確區(qū)別正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，不傷害人體的正常細(xì)胞和生理機(jī)能，避免了放療、化療給病人造成的不良反應(yīng)，適合于各種病程、各種體質(zhì)的腫瘤人群。
腫瘤免疫治療既可以獨(dú)立治療腫瘤，又可以與放療、化療、手術(shù)配合應(yīng)用，具有獨(dú)特性，為腫瘤的治療開(kāi)辟了新途徑。即先用常規(guī)的療法清除大量的瘤細(xì)胞，再用免疫療法清除殘留的腫瘤細(xì)胞，可獲得較好的療效，并能減少化療、放療的副作用、增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。目前在臨床中免疫療法已被成功應(yīng)用于前列腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、乳腺癌、肺癌等多種腫瘤的治療，顯著提高患者的生存質(zhì)量。
近年來(lái)，腫瘤免疫治療領(lǐng)域產(chǎn)生了許多重大的事件，如2010年4月美國(guó)FDA批準(zhǔn)了dendreon公司研發(fā)的世界上第一個(gè)癌癥治療性疫苗Sipuleucel-T（Provenge）用于無(wú)癥狀或微小癥狀、去勢(shì)抗性的轉(zhuǎn)移性晚期前列腺癌的治療；2011年3月又批準(zhǔn)了易普利姆瑪（ipilimumab）用于晚期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的治療，易普利姆瑪是一種單克隆抗體靶向藥物，能有效阻滯一種叫做細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4（CTLA-4）的分子，該分子對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用，常會(huì)削弱機(jī)體免疫系統(tǒng)殺死癌細(xì)胞的能力。
細(xì)胞療法是目前腫瘤免疫治療研究的前沿和熱點(diǎn)，是一種非常個(gè)體化的腫瘤免疫治療方式，常需要利用患者自身的免疫細(xì)胞，通過(guò)對(duì)自身的免疫細(xì)胞進(jìn)行體外擴(kuò)增、修飾或改造后再回輸至患者體內(nèi)，實(shí)現(xiàn)抗腫瘤的目的。
NO.6
植物基礎(chǔ)研究
植物基礎(chǔ)研究有望在2013年獲得多項(xiàng)新成果。首先值得關(guān)注的是生物燃料植物的研究與利用，如利用微藻生產(chǎn)生物燃料。微藻是一種浮游的光自養(yǎng)微生物類(lèi)群，廣泛存在于海洋、湖泊、河流等水體環(huán)境中，其中有很多藻種在特定環(huán)境條件下，可以積累大量的油脂產(chǎn)物，用于生物柴油生產(chǎn)。藻類(lèi)的一大優(yōu)勢(shì)是它不會(huì)爭(zhēng)奪糧食作物的土地。其另一特點(diǎn)在于光合作用效率高，易于規(guī)模化培養(yǎng)，且能夠積累多種能源物質(zhì)。此外，微藻生長(zhǎng)周期短，細(xì)胞繁殖速度快，單位面積產(chǎn)量是油料植物的數(shù)十到數(shù)百倍以上。
2012年7月，法國(guó)大型生物技術(shù)公司Cellectis宣稱(chēng)：到2013年1月，公司將證明基因組改造能使用微藻來(lái)制造第三代生物燃料。目前，Cellectis公司應(yīng)主要證明其技術(shù)在藻類(lèi)植物中的有效性。Cellectis公司研發(fā)了能夠干預(yù)DNA的分子剪刀，通過(guò)此分子剪刀，能夠改變或更換疾病突變載體基因，并改變植物機(jī)體。
據(jù)海藻生物燃料組織統(tǒng)計(jì)，目前美國(guó)有 60 家對(duì)海藻進(jìn)行基因工程改造的公司，藍(lán)寶石公司是同類(lèi)企業(yè)中最有發(fā)展前途的公司之一。公司創(chuàng)始人兼 CEO杰森·派爾是分子生物學(xué)家。2007 年，派爾和他的團(tuán)隊(duì)開(kāi)始從近 40 種產(chǎn)油海藻入手，從那以后他們對(duì) 10 萬(wàn)種海藻進(jìn)行了基因工程改造。他們的目標(biāo)是迅速分離出那些產(chǎn)油量極高的海藻種類(lèi)。
另?yè)?jù)物理學(xué)家組織網(wǎng)2013年1月8日?qǐng)?bào)道，美國(guó)加州大學(xué)戴維斯分校的化學(xué)家最近通過(guò)基因工程對(duì)藍(lán)藻進(jìn)行了改造，使其能生產(chǎn)出2，3丁二醇，這是一種用于制造燃料和塑料的前化學(xué)品，也是生產(chǎn)生物化工原料以替代化石燃料的第一步。相關(guān)在2013年1月7日的美國(guó)《國(guó)家科學(xué)院院刊》上。研究小組利用網(wǎng)上數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)了幾種酶，恰好能執(zhí)行他們正在尋找的化學(xué)反應(yīng)。他們將能合成這些酶的DNA引入了藍(lán)藻細(xì)胞，隨后逐步地構(gòu)建出了一條“三步驟”的反應(yīng)路徑，能使藍(lán)藻將二氧化碳轉(zhuǎn)化為2，3丁二醇。
另一個(gè)值得關(guān)注的是轉(zhuǎn)基因作物。據(jù)了解，目前世界各國(guó)已累計(jì)批準(zhǔn)21種轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化應(yīng)用，涉及100多個(gè)轉(zhuǎn)化體，13類(lèi)目標(biāo)性狀，其功能大致可以分為兩類(lèi)：第一類(lèi)著重于發(fā)展抗性轉(zhuǎn)基因，例如抗除草劑、抗蟲(chóng)、抗旱、抗鹽堿和抗寒等；第二類(lèi)側(cè)重于改變作物的品質(zhì)，比如增加營(yíng)養(yǎng)、提高食品的醫(yī)療保健功能等，以及作為工業(yè)、藥物、能源原料。
值得注意的早期信號(hào)
前列腺癌是一種進(jìn)展比較迅速的惡性腫瘤，有資料表明，如果得不到早期診治，從發(fā)現(xiàn)癥狀開(kāi)始，平均存活期只有3～5年。實(shí)際上，前列腺癌出現(xiàn)癥狀時(shí)多半已不屬于早期，而且因癌腫長(zhǎng)大阻塞膀胱出口和壓扁尿道，會(huì)出現(xiàn)尿頻、夜尿增多、排尿困難以及血尿等癥狀，與前列腺增生的臨床表現(xiàn)相似，容易誤診為前列腺增生癥。另外，前列腺癌很早就可發(fā)生轉(zhuǎn)移，出現(xiàn)的轉(zhuǎn)移癥狀有時(shí)竟會(huì)比局部癥狀更明顯，甚至還可能早于局部癥狀。部分病例以轉(zhuǎn)移癥狀就診，表現(xiàn)為腰骶部、髖部疼痛，坐骨神經(jīng)痛，鎖骨上或皮膚腫塊，咳嗽，咯血，胸痛等。至晚期還會(huì)出現(xiàn)食欲不振、消瘦和貧血。因此，前列腺癌的早期診斷相當(dāng)困難。
那么，在前列腺癌尚未出現(xiàn)局部癥狀和轉(zhuǎn)移癥狀之前，是否存在著早期“信號(hào)”呢?以下一些因素值得警惕，但并非前列腺癌所特有。
(1)不明原因的乏力、消瘦。
(2)難以解釋的發(fā)熱。
(3)肛管及直腸內(nèi)酸脹不適或隱痛。
(4)排尿躊躇，有尿不盡感。
(5)尿頻及夜尿增多。
(6)疼痛或血精。
出現(xiàn)上述癥狀的老年男子應(yīng)警惕前列腺癌，要盡早去醫(yī)院進(jìn)行檢查。
直腸指檢――前列腺癌早期診斷的重要手段
直腸指檢是一項(xiàng)簡(jiǎn)單易行又基本沒(méi)有損傷的臨床檢查，在前列腺癌的早期診斷中十分重要，其準(zhǔn)確率可達(dá)50％以上。許多學(xué)者主張對(duì)中年以上男子進(jìn)行定期檢查。
直腸指檢對(duì)于前列腺早期腫瘤的篩查有非常重要的價(jià)值。據(jù)統(tǒng)計(jì)，若腫瘤浸潤(rùn)至包膜，直腸指檢的發(fā)現(xiàn)率可達(dá)70％以上，即使腫瘤只局限在包膜內(nèi)，直腸指檢也可檢出25％。因此，對(duì)于中老年人，定期給予直腸指檢，將使許多患者能得到早期診斷和徹底治愈的機(jī)會(huì)。
當(dāng)然，確診前列腺癌尚需要做超聲波檢查、放射學(xué)檢查、CT檢查、MR／檢查、前列腺癌的針吸細(xì)胞學(xué)檢查、前列腺癌的活體組織檢查等。
前列腺癌診療的新方法
在前列腺癌治療的具體方法上，除了手術(shù)、內(nèi)分泌抗雄激素治療、化療、放療和冷凍消融治療以外，醫(yī)學(xué)界仍然在進(jìn)行新的探索，其中介入療法、免疫療法顯示出一定的威力，而基因療法也在深入研究中。
所謂介入療法是采用動(dòng)脈內(nèi)插管，向通往腫瘤的血管內(nèi)灌注化學(xué)抗癌藥物，并將該血管栓塞。介入治療的目的有兩個(gè)：一是利用灌注的抗癌藥物殺滅腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織；二是將血管栓塞，阻斷腫瘤的血液供應(yīng)，使腫瘤最終因缺氧和缺乏營(yíng)養(yǎng)而壞死。目前這種治療是將專(zhuān)用的導(dǎo)管插入主動(dòng)脈與髂內(nèi)動(dòng)脈的分叉處，灌注的藥物有順鉑、絲裂霉素、5-FU等；所用的血管栓塞物是明膠海綿等。該療法適用于晚期前列腺癌已經(jīng)無(wú)法手術(shù)而其他療法又效果欠佳者。
免疫療法并不神秘，在人類(lèi)與傳染性疾病作斗爭(zhēng)的過(guò)程中，免疫療法已屢建功勛，既往在腫瘤治療領(lǐng)域也有所應(yīng)用。免疫療法有兩種形式，一種是非特異性免疫，也就是采用一些通用的免疫制劑對(duì)抗癌癥。常用的有干擾素、白細(xì)胞介素、轉(zhuǎn)移因子等。這些免疫制劑在治療其他腫瘤中也在使用，對(duì)前列腺癌也有一定的作用。另一種是特異性免疫，需要通過(guò)特殊手段，制造出專(zhuān)門(mén)針對(duì)前列腺癌的免疫制劑，例如研制出前列腺腫瘤疫苗，接種在癌癥患者身上治療前列腺癌，為此科學(xué)家正在不斷地努力。
基因療法是一種令人期待和鼓舞的療法，隨著人類(lèi)基因圖譜繪制的成功完成，生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域的科學(xué)家正在加快速度，想方設(shè)法，力圖改變?nèi)梭w的致癌基因，用健康基因置換致癌基因；或者改造癌癥基因，使它們“改邪歸正”。我們完全有理由相信，在不久的將來(lái)，基因療法將給癌癥治療帶來(lái)全面突破，也將使治愈前列腺癌甚至所有的腫瘤成為可能。
兩個(gè)重要提示
背景提示
據(jù)預(yù)測(cè)，2005年全球的治療性疫苗的銷(xiāo)售額將達(dá)到9000萬(wàn)美元，2006年為1億美元，2007年猛增到5.85億美元，2008年為12.65億美元，2009年為20.75億美元，2010年將達(dá)到42.9億美元。
由于治療性疫苗的創(chuàng)新性特點(diǎn)，它們將是高價(jià)入場(chǎng)券的產(chǎn)品，并且其市場(chǎng)及其增長(zhǎng)將與創(chuàng)新性處方藥的審批相似，但與預(yù)防性疫苗的審批不相同。一旦治療性疫苗加入全球疫苗市場(chǎng)，其市場(chǎng)價(jià)值將成倍增長(zhǎng)。在全球治療性疫苗市場(chǎng)中，美國(guó)是的最大市場(chǎng)，其次是歐洲。據(jù)業(yè)內(nèi)人士統(tǒng)計(jì)，目前全球有65家生物技術(shù)公司正在研發(fā)治療性疫苗，產(chǎn)品達(dá)167個(gè)。
據(jù)估計(jì)，在所有的癌癥病人中約33％能夠接受治療性疫苗的治療，并且每種病人可接受治療性疫苗治療的比例各不相同，其中黑素瘤病人為45％，淋巴癌病人為32％，肺癌、乳腺癌和前列腺癌病人均為26％。
治療性疫苗的應(yīng)用
腫瘤仍然是治療性疫苗的最廣泛研究治療領(lǐng)域，其次是艾滋病和其他病毒性感染疾病，如EB病毒、肝炎、單純性皰疹病毒、人瘤病毒、和白念珠球菌、多發(fā)性壞死、銀屑病等。此外，處在早期臨床研究階段的治療性疫苗治療的疾病包括多發(fā)性壞死，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，和狼瘡，甚至還包括藥物(例如可卡因、尼古丁等)成癮等。
用于開(kāi)發(fā)治療癌癥和病毒感染的治療性疫苗的方法有多種。對(duì)于癌征和病毒感染這兩種病癥，治療的目標(biāo)相同：即對(duì)入侵機(jī)體免疫系統(tǒng)的腫瘤或病毒抗原誘導(dǎo)免疫原性反應(yīng)。目前上市的所有治療性疫苗和有望在2009年底上市的所有接近臨床（臨床III期試驗(yàn)及其以上）的候選疫苗都是用于治療癌癥的。本文主要集中在有希望投入臨床使用的治療癌癥的疫苗，包括自體和同種異體基因的疫苗與單克隆抗體及其可能上市的時(shí)間，以及各領(lǐng)域面臨的主要挑戰(zhàn)。
自體疫苗
自體疫苗可能包括絕大多數(shù)正在開(kāi)發(fā)的治療性疫苗的類(lèi)型。在自體疫苗治療過(guò)程中，每一名病人都是用從他/她自身的腫瘤細(xì)胞中提取的疫苗進(jìn)行治療的，是真正的個(gè)性化療法。因?yàn)楸M管對(duì)某一腫瘤有多種特異性抗原（例如前列腺腫瘤中的前列腺特異性抗原[PSA]），每一名腫瘤病人同樣還提呈對(duì)自己獨(dú)特的某些抗原。
自體疫苗的開(kāi)發(fā)包括三個(gè)主要的步驟：第一，從病人體內(nèi)捕獲抗原提呈細(xì)胞（例如從手術(shù)切除的腫瘤提取）；2、對(duì)捕獲的抗原提呈細(xì)胞進(jìn)行處置，以增加其免疫原性；3、將經(jīng)處置的細(xì)胞重新接種到病人體內(nèi)。結(jié)果，每一名病人都用對(duì)其專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)的個(gè)性化治療性疫苗。
即將出現(xiàn)的一個(gè)自體疫苗是Dendren公司的Provenge ，該疫苗為用于治療前列腺癌的疫苗。該疫苗是將樹(shù)突細(xì)胞祖細(xì)胞與一種由前列腺烷酸磷酸酶（PAP）與粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子（GM-CSF）在體內(nèi)融合的重組融合蛋白（PA2024）接觸而產(chǎn)生的。這種疫苗刺激免疫系統(tǒng)攻擊表達(dá)PAP的癌細(xì)胞，PAP是一種在約95％的前列腺癌細(xì)胞中都可見(jiàn)到的蛋白。Provenge的III期臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，該疫苗僅對(duì)一小部分病人有效。因此，美國(guó)食品與藥品管理局（FDA）要求增加275名病人進(jìn)行試驗(yàn)，該試驗(yàn)?zāi)壳罢谶M(jìn)行之中。Provenge有望成為第一批大批量生產(chǎn)的重量級(jí)治療性疫苗。因此，據(jù)估計(jì)，Provenge在2007年底進(jìn)入市場(chǎng)后將使Dendren公司成為治療疫苗市場(chǎng)的領(lǐng)軍企業(yè)。
其他侯選自體治療性疫苗
據(jù)估計(jì)，在不遠(yuǎn)的將來(lái)進(jìn)入市場(chǎng)的其他侯選自體治療性疫苗包括Antigenics 公司研發(fā)的Oncophage，和Genitope 公司研發(fā)的MyVax 個(gè)性化免疫療法制劑(GTOP 99)等。Oncophage 包含有與腫瘤抗原臺(tái)有關(guān)聯(lián)的腫瘤衍生熱休克蛋白的純化復(fù)合體，至少可用于治療惡性黑素瘤和腎腫瘤等7種不同類(lèi)型的腫瘤。Oncophage有望在2008年投放市場(chǎng)，其第一年的銷(xiāo)售額將達(dá)到月2.8億美元。目前開(kāi)發(fā)的MyVax 個(gè)性化免疫療法制劑用于治療B細(xì)胞淋巴瘤。該產(chǎn)品包含有與鑰孔嘁血蘭蛋白共軛的病人衍生獨(dú)特型蛋白，并與粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子佐劑合用。MyVax 個(gè)性化免疫療法制劑可望在2009年進(jìn)入美國(guó)市場(chǎng)。據(jù)預(yù)測(cè)，到2009年，美國(guó)的潛在病人為17萬(wàn)人，其市場(chǎng)滲透至少在10％。因此，MyVax 個(gè)性化免疫療法制劑的銷(xiāo)售額將超過(guò)8000萬(wàn)美元。
異體治療性疫苗
與采用腫瘤抗原特異性對(duì)個(gè)體病人進(jìn)行治療的自體治療性疫苗相比，異體治療性疫苗包含有對(duì)一類(lèi)腫瘤具有特異性的抗原。由于異體治療性疫苗可以在某一生物制劑中心批量生產(chǎn)，所以，該產(chǎn)品是相對(duì)便于開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的侯選產(chǎn)品。異體治療性疫苗可用各種方法開(kāi)發(fā)，包括用保證許多抗原提呈的未明確的混合體和制備融合蛋白等。
CancerVax公司的Canvaxin是一種異體治療性疫苗，由含有30多種已確定的黑素瘤相關(guān)抗原的3種黑素瘤細(xì)胞系（M101，M24，和M10）組成。目前正在進(jìn)行III期試驗(yàn)，可望2008年進(jìn)入市場(chǎng)。Canvaxin還是一種預(yù)防性蛋白疫苗。
另一種將在近期上市的用于治療晚期胰腺癌的異體抗原侯選疫苗為Aphton 公司研發(fā)的Gastrimmune (G17DT)，該疫苗為一種融合抗原疫苗，可望在今年上市。
單抗
在治療性疫苗市場(chǎng)，除了自體和異體治療性疫苗外，單克隆抗體也是一種正在崛起的重要治療性藥物。鼠單抗IGN101模擬見(jiàn)于某些腫瘤細(xì)胞的表面抗原――上皮細(xì)胞粘合分子（EpCAM）在癌癥病人體內(nèi)誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，從而達(dá)到治療的目的。
OvalRex(oregovomab)是一種正在進(jìn)行III期試驗(yàn)的用于治療卵巢癌的鼠單抗，由加拿大AltaRex Medical公司與美國(guó)Unither Pharma等多個(gè)公司合作開(kāi)發(fā)的。該制劑可延長(zhǎng)復(fù)發(fā)性卵巢癌病人的生存期（與非特異性和特異性免疫反應(yīng)相關(guān)），OvalRex靶向由人卵巢癌細(xì)胞表面產(chǎn)生的腫瘤相關(guān)抗原CA125。研究人員認(rèn)為，OvalRex通過(guò)一個(gè)使CA125與OvalRex循環(huán)的復(fù)合結(jié)構(gòu)誘導(dǎo)抗CA125的免疫反應(yīng)。與自由CA125不同，復(fù)合CA125被傳輸?shù)綐?shù)突細(xì)胞中激發(fā)T細(xì)胞活性。
研發(fā)的挑戰(zhàn)
盡管治療性疫苗提供一種有利的市場(chǎng)機(jī)會(huì)，但開(kāi)發(fā)治療性疫苗的挑戰(zhàn)包括病人的選擇、過(guò)長(zhǎng)的臨床試驗(yàn)期，和先期的巨大投資等。由于治療性疫苗僅適合于體質(zhì)仍較好的病人（如病人的免疫系統(tǒng)未受損，能夠?qū)σ呙绠a(chǎn)生反應(yīng)）和發(fā)展較慢的疾病等，所以，必須謹(jǐn)慎選擇臨床試驗(yàn)的病人群體。患晚期和發(fā)展較快的疾病的病人用治療性疫苗效果差的原因有2點(diǎn)：一是誘導(dǎo)免疫反應(yīng)需要一定的時(shí)間；二是由于病人的身體狀況較差而無(wú)免疫應(yīng)答。
與非疫苗療法相比，治療性疫苗的臨床試驗(yàn)期和隨方觀察需要較長(zhǎng)的時(shí)間，因?yàn)槠浏熜У挠?jì)算是通過(guò)計(jì)算病人的存活率進(jìn)行測(cè)定的，所以，在病人接種疫苗后必須觀察數(shù)年。
【關(guān)鍵詞】 光動(dòng)力療法 免疫療法 腫瘤
光動(dòng)力療法（photodynamic therapy， PDT）是近年來(lái)頗受各國(guó)學(xué)者重視的一種癌癥新療法。這種療法是利用某些染料類(lèi)光敏物質(zhì)在癌組織中積聚的濃度高于周?chē)恼＝M織， 在激光等照射下可產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞有破壞作用的單線態(tài)氧（singlet oxygen）及自由基的特性， 從而干擾腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)并導(dǎo)致死亡。目前PDT已在臨床上得到了較廣泛的應(yīng)用， 一些光敏劑已被某些國(guó)家批準(zhǔn)作為PDT藥物， 成千上萬(wàn)的癌癥患者接受了PDT， 并取得了很好的療效。目前PDT主要應(yīng)用于實(shí)體腫瘤的治療， 對(duì)某些晚期腫瘤、 復(fù)發(fā)腫瘤和一些不適合手術(shù)的腫瘤， PDT也是一種有效和簡(jiǎn)便的姑息治療手段。為了有效控制和根治惡性腫瘤， 光動(dòng)力學(xué)療法與其他傳統(tǒng)治療手段聯(lián)合的技術(shù)已逐漸被接受。近年有研究顯示， PDT能激發(fā)宿主體內(nèi)的免疫反應(yīng)， 而PDT和免疫治療聯(lián)合應(yīng)用， 能夠提高和改善PDT誘發(fā)的抗腫瘤免疫反應(yīng)， 在腫瘤的治療中起到重要的作用。目前這些方面的研究仍處于臨床前期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段， 現(xiàn)對(duì)光動(dòng)力療法聯(lián)合免疫治療的研究進(jìn)展作一綜述。
1 光動(dòng)力學(xué)療法的抗腫瘤作用
1.1 直接殺傷腫瘤細(xì)胞 光動(dòng)力療法與傳統(tǒng)的手術(shù)、 化療和放療等腫瘤治療手段相比， 具有雙重性選擇的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)。首先， 腫瘤組織能夠選擇性的儲(chǔ)留光敏劑; 其次， 只有在光輻照的情況下， 儲(chǔ)留在組織中的光敏劑才能和組織中的氧分子發(fā)生生化反應(yīng)產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞具有毒性的活性氧（reactive oxygen species， ROS）， 其中單態(tài)氧被一致認(rèn)為是Ⅱ型PDT中最主要毒性物質(zhì)， 它們對(duì)細(xì)胞的破壞作用， 將直接導(dǎo)致病變細(xì)胞發(fā)生壞死或凋亡。
1.2 損傷血管效應(yīng) 腫瘤細(xì)胞的活力依靠血管供應(yīng)的大量營(yíng)養(yǎng)， PDT能損傷與腫瘤相關(guān)的脈管系統(tǒng)， 導(dǎo)致腫瘤缺血性死亡， 因此催生了抗血管光動(dòng)力療法（antiangiogenicPDT）——一種很有前景的治療腫瘤的手段。如果在血管內(nèi)光敏劑的濃度峰值期內(nèi)照光， 能夠?qū)е挛⒀軗p傷， 病灶內(nèi)供血不足， 從而使細(xì)胞發(fā)生壞死或凋亡。
1.3 抗腫瘤免疫效應(yīng) 1996年， Korbelik等[1]用正常的BALB/c小鼠和免疫缺陷的小鼠比較了PDT對(duì)腫瘤的長(zhǎng)時(shí)效應(yīng)， 發(fā)現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā)更多的發(fā)生在免疫缺陷的小鼠中。在從有免疫活性的BALB/c小鼠中移植了骨髓后， 腫瘤復(fù)發(fā)率明顯降低。說(shuō)明PDT通過(guò)直接作用機(jī)制殺滅大多數(shù)腫瘤細(xì)胞后， 仍需要免疫反應(yīng)去清除剩余的癌細(xì)胞。Gollnick 等[2]發(fā)現(xiàn)PDT后的腫瘤細(xì)胞本身就有很強(qiáng)的免疫原性， 可激發(fā)特異性免疫反應(yīng)。將PDT治療后的腫瘤細(xì)胞制成勻漿液， 接種于裸鼠體內(nèi)， 在沒(méi)有任何免疫佐劑的情況下， 可抑制同一種腫瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)， 但不能抑制其他腫瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)。
2 PDT的抗腫瘤免疫機(jī)制
目前的研究和應(yīng)用的結(jié)果顯示， PDT沒(méi)有放療和化療那樣明顯的抑制機(jī)體免疫功能的副作用。相反， PDT可能誘導(dǎo)有益于治療的抗腫瘤免疫反應(yīng)， 其抗腫瘤免疫的機(jī)制也包括細(xì)胞免疫和體液免疫。
2.1 細(xì)胞免疫
2.1.1 中性粒細(xì)胞 中性粒細(xì)胞是PDT后最早到達(dá)腫瘤治療部位的免疫細(xì)胞， 其數(shù)量在骨髓、 外周血以及腫瘤的治療部位迅速增高， 在PDT 的抗腫瘤效應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。Sun 等[3]發(fā)現(xiàn)PDT后中性粒細(xì)胞的活性在腫瘤的治療部位增強(qiáng)， 且腫瘤組織周?chē)闹行粤＜?xì)胞表達(dá)有MHCⅡ分子， 說(shuō)明中性粒細(xì)胞可能作為抗原提呈細(xì)胞參與PDT的抗腫瘤效應(yīng)。
2.1.2 自然殺傷細(xì)胞 HendrakHennion等[4]應(yīng)用GM1抗體去除小鼠體內(nèi)的NK細(xì)胞后， PDT 抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用減弱， 這提示NK細(xì)胞參與PDT的抗腫瘤效應(yīng)。但用PDT治療后的荷瘤小鼠脾內(nèi)的NK細(xì)胞體外作用于腫瘤細(xì)胞發(fā)現(xiàn)， NK細(xì)胞不能殺傷腫瘤細(xì)胞， 則說(shuō)明NK細(xì)胞可能是由PDT的殺腫瘤細(xì)胞作用間接激活的。此外他還證實(shí)了NK細(xì)胞也參與PDT 抑制腫瘤復(fù)發(fā)的作用， NK細(xì)胞可能通過(guò)分泌抗腫瘤細(xì)胞因子(如IFNγ、 IL1、 IL2和TNFα) 和抗體依賴(lài)性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用(antibodydependent cellmediated cytotoxicity， ADCC)抑制腫瘤的復(fù)發(fā)。
2.1.3 抗原提呈細(xì)胞 體內(nèi)重要的抗原提呈細(xì)胞有巨噬細(xì)胞、 樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)、 B細(xì)胞等。這類(lèi)細(xì)胞可攝取、 加工、 處理抗原， 并將抗原信息提呈給淋巴細(xì)胞， 從而啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答。Reiter等[5]發(fā)現(xiàn)PDT并不能直接激活巨噬細(xì)胞， 而是其殺傷腫瘤細(xì)胞的作用間接激活了巨噬細(xì)胞的活性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)， 用二氧化硅微粒阻滯巨噬細(xì)胞的抗原提呈功能， 可明顯降低PDT的治愈率， 這表明巨噬細(xì)胞的抗原提呈功能在PDT中發(fā)揮重要作用。Jalili等[6]發(fā)現(xiàn)DC可有效地吞噬被光毒性反應(yīng)殺傷的腫瘤細(xì)胞， 并將腫瘤抗原提呈給初始T細(xì)胞后使之激活， 同時(shí)產(chǎn)生大量白細(xì)胞介素12(interleukin12， IL12)， 促進(jìn)初始T細(xì)胞產(chǎn)生Th1型免疫應(yīng)答。
2.2 體液免疫
2.2.1 補(bǔ)體 PDT后， 腫瘤組織內(nèi)的血管內(nèi)皮表面可見(jiàn)膜攻擊復(fù)合物(membrane attack complex， MAC)的廣泛沉積， 導(dǎo)致治療部位的血供受阻， 說(shuō)明PDT可誘導(dǎo)補(bǔ)體系統(tǒng)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的激活。應(yīng)用補(bǔ)體激活劑(如酵母多糖和鏈激酶等)， 可增強(qiáng)PDT的抗腫瘤效應(yīng)。但是補(bǔ)體激活劑在免疫缺陷小鼠體內(nèi)不能增強(qiáng)PDT的療效， 說(shuō)明補(bǔ)體的作用與各種免疫效應(yīng)細(xì)胞的共同參與有關(guān)， PDT激活補(bǔ)體后產(chǎn)生了一系列活性片段， 吸引帶有補(bǔ)體受體的中性粒細(xì)胞、 巨噬細(xì)胞和其他免疫效應(yīng)細(xì)胞的聚集。近來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)PDT后， 腫瘤組織內(nèi)補(bǔ)體C3水平持續(xù)增高， 于24 h達(dá)到高峰， 而阻滯C3a受體和C5a受體的功能， 會(huì)明顯降低PDT的治愈率[7]。
2.2.2 細(xì)胞因子 光動(dòng)力療法可誘導(dǎo)IL1β、 IL2、 腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor， TNF)α、 粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor， GCSF)產(chǎn)生。Sun等[3]在PDT治療前分別應(yīng)用IL1β、 TNFα和GCSF的中和抗體作用于腫瘤組織， 發(fā)現(xiàn)PDT的療效降低， 提示這些細(xì)胞因子在PDT的抗腫瘤效應(yīng)中起到很重要的調(diào)節(jié)作用。還有研究發(fā)現(xiàn)， PDT治療后的一定時(shí)間內(nèi)， 血管表皮生長(zhǎng)因子的水平降低， 其降低的程度越大， 腫瘤體積縮小程度越明顯， 小鼠生存時(shí)間越長(zhǎng)[8]。Gollnick等[9]長(zhǎng)期致力于PDT抗腫瘤機(jī)制的研究， 他們通過(guò)對(duì)PDT誘導(dǎo)的細(xì)胞因子、 趨化因子和黏附因子的表達(dá)和中性粒細(xì)胞局部浸潤(rùn)現(xiàn)象的深入研究， 發(fā)現(xiàn)不同的光敏劑所激活的細(xì)胞因子和炎性反應(yīng)會(huì)有所不同。他們認(rèn)為通過(guò)合理調(diào)控有益的炎性反應(yīng)可能是優(yōu)化光動(dòng)力學(xué)療法的抗腫瘤免疫作用的一個(gè)有效手段。
3 光動(dòng)力免疫療法的研究進(jìn)展
為了激發(fā)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能， 更好地控制惡性腫瘤， 腫瘤的免疫治療也日漸成為一個(gè)活躍的領(lǐng)域。免疫治療包括主動(dòng)免疫治療和被動(dòng)免疫治療。主動(dòng)免疫治療是指給患者輸入具有免疫原性的腫瘤疫苗， 刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性的抗腫瘤免疫。被動(dòng)免疫治療則是指給患者輸入外源性的具有免疫效應(yīng)的物質(zhì)， 由這些物質(zhì)在患者體內(nèi)發(fā)揮治療腫瘤的作用。PDT和主動(dòng)或被動(dòng)免疫治療相結(jié)合來(lái)治療疾病， 即光動(dòng)力免疫療法（photodynamic immunotherapy， PDIT）， 其有關(guān)研究已逐漸引起人們的關(guān)注。
3.1 PDT瘤苗 Canti等[10]認(rèn)為， 在引起細(xì)胞凋亡的劑量條件下， PDT作用可使得腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抗原性物質(zhì)， 并由抗原提呈細(xì)胞提呈給腫瘤特異性的T細(xì)胞。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示， 體外PDT處理的腫瘤細(xì)胞裂解物具有免疫原性， 可看作是一種有效的腫瘤疫苗， 這種通過(guò)PDT作用產(chǎn)生的疫苗， 較紫外線或放射線作用產(chǎn)生的疫苗具有更強(qiáng)的抗原性， 能夠誘發(fā)特異的IFN分泌型細(xì)胞毒性T細(xì)胞并激活DC， 能明顯地提高接種疫苗的動(dòng)物的生存率[2]。國(guó)內(nèi)的黃慧芳等[11]通過(guò)研究?jī)捎H性酞菁鋅光敏劑ZnPcS2P2介導(dǎo)的光動(dòng)力療法(ZnPcPDT)聯(lián)合GMCSF、 B7.1基因修飾的EL4細(xì)胞對(duì)小鼠淋巴瘤的抑制作用， 發(fā)現(xiàn)mGMCSF、 mB7.1基因修飾的瘤苗可明顯增強(qiáng)ZnPcPDT的抗腫瘤效應(yīng)。
3.2 具有主動(dòng)靶向功能的光敏劑 由于腫瘤組織對(duì)光敏劑只是相對(duì)的選擇性吸收， 并不具備特異性， 所以正常組織中不可避免的儲(chǔ)留有少量的光敏劑， 可能產(chǎn)生光毒副作用。當(dāng)難以把光源局限在靶位組織， 如腹腔和胸腔腫瘤時(shí)， 為了減少對(duì)周?chē)＝M織的毒副作用， 開(kāi)發(fā)靶向型的光敏劑就顯得尤為重要。為了增強(qiáng)光敏劑的靶向作用， 許多研究組紛紛開(kāi)展了光敏劑的藥物傳輸系統(tǒng)研究， 變?cè)缙诘谋粍?dòng)靶向?yàn)楝F(xiàn)有的主動(dòng)靶向輸送方式， 目前采用的主要方法有: 免疫靶向光敏劑[12]、 表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor， EGFR）靶向光敏劑[13]、 低密度脂蛋白（low density lipoprotein， LDL）靶向光敏劑[14]、 多肽靶向光敏劑[15]以及mRNA靶向光敏劑[16]等。它們分別以高度特異性的腫瘤單克隆抗體（mAb）、 EFGR mAb、 LDL、 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等多肽以及腫瘤基因的反義基因片段（如反義寡核苷酸）為載體， 使光敏劑可以被特異性的靶向癌細(xì)胞， 從而提高腫瘤細(xì)胞對(duì)光敏劑的特異性吸收， 提高光動(dòng)力學(xué)療法的效率。
3.3 過(guò)繼免疫療法（adoptive immunotherapy， AIT） 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示， 光動(dòng)力學(xué)療法治愈的荷瘤動(dòng)物的血清具有過(guò)繼免疫性轉(zhuǎn)移性。將治愈后動(dòng)物的血清或脾細(xì)胞輸入給同種動(dòng)物， 還可以誘發(fā)這些動(dòng)物的免疫抗拒， 抑制同種移植腫瘤的生長(zhǎng)。
3.4 免疫佐劑聯(lián)合治療 （1）分支桿菌細(xì)胞壁提取物(mycobacterium cellwall extract， MCWE) 是一種非特異性免疫激活劑， Korbelik等[17]將PDT與MCWE聯(lián)合應(yīng)用于腫瘤的治療， 可明顯增加免疫效應(yīng)細(xì)胞的活性。（2）卡介苗可放大PDT治療后T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤效應(yīng)， 聯(lián)合應(yīng)用PDT和卡介苗可明顯提高腫瘤的治愈率， 抑制腫瘤的復(fù)發(fā)， 且對(duì)正常組織的損傷程度減低。（3）二甲基磺醌醋酸(DMXAA)是一種抑制血管生成的細(xì)胞因子， 可誘導(dǎo)TNFα產(chǎn)生。Bellnier等[18]聯(lián)合應(yīng)用低劑量的DMXAA和低劑量的PDT后發(fā)現(xiàn)， 腫瘤的復(fù)發(fā)率和正常組織的損傷程度均明顯降低。（4）補(bǔ)體激活劑將PDT與補(bǔ)體激活劑聯(lián)合應(yīng)用， 如腫瘤局部應(yīng)用酵母多糖或全身應(yīng)用鏈激酶， 可增強(qiáng)PDT的療效，降低腫瘤的復(fù)發(fā)率[7]。（5）光敏劑吲哚菁綠（indocyanine green， ICG）和新型免疫佐劑——糖化殼聚糖(glycated chitosan， GC)的激光免疫療法(laser immunotherapy， LIT)， 成功地治愈了大鼠乳癌轉(zhuǎn)移腫瘤[19]。新近的實(shí)驗(yàn)研究顯示， 糖化殼聚糖與血卟啉衍生物（Photofrin）或酞菁類(lèi)化合物（metatetrahydroxyphenylchlorin， mTHPC）光動(dòng)力學(xué)療法的聯(lián)合使用， 與單純的光動(dòng)力學(xué)療法相比， 前者可以明顯地提高腫瘤治療的效果。而且， 糖化殼聚糖的免疫刺激作用較其他幾種常用的免疫佐劑如弗氏完全佐劑、 弗氏不完全佐劑、 短小棒狀桿菌菌苗等的效果都要明顯， PDT與糖化殼聚糖的聯(lián)合使用有望很快進(jìn)入臨床試驗(yàn)。
3.5 DC聯(lián)合治療 近年來(lái)， 以DC為基礎(chǔ)的腫瘤疫苗研究已成為腫瘤免疫治療的熱點(diǎn)之一。DC是目前所認(rèn)識(shí)的體內(nèi)功能最強(qiáng)大的專(zhuān)職抗原提呈細(xì)胞。在提呈“危險(xiǎn)”信號(hào)如壞死組織或者微生物時(shí)， DC逐漸分化成熟， 由周?chē)M織進(jìn)入次級(jí)淋巴器官， 并激發(fā)T細(xì)胞反應(yīng)。因此DC可以作為疫苗注射入體內(nèi)， 誘導(dǎo)特異性抗腫瘤和抗病毒免疫反應(yīng)。目前有人研究體內(nèi)直接用腫瘤抗原負(fù)載DC的方法， 并初步證實(shí)脂質(zhì)體介導(dǎo)的多肽抗原體內(nèi)負(fù)載DC， 可誘導(dǎo)特異性抗腫瘤和抗病毒免疫反應(yīng)。另外Jalili等[6]研究發(fā)現(xiàn)， 在PDT治療的腫瘤組織內(nèi)接種非成熟的DC（intratumoral injection of naive dendtitic cells， ITDC）， 可以加強(qiáng)PDT的抗腫瘤效應(yīng)。Saji等[20]研究也指出， PDT和ITDC聯(lián)合治療殺傷腫瘤細(xì)胞的作用比單獨(dú)進(jìn)行局部PDT或者ITDC效果更明顯， 荷瘤鼠的生存期明顯延長(zhǎng)， 更重要的是聯(lián)合治療應(yīng)用于局部可使遠(yuǎn)處的腫瘤消失， 如多發(fā)性的肺轉(zhuǎn)移灶等。同時(shí)， 將脾細(xì)胞輸入同種動(dòng)物能誘發(fā)這些動(dòng)物發(fā)生免疫抗拒， 這是由于脾內(nèi)含有腫瘤特異性的細(xì)胞毒性IFNγ分泌型的T細(xì)胞。
4 結(jié)語(yǔ)
由于目前認(rèn)為免疫治療還只能清除少量的和播散的腫瘤細(xì)胞，對(duì)于晚期的實(shí)體腫瘤的療效還有一定的局限性， 只能作為一個(gè)輔助療法。而PDT與免疫療法的聯(lián)合應(yīng)用， 可以進(jìn)一步提高和改善PDT誘發(fā)的抗腫瘤免疫反應(yīng)。在系統(tǒng)性和長(zhǎng)效的抗腫瘤免疫的參與下PDT能達(dá)到抗局部原發(fā)腫瘤、 甚至抗轉(zhuǎn)移腫瘤和防止腫瘤復(fù)發(fā)等多種治療效果。目前這些方面的研究仍限于臨床前期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)， 臨床研究尚有待加強(qiáng)。但隨著研究的進(jìn)一步深入， PDT在腫瘤治療和預(yù)防復(fù)發(fā)方面將有更大的應(yīng)用前景。
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就在醫(yī)生們絞盡腦汁如何干掉病毒時(shí)，一些科學(xué)家卻發(fā)現(xiàn)，某些被“馴服”的病毒，或許是能幫助人類(lèi)干掉癌細(xì)胞的關(guān)鍵。
英國(guó)科學(xué)家們的最新研究成果表明，一種基因改造后的病毒，不僅可以殺死某些癌細(xì)胞，還能激活病患的免疫系統(tǒng)，對(duì)抗腫瘤。
看起來(lái)，人類(lèi)在與腫瘤搏殺的道路上，又向前邁進(jìn)了一步。不過(guò)，別高興得太早，這種“以毒攻毒”的病毒療法要真正應(yīng)用推廣，還困難重重。
里程碑試驗(yàn)
英國(guó)科學(xué)家的研究成果發(fā)表在《臨床腫瘤學(xué)雜志》上，這項(xiàng)研究由英國(guó)癌癥研究所主導(dǎo)，英國(guó)皇家Marsden NHS基金會(huì)，以及包括牛津大學(xué)在內(nèi)全球64家研究中心的研究人員共同參與了這項(xiàng)試驗(yàn)。
研究人員隨機(jī)選擇了463名不可手術(shù)治療的黑色素惡性腫瘤患者，而治療的關(guān)鍵，是一種基因改造后的皰疹病毒――T-VEC。
患者被分成兩組，一組被注射了T-VEC，另一組作為對(duì)照組接受了免疫療法――一種利用病人自身免疫系統(tǒng)來(lái)對(duì)抗疾病的治療方法。
持續(xù)三年的試驗(yàn)顯示，接受T-VEC治療的患者中，約16.3%在超過(guò)半年時(shí)間里顯示持久反應(yīng)，相比之下，免疫療法組中只有2.1%的患者顯示了持久反應(yīng)。
患者在特定時(shí)間內(nèi)顯示治療反應(yīng)，這是腫瘤科醫(yī)生通常用來(lái)作為免疫治療治愈的指標(biāo)。
這項(xiàng)研究的另一項(xiàng)結(jié)果是，163名接受T-VEC 治療的三期和四期初期階段的患者，平均存活了41個(gè)月。相比之下，接受對(duì)照免疫治療的66名較早期階段的患者，平均生存期為21.5個(gè)月。
這項(xiàng)研究還發(fā)現(xiàn)，早期患者對(duì)病毒療法的反應(yīng)更顯著。一些樂(lè)觀的研究人員認(rèn)為，這意味著，這次的突破性發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)遠(yuǎn)或可讓癌癥治療不再需要化療和放療。在將來(lái)，病毒療法也許有可能成為癌癥治療的首選。
英國(guó)癌癥研究所首席執(zhí)行官保羅?沃克曼說(shuō)，“在一項(xiàng)三期實(shí)驗(yàn)中看到病毒療法的潛力，真是令人興奮。如果聯(lián)合一些靶向性抗癌藥物，這類(lèi)療法就能夠更加有效，從而實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期的疾病控制和治愈。”
以毒攻毒
病毒療法并非英國(guó)科學(xué)家首創(chuàng)，他們的突破在于，癌癥患者首次通過(guò)這種療法明顯受益，而且，這次臨床試驗(yàn)的規(guī)模迄今為止全球最大。
科學(xué)家們最早發(fā)現(xiàn)病毒對(duì)付腫瘤有奇效要追溯到1904年，當(dāng)時(shí)，意大利一位婦女遭遇了兩件可怕的事情――宮頸癌和被狗咬傷。后者情況稍微好一點(diǎn)，狂犬病疫苗已經(jīng)在1885年被發(fā)明出來(lái)。
醫(yī)生為她注射了狂犬病疫苗，而讓人不可思議的是，這位婦女的腫瘤組織居然大大減小了，而且此后8年時(shí)間她體內(nèi)再也沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)腫瘤。
雖然8年之后，癌癥復(fù)發(fā)奪去了她的生命，但這起案例開(kāi)始讓科學(xué)家們思考，是不是狂犬病疫苗里的狂犬病病毒殺死了癌細(xì)胞？
此后，許多實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始了利用病毒來(lái)治療惡性腫瘤的研究，不過(guò)，由于分析生物學(xué)技術(shù)還未被系統(tǒng)建立起來(lái)，科學(xué)家們只能利用野生型或者簡(jiǎn)單減毒處理的病毒毒株來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)。
這些試驗(yàn)取得了一定的效果，但風(fēng)險(xiǎn)和問(wèn)題同樣隨之而來(lái)，比如，有些病毒本身就有致癌風(fēng)險(xiǎn)，有些減毒病毒注射后反而在人體內(nèi)恢復(fù)了毒性。
更讓科學(xué)家頭疼的是，有些病毒注射后，非但沒(méi)有干掉癌細(xì)胞，自己反而先被人體的免疫系統(tǒng)給干掉了。
科學(xué)家們開(kāi)始反思，想要用病毒來(lái)治病，得先“馴服”病毒，進(jìn)行適當(dāng)?shù)母脑欤屗鼈儭皸墣簭牧肌薄?/p>
這次英國(guó)科學(xué)家們使用的T-VEC，就是由單純皰疹病毒（HSV-1）通過(guò)基因改造而來(lái)。研究者去掉了兩個(gè)關(guān)鍵的基因 ICP34.5和ICP47，使其對(duì)人類(lèi)健康細(xì)胞無(wú)害。
使用時(shí)，將T-VEC直接注射入腫瘤內(nèi)。病毒會(huì)同時(shí)侵染癌細(xì)胞和正常細(xì)胞，由于它在正常細(xì)胞內(nèi)無(wú)法復(fù)制，因而對(duì)其無(wú)害。然而，在癌細(xì)胞內(nèi)，這種病毒可以進(jìn)行大量的復(fù)制，直到癌細(xì)胞破裂被毀。
與此同時(shí)，它們還會(huì)釋放出新的病毒、一種叫GM-CSF的分子、以及大量腫瘤特異性抗原，能迅速激起免疫系統(tǒng)的反應(yīng)，在體內(nèi)尋找腫瘤細(xì)胞并消滅它們。
上市博弈
這看上去簡(jiǎn)直就是奇跡，癌癥的新殺手是否就此誕生？很遺憾，現(xiàn)在下結(jié)論還為時(shí)過(guò)早。目前這種療法還有很多限制和不確定性。
英國(guó)科學(xué)家的試驗(yàn)得到了T-VEC制造商美國(guó)安進(jìn)公司的資金資助，安進(jìn)公司希望能通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)服美國(guó)食品藥品管理局（FDA）通過(guò)相應(yīng)T-VEC病毒治療藥物的上市審批。
而FDA評(píng)審人員的初步意見(jiàn)是，對(duì)該藥物一項(xiàng)關(guān)鍵研究的設(shè)計(jì)及結(jié)果表示擔(dān)憂(yōu)，其是否能夠改善總生存期尚不明確，其有效性尚值得懷疑。
評(píng)審人員在文件中表示，對(duì)這款藥物的批準(zhǔn)做出決定時(shí)間將從7月28日推遲到10月27日，稱(chēng)需要這款藥物的更多數(shù)據(jù)。
這種擔(dān)心不無(wú)道理，美國(guó)梅奧診所曾經(jīng)為美國(guó)一些患者做過(guò)類(lèi)似的病毒治療試驗(yàn)，有些患者身上產(chǎn)生了奇跡，但也有患者并沒(méi)有獲得太好的療效。
梅奧診所首席研究員斯蒂芬?拉塞爾承認(rèn)，“（現(xiàn)在）根本無(wú)從了解是否真是注入患者體內(nèi)的病毒發(fā)揮了作用，還是由于其他一些未知的機(jī)制。”
【關(guān)鍵詞】 腫瘤；生物治療
80年代中葉，Bosenberg和Oldham等初步建立現(xiàn)代腫瘤生物治療的理論和技術(shù)，成為繼腫瘤手術(shù)治療、放射治療和化學(xué)治療三大常規(guī)治療之后的第4種腫瘤治療模式。目前在抗癌效應(yīng)細(xì)胞、細(xì)胞因子、抗癌抗體和瘤苗及基因治療研究的各個(gè)方面都有明顯進(jìn)展，取得了一定技術(shù)突破和臨床療效。現(xiàn)將腫瘤生物治療各個(gè)策略的進(jìn)展進(jìn)行一下綜述。
1. 腫瘤基因治療
1.1腫瘤疫苗的作用
腫瘤疫苗是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一，其原理是通過(guò)激活患者自身免疫系統(tǒng)，利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)誘導(dǎo)機(jī)體的特異性細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體的抗癌能力，阻止腫瘤的生長(zhǎng)、擴(kuò)散和復(fù)發(fā)，以達(dá)到清除或控制腫瘤的目的。近幾年研究發(fā)現(xiàn)被腫瘤特異性抗原調(diào)節(jié)T細(xì)胞（Treg）激活的反調(diào)節(jié)效應(yīng)T細(xì)胞在腫瘤疫苗的作用上有重要的抑制作用，Tuettenberq等研究證明被Toll樣受體配體（TLRL）激活的樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）不僅可以中和Treg的抑制作用，還促進(jìn)誘導(dǎo)長(zhǎng)期的效應(yīng)T細(xì)胞反應(yīng)[1]。
1.2引入抑癌基因
用病毒載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)導(dǎo)腫瘤抑制基因治療方法已進(jìn)入臨床應(yīng)用研究階段，目前常用的轉(zhuǎn)染基因的病毒載體有逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等。Maurizio等采用腺相關(guān)病毒為載體，將人狀病毒的E6、E7及GM-CSF等基因轉(zhuǎn)染樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）用于宮頸癌患者的治療，初步結(jié)果顯示該療法的安全有效。在實(shí)體腫瘤中抑癌基因p53分子對(duì)由化療引起的DNA損傷有重要的作用，可引起細(xì)胞周期停滯與促使細(xì)胞凋亡，在食管癌研究中已獲療效[2]。
1.3應(yīng)用反義核酸技術(shù)
反義核酸是指能與特定mRNA精確互補(bǔ)、特異阻斷其翻譯的RNA或DNA分子。利用反義核酸特異地封閉某些基因表達(dá)，使之低表達(dá)或不表達(dá)，這種技術(shù)即為反義核酸技。研究顯示，利用質(zhì)粒載體或病毒載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染瘤細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄出能與目的基因正義RNA相互補(bǔ)的反義RNA，從而阻斷目的基因蛋白質(zhì)的表達(dá)[3]。
1.4自殺基因治療
目前，已研究的自殺基因系統(tǒng)有HSV-TK/GCV,CD/5-FC, XGPRT/6-TX和VZV-tk/AraM等，其中在腫瘤基因治療研究中最普遍應(yīng)用的是HSV-TK/GCV酶原藥物系統(tǒng)。國(guó)外已用HSV-TK/GCV自殺基因系統(tǒng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)也有報(bào)道用CD自殺基因系統(tǒng)治療膠質(zhì)瘤，HSV-TK/GCV自殺基因系統(tǒng)還常應(yīng)用于成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、軟腦脊髓轉(zhuǎn)移瘤等腦腫瘤的治療[4]。
1.5耐藥基因
利用耐藥基因轉(zhuǎn)染保護(hù)骨髓造血細(xì)胞是一種特殊的腫瘤基因療法，其用于克服化療的骨髓抑制作用效果顯著，臨床應(yīng)用潛力很大。目前一些應(yīng)用多耐藥基因（MDR1）轉(zhuǎn)染保護(hù)骨髓造血細(xì)胞的基因治療項(xiàng)目已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，常用于骨髓未受侵犯的乳腺癌、卵巢癌和各種腦部腫瘤患者的治療 [5]。
2. 腫瘤免疫治療
2.1樹(shù)突狀細(xì)胞免疫治療
近幾年來(lái)，DC的研究取得很大進(jìn)展，包括DC的理想來(lái)源、DC的特異性抗原和負(fù)載方法、DC的成熟以及DC的免疫途徑等[6]。以腫瘤特異性抗原或腫瘤相關(guān)抗原多肽負(fù)載DC的腫瘤疫苗較早被應(yīng)用于臨床，在臨床I、II期試驗(yàn)中已取得了滿(mǎn)意的效果[7]。Maurizio等在小鼠模型體內(nèi)以脂質(zhì)體介導(dǎo)腫瘤抗原肽轉(zhuǎn)染DC，誘導(dǎo)出保護(hù)性抗腫瘤免疫反應(yīng)[2]。DC疫苗還可以提高NK細(xì)胞的活性，活化受體的表達(dá)，維持NK細(xì)胞的生存期，增強(qiáng)活化的NK細(xì)胞的腫瘤殺傷的功能[7]。
2.2單克隆抗體免疫療法
目前單克隆抗體免疫療法的研究非常活躍，已成為腫瘤治療的新熱點(diǎn)。現(xiàn)有的研究結(jié)果已表明腫瘤分子靶向治療具有較好的安全性和一定的有效性,尤其以針對(duì)表皮生長(zhǎng)因子受體( EGFR)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)靶點(diǎn)的藥物。小分子EGFR酪氨酸激酶抑制劑、抗EGFR單克隆抗體、抗VEGF單克隆抗體以及其他分子靶向治療藥物,已在臨床中取得較好的療效 [8]。
3. 抗血管生成治療
腫瘤的持續(xù)生長(zhǎng)依賴(lài)于新血管的生成，腫瘤血管生成過(guò)程受到血管生成刺激因子和抑制因子的雙重調(diào)節(jié)。目前較為肯定的血管生成刺激因子有血管內(nèi)皮生成因子（VEGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)、堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)等；血管生成抑制因子有組織金屬蛋白酶抑制劑、血管生成抑素、內(nèi)皮抑素、8Flt-1等[9]。研究表明，整合素avβ3在血管的生成過(guò)程中具有重要作用，并且抗整合素avβ3抗體具有明顯的抗腫瘤效應(yīng)[10]。
4. 干細(xì)胞治療
隨著對(duì)干細(xì)胞研究的深入，人們對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有了新的認(rèn)識(shí)。研究表明，Notch, Wnt及Hedgehog等細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可調(diào)節(jié)正常干細(xì)胞的自我更新，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也起著重要作用[11]。不同組織來(lái)源的干細(xì)胞比來(lái)源于同一組織的成熟細(xì)胞，其耐受放療和化療的能力更強(qiáng)；此現(xiàn)象可能與抗凋亡蛋白BCL-2家族蛋白及膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在干細(xì)胞的高水平表達(dá)有關(guān)[12]。這些都為治療實(shí)體瘤干細(xì)胞給出了重要啟示。
5. 生物治療存在問(wèn)題及展望
目前，生物治療的研究及臨床應(yīng)用面臨的主要問(wèn)題是生物治療沒(méi)有合適的腫瘤分子靶標(biāo)及長(zhǎng)期治療的規(guī)劃方案。因此，發(fā)現(xiàn)更多有意義的腫瘤分子靶標(biāo)并建立規(guī)范的治療方案是我們急需解決的問(wèn)題。
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關(guān)鍵詞：異體CIK聯(lián)合化療輸注； 單純化療； 晚期惡性腫瘤
中圖分類(lèi)號(hào)：R730.51
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：16749944（2017）8022603
1引言
近年來(lái)全球惡性腫瘤發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，腫瘤導(dǎo)致的死亡率也逐年上升，目前已居于首位。腫瘤治療失敗的主要原因有局部治療不徹底或治療后局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處播散、機(jī)體免疫降低給腫瘤復(fù)發(fā)播散創(chuàng)造有利的條件。目前合理、有計(jì)劃的綜合治療已在相當(dāng)多的腫瘤患者中取得較好的療效。近50年來(lái)綜合治療已取代傳統(tǒng)的單一治療，在相當(dāng)多的實(shí)體腫瘤中提高了治愈率。傳統(tǒng)的手術(shù)及放療、化療仍然是惡性腫瘤主導(dǎo)治療方式，生物免疫治療是目前第四大治療方式。CIK細(xì)胞具有體外擴(kuò)增速度快、殺瘤活性強(qiáng)、殺瘤譜廣、毒副作用小等特點(diǎn)，被認(rèn)為是惡性腫瘤過(guò)繼免疫治療的新希望[1]。對(duì)于不少經(jīng)歷化療后的腫瘤患者因骨髓抑制，自體外周血在體外生長(zhǎng)受到一定抑制。而近親緣關(guān)系的健康人外周血質(zhì)量更好，胞倍增速度更快，更適合幫助化療中的患者度過(guò)難關(guān)。本組對(duì)武漢紫荊醫(yī)院2013年11月至2015年10月期間收治過(guò)的42例惡性腫瘤患者進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)異體CIK聯(lián)合化療治療晚期惡性腫瘤具有更好的治療作用。
2資料和方法
2.1病例資料
收集武漢紫荊醫(yī)院2013年11月至2015年11月收治的42例晚期惡性腫瘤患者。按是否接受異體CIK治療，分為治療組和對(duì)照組各48例。治療組：接受異體CIK治療及化療治療；對(duì)照組：僅接受化療治療。2組資料年齡、性別及腫瘤分布見(jiàn)表1。所有42例患者均經(jīng)病理檢查及CT、MRI或PET-CT確診為晚期惡性腫瘤。觀察組入選標(biāo)準(zhǔn)：采血前對(duì)患者及患者近親家屬獻(xiàn)血者進(jìn)行血液分析、生化、血凝全套、傳染病檢查、免疫全套、腫瘤標(biāo)志物、心電圖及影像學(xué)檢查。選取無(wú)重要臟器功能衰竭者、無(wú)凝血功能障礙者、無(wú)臟器移植者、無(wú)自身免疫性疾病史、非T細(xì)胞淋巴瘤患者、無(wú)嚴(yán)重感染患者；卡氏評(píng)分不小于60分，預(yù)期生存期>3月，未失訪，能提供療程完畢后至少3個(gè)月的相關(guān)檢查報(bào)告；所有患者及其法定人均簽署知情同意書(shū)。
2組資料病種選擇及年齡性別比較差異無(wú)顯著性，具有可比性。
2.2試驗(yàn)方法
觀察組：采血前給予患者及獻(xiàn)血者相關(guān)輔助檢查，進(jìn)行疾病評(píng)估及簽署知情同意書(shū)；制定治療方案。進(jìn)行細(xì)胞采集，采集近親家屬血液60～100 mL，進(jìn)行異體CIK體外誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室為武漢科技大學(xué)附屬武漢紫荊醫(yī)院生物研究所，培養(yǎng)方法參照文獻(xiàn)[2]，進(jìn)行14～18 d CIK擴(kuò)增達(dá)治療量后離心收集細(xì)胞，以150 mL含1%人血白蛋白及0.9%氯化鈉重懸后靜脈輸注，每療程連續(xù)3天輸注，每月1療程，每次回輸細(xì)胞數(shù)量超過(guò)2×109個(gè)，每療程總細(xì)胞數(shù)量達(dá)10×109以上，連續(xù)進(jìn)行至少2療程輸注。其中輸注異體CIK 2次者9人、3次者5人、6次者3人，10～12次者3人、共進(jìn)行異體CIK回輸85人次。在2療程之間插入化療，按NCCN指南要求給予腫瘤患者適宜化療方案，化療與CIK回輸時(shí)間間隔至少1周，監(jiān)測(cè)不良反應(yīng)并處理。對(duì)照組：按NCCN指南，給予患者合適姑息性化療，監(jiān)測(cè)不良反應(yīng)給予處理。定期回訪并記錄相關(guān)結(jié)果，隨訪時(shí)間3～24個(gè)月，隨訪期間死亡者停止隨訪。
2.3觀察指標(biāo)
隨訪患者療程完畢后3～24個(gè)月內(nèi)主觀感受，癥狀變化，疾病變化相關(guān)影像學(xué)指標(biāo)。主觀感受包括：體力、體重、食欲、睡眠、疼痛等改變；實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)：腫瘤標(biāo)志物檢查；影像學(xué)資料。按WHO制定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)療效，按衛(wèi)生部2000年RECIST評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：CR（完全緩解）可見(jiàn)腫瘤完全消失；PR（部分緩解）腫瘤縮小超過(guò)30%；SD（穩(wěn)定）：非PR/PD；PD（進(jìn)展）：腫瘤增大超過(guò)20%或出現(xiàn)新的病灶。根據(jù)VAS和NRS法進(jìn)行疼痛療效評(píng)價(jià)。體力狀況評(píng)分按KPS評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分；治療前后分別使用睡眠監(jiān)測(cè)儀監(jiān)測(cè)患者睡眠改變情況。
2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)和百分比進(jìn)行有效率的對(duì)比分析。以a=0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，雙側(cè)檢驗(yàn)，P
3結(jié)果
3.1近期療效評(píng)價(jià)
兩組患者均按照計(jì)劃完成治療，并做了評(píng)價(jià)療效必需的相關(guān)檢查，可進(jìn)行療效評(píng)價(jià)，見(jiàn)表2。
3.2毒副反應(yīng)比較
對(duì)患者體重改變、食欲改善、睡眠改善、疼痛緩解進(jìn)行了比較，結(jié)果見(jiàn)表3。
3.3KPS評(píng)分變化
對(duì)兩組治療進(jìn)行了KPS評(píng)分，結(jié)果見(jiàn)表4。
3.4腫瘤標(biāo)志物及生存率監(jiān)測(cè)
兩組患者在隨訪中監(jiān)測(cè)治療組腫瘤標(biāo)志物下降者13例，腫瘤標(biāo)志物下降率60.9%，對(duì)照組腫瘤標(biāo)志物下降者7例，下降率為33.33%。發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組1年以上生存者14例，1年以上生存率達(dá)66.67%，對(duì)照組1年以上生存率10例，1年以上生存率47.62%。
3.5毒副反應(yīng)
聯(lián)合治療組中，CIK回輸共85次，回輸過(guò)程中出現(xiàn)2例高熱，給予退熱治療后改善，通過(guò)痰培養(yǎng)檢查考慮回輸前出現(xiàn)新近肺部炎癥，抗感染治療后改善，另外3例為低熱，飲水后自行恢復(fù)正常。CIK回輸過(guò)程中2例出現(xiàn)心慌氣喘，一例為腎癌出現(xiàn)肺轉(zhuǎn)移胸腔積液增加導(dǎo)致，另一例為肺泡癌出現(xiàn)疾病本身進(jìn)展導(dǎo)致肺功能下降，與細(xì)胞輸注關(guān)系不明顯，考慮疾病本身進(jìn)展所致。有一例出現(xiàn)一過(guò)性房顫，未進(jìn)行特殊治療自行恢復(fù)正常。CIK聯(lián)合化療組出現(xiàn)相關(guān)副反應(yīng)與對(duì)照組分析比較見(jiàn)表5。
4討論
細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer）是將人體外周血中的單核細(xì)胞在體外使用多種細(xì)胞因子如IL-2、IFN-Y、CD3單克隆抗體等共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。CIK細(xì)胞兼具有T淋巴細(xì)胞的抗瘤活性和NK胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是新一代抗腫瘤過(guò)繼細(xì)胞免疫治療的優(yōu)選細(xì)胞[3]。腫瘤生物治療的優(yōu)勢(shì)具有應(yīng)用范圍廣，幾乎可以應(yīng)用于所有腫瘤患者。對(duì)原發(fā)腫瘤、轉(zhuǎn)移灶均有明顯療效，可以清除處于G0期的腫瘤細(xì)胞，比放化療更有明顯優(yōu)勢(shì)，副反應(yīng)較小，目前僅發(fā)現(xiàn)有發(fā)燒和類(lèi)似感冒的副作用，能提高機(jī)體免疫力和改善身體狀況，和化療聯(lián)合使用可以增強(qiáng)化療的敏感性，降低化療的毒副反應(yīng)，可以幫助骨髓功能衰竭后的免疫重建。
回顧性分析在武漢紫荊醫(yī)院治療的42例晚期惡性腫瘤的患者，發(fā)現(xiàn)異體CIK聯(lián)合化療的治療組從治療有效率、緩解率及KPS評(píng)分等明顯優(yōu)于單純化療者，且治療組生活質(zhì)量的改善明顯優(yōu)于對(duì)照組。患者在體力、體重、睡眠、食欲及疼痛緩解等方面明顯優(yōu)于對(duì)照組。而化療常見(jiàn)胃腸道反應(yīng)，骨髓抑制、脫發(fā)等副反應(yīng)明顯降低。治療組21例患者中無(wú)嚴(yán)重過(guò)敏及休克、心衰或溶瘤綜合征的副反應(yīng)出現(xiàn)，無(wú)排異反應(yīng)出現(xiàn)。且在近2年監(jiān)測(cè)隨訪中發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組1年以上生存率明顯高于對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[4]。李霞等通過(guò)化療聯(lián)合CIK免疫療法治療晚期惡性腫瘤86例觀察，發(fā)現(xiàn)觀察組中位生存期28個(gè)月，明顯優(yōu)于對(duì)照組的9個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[5]。李新迪等通過(guò)分析DC-CIK細(xì)胞免疫療法對(duì)卵巢癌患者免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)該治療方式能有效提高卵巢癌患者T淋巴細(xì)胞免疫能力并增強(qiáng)Th1類(lèi)細(xì)胞因子抗腫瘤作用，有效提高患者生存質(zhì)量[6]。張俊萍等使用DC-CIK聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組DCR可達(dá)78%，明顯優(yōu)于單純化療組56%。且不良反應(yīng)骨髓抑制及惡心嘔吐、周?chē)窠?jīng)毒性明顯輕于單純化療組[7]。王子兵等使用化療聯(lián)合CIK細(xì)胞治療轉(zhuǎn)移性胰腺癌，發(fā)現(xiàn)疾病控制率81.82%，中位生存時(shí)間14.87個(gè)月，一年生存率72.73%[8]。李壯等研究發(fā)現(xiàn)健康人CIK增殖快，CD3、CD56比例高且抑瘤效應(yīng)強(qiáng)，能在患者外周血中存在5～8周并有效改善其免疫機(jī)能，在得到與自體CIK類(lèi)似療效的同時(shí)并未明顯增加不良反應(yīng)。因考慮晚期腫瘤患者本身較為衰竭，多不愿意過(guò)多抽取血液，且化療后可能出現(xiàn)骨髓抑制，影響細(xì)胞的活性，因而該院采用異體CIK聯(lián)合化療治療多種晚期惡性腫瘤，其療效顯著，明顯改善患者生活質(zhì)量，減輕化療相關(guān)不良反應(yīng)。
異體CIK可以顯著提高機(jī)體免疫力和抗腫瘤活性，且適用范圍廣泛，安全性能較好，毒副反應(yīng)較少，可以改善患者生活質(zhì)量，延長(zhǎng)患者生存期，值得臨床推廣及應(yīng)用。
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作者簡(jiǎn)介：梁輝（1971-），男，主治醫(yī)師，沈陽(yáng)市沈河區(qū)第二人民醫(yī)院。
【摘要】目的：系統(tǒng)觀察和分析CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫療法對(duì)多種中晚期惡性腫瘤的臨床療效。方法 用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，后加入IFN-r、IL-2、和CD3單抗等在5% CO2條件下定向誘導(dǎo)擴(kuò)增CIK細(xì)胞。培養(yǎng)15天后分次回輸給病人，隨訪觀察患者治療前后瘤體變化、T淋巴細(xì)胞rDNA轉(zhuǎn)錄活性的改善、臨床癥狀改善、生活質(zhì)量、卡氏評(píng)分及體重變化等，同時(shí)記錄生存期。結(jié)果 在2816例接受CIK細(xì)胞治療的患者中，PR+MR為2277例，總緩解率為80.86%，隨訪一年生存率為96.09%，二年生存率為92.96%，三年生存率為88.28%。臨床癥狀治療前后有明顯改善，X2=68.17，P
【關(guān)鍵詞】惡性腫瘤；過(guò)繼免疫治療；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）
惡性腫瘤近年來(lái)發(fā)病率及死亡率均有明顯上升的趨勢(shì)，這已為腫瘤臨床和基礎(chǔ)工作者所共識(shí)。生物治療是綜常規(guī)手術(shù)、放療、化療后的一種新的腫瘤治療手段[1]，腫瘤生物治療的主體目前仍屬腫瘤免疫治療。在惡性腫瘤的生物治療中，細(xì)胞過(guò)繼免疫治療是應(yīng)用較多，較為的一種治療方法，而CIK細(xì)胞由于其在體外能快速大量增殖、殺瘤活性和殺瘤譜較其它抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞更強(qiáng)、更廣，故成為最佳的一種新型抗腫瘤細(xì)胞[2、3]。
本研究將我院2000年2月～2009年10月應(yīng)用CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療的2186例中晚期惡性腫瘤的臨床療效進(jìn)行了系統(tǒng)的隨訪觀察，現(xiàn)將臨床觀察結(jié)果報(bào)告如下。
1材料和方法
1.1臨床資料：本組2816例患者無(wú)經(jīng)CT、X線、MRI及細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)等檢查確診為惡性腫瘤，并根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟（UICC）分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期。其中Ⅰ～Ⅱ期患者占176%，Ⅲ～Ⅳ期占82.4%，其中男性1309例，女性1507例，年齡分布40～60歲間，平均年齡57.39歲，病程最短為7天，最長(zhǎng)為3年。其中乳腺癌737例，肺癌616例，腸癌407例，胃癌308例，淋巴瘤220例，其它為腎癌、惡性黑色素瘤、食管癌、肝癌、腦瘤等528例。患者中接受CIK過(guò)繼免疫治療6療程以上者8例，4個(gè)療程者18例，3個(gè)療程者187例，2個(gè)療程者530例，其它一個(gè)療程。
2結(jié)果
3討論
CIK（Cytokine-Induced Kill）細(xì)胞最初是指在正常人體外周血中占1～5%的CD3+CD56+的T淋巴細(xì)胞。該細(xì)胞在細(xì)胞因子及某些單克隆抗體（Anti-CD3McAb）刺激下，可戲劇性增殖（1000倍以上），并有廣泛的非組織相關(guān)性抗原（MHC）限制性的極強(qiáng)溶瘤活性。但目前國(guó)內(nèi)外制備的用于過(guò)繼免疫治療的CIK細(xì)胞，實(shí)際是體外的CD3+CD56+、CD3+CD8+為主的一異質(zhì)性細(xì)胞群。其主要通過(guò)三個(gè)途徑發(fā)揮殺瘤、溶瘤作用，即：（1）CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接殺傷作用，在體內(nèi)受某種淋巴因子作用后CIK細(xì)胞釋放具有細(xì)胞毒性的胞漿顆粒到胞外，這些顆粒直接破壞腫瘤細(xì)胞；（2）進(jìn)入體內(nèi)的CIK細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子如r-IFN、TNF、IL-2等，不僅對(duì)腫瘤細(xì)胞有直接抑制作用，而且可以通過(guò)免疫系統(tǒng)間接殺傷瘤細(xì)胞；（3）CIK細(xì)胞表達(dá)Fasl可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，但CIK細(xì)胞有抗凋亡基因表達(dá)，因此在體內(nèi)能持久發(fā)揮作用。因此，本療法在2816例腫瘤患者表現(xiàn)出了極佳的療效。
我院對(duì)接受CIK過(guò)繼免疫治療的2816例患者臨床資料進(jìn)行初步分析，結(jié)果顯示：總緩解率達(dá)80.86%，三年期生存率為88.09%。本研究尚采用Karnofsky評(píng)分及體重改變兩項(xiàng)指標(biāo)評(píng)估患者生存質(zhì)量，結(jié)果顯示，治療后Karnofsky評(píng)分平均提高15分左右為88.28%，體重增加1.5kg的為76.28%。表明經(jīng)本院系統(tǒng)治療后的患者生存質(zhì)量有了明顯好轉(zhuǎn)，與其它CIK細(xì)胞治療惡性腫瘤的結(jié)果一致。CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療有望成為腫瘤治療的一個(gè)新的里程碑。參考文獻(xiàn)
[1]董志偉 我國(guó)腫瘤流行趨勢(shì)與生物技術(shù)在腫瘤控制中的作用 中國(guó)腫瘤治療雜志1997；4（3）：164
去年“兩會(huì)”期間，我曾經(jīng)問(wèn)他，安科生物未來(lái)的增長(zhǎng)情況如何，他表示對(duì)業(yè)績(jī)“沒(méi)有特別高的要求，每年有20%的增長(zhǎng)就很好，這也是我對(duì)下面人提的要求”。但20%這個(gè)數(shù)字比起2016年的業(yè)績(jī)?cè)龇投嗔恕?/p>
2016全年安科生物營(yíng)業(yè)收入增長(zhǎng)33.58%，歸屬于上市公司股東的扣除非經(jīng)常性損益的凈利潤(rùn)同比增長(zhǎng)39.49%，基本每股收益同比增長(zhǎng)35.03%，除了這些，還有一個(gè)數(shù)據(jù)更能體現(xiàn)安科生物2016年度的大豐收，其經(jīng)營(yíng)活動(dòng)產(chǎn)生的現(xiàn)金流量?jī)纛~同比大幅增長(zhǎng)117.30%。
在披露2016年度報(bào)告后不久，安科生物又發(fā)出了2017年一季度的業(yè)績(jī)預(yù)告。預(yù)告顯示，2017年第一季度安科生物歸屬于股東凈利潤(rùn)較上年同期增長(zhǎng)13.63%-42.04%。由此看來(lái)，2017年全年安科生物的表現(xiàn)是令人期待的。 切入癌細(xì)胞CAR-T療法
安科生物以生物藥起家，生物制品產(chǎn)品主要包括重組人a2b干擾素、重組人生長(zhǎng)激素、生物檢測(cè)試劑等。過(guò)去市場(chǎng)對(duì)安科生物的認(rèn)知是以生物醫(yī)藥為主，化藥和中成藥為輔，而今后對(duì)公司的認(rèn)知可能將增加一項(xiàng)――精準(zhǔn)醫(yī)療服務(wù)――這項(xiàng)業(yè)務(wù)將成為安科生物重要的業(yè)務(wù)板塊。
“我們不會(huì)刻意的追求以誰(shuí)為主，根據(jù)市場(chǎng)的發(fā)展及業(yè)務(wù)自身的成長(zhǎng)性，精準(zhǔn)醫(yī)療服務(wù)肯定是我們重點(diǎn)發(fā)展的一個(gè)領(lǐng)域，目前我們還是以生物醫(yī)藥為主。”宋禮華解釋說(shuō)。
安科生物現(xiàn)在重點(diǎn)發(fā)展的一項(xiàng)精準(zhǔn)醫(yī)療服務(wù)是嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法（CAR-T療法），宋禮華專(zhuān)門(mén)為我們講解了這一療法的原理。
通過(guò)對(duì)T 細(xì)胞進(jìn)行修飾（嵌合抗原受體），使T 細(xì)胞可以特異性地識(shí)別腫瘤抗原，增強(qiáng)T 細(xì)胞的靶向性和殺傷活性。簡(jiǎn)而言之，就是給T細(xì)胞裝上雷達(dá)“CAR”。
服務(wù)的過(guò)程分為5步：1，從癌癥患者外周血或者單采單個(gè)核細(xì)胞中分離出T 細(xì)胞;2，利用基因工程將能特異識(shí)別腫瘤細(xì)胞的CAR 結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)入T細(xì)胞;3，體外培養(yǎng)，大量擴(kuò)增CAR-T 細(xì)胞至治療所需劑量，一般需要幾十億到上百億，一般以每公斤體重計(jì)算所需劑量;4，進(jìn)行回輸之前的清髓治療，一般為化療，一方面可以清除免疫抑制細(xì)胞，另外可以減少腫瘤負(fù)荷從而起到增強(qiáng)療效的作用;5，回輸CAR-T 細(xì)胞，觀察療效并嚴(yán)密監(jiān)測(cè)不良反應(yīng)。
在這個(gè)過(guò)程中涉及到一個(gè)難點(diǎn)，就是CAR-T 細(xì)胞的儲(chǔ)存和運(yùn)輸。
“儲(chǔ)存和運(yùn)輸確實(shí)是我們的核心技術(shù)之一，其實(shí)診療服務(wù)的周期并不長(zhǎng)，一周時(shí)間血液就可以回輸，之后會(huì)連續(xù)三天進(jìn)行三次回輸，我們可以把病人請(qǐng)到合肥，也可以通過(guò)空運(yùn)的方式將CAR-T 細(xì)胞運(yùn)到病人所在地。”宋禮華對(duì)《英才》記者表示。 利用并購(gòu)建立壁壘
安科生物在精準(zhǔn)醫(yī)療服務(wù)領(lǐng)域的滲透并非單打獨(dú)斗，他們與業(yè)界知名的企業(yè)有密切合作，并進(jìn)行了股權(quán)上的投資。
2015 年12 月28 日，公司與楊林等博生吉醫(yī)藥科技（蘇州）有限公司原股東簽訂了《增資協(xié)議》，公司以2000 萬(wàn)元增資博生吉公司，持有博生吉公司15%的股份;
2016年2月2日，公司與博生吉公司股東楊林博士簽訂了《股權(quán)轉(zhuǎn)讓協(xié)議》，公司擬以750萬(wàn)元受讓楊林持有的博生吉公司5%的股權(quán)。本次股權(quán)轉(zhuǎn)讓完成后，公司持有博生吉公司20%的股權(quán);
之后，2017年10月27日，公司公告，將與博生吉共同出資設(shè)立博生吉安科細(xì)胞技術(shù)有限公司，注冊(cè)資本人民幣10000 萬(wàn)元，致力于特異性免疫細(xì)胞治療技術(shù)和產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化。
博生吉公司是國(guó)內(nèi)首家擁有CAR-T 細(xì)胞/CAR-NK 細(xì)胞技術(shù)服務(wù)平臺(tái)的公司，以腫瘤細(xì)胞免疫治療技術(shù)與產(chǎn)品研發(fā)為主要發(fā)展目標(biāo)、以臨床技術(shù)服務(wù)為主要業(yè)務(wù)的高科技企業(yè)。
據(jù)透露，目前博生吉已經(jīng)成功構(gòu)建了第二代、第三代和第四代CAR-T系統(tǒng)，可應(yīng)用于白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、胃癌、腸癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌等多種適應(yīng)癥的多個(gè)治療靶點(diǎn)。
對(duì)于博生吉的參股，是近年來(lái)安科生物持續(xù)利用資本手段快速壯大自己的行動(dòng)之一。此外，安科近些年還進(jìn)行了多筆收購(gòu)和股權(quán)投資。
2015 年3月，安科生物以發(fā)行股份及支付現(xiàn)金相結(jié)合的方式，購(gòu)買(mǎi)蘇豪逸明100%的股權(quán)，標(biāo)的公司預(yù)估值共計(jì)4.05 億元。蘇豪逸明成立于2001 年，主要從事多肽類(lèi)原料藥的研發(fā)、生產(chǎn)及銷(xiāo)售，建立國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的活性小分子多肽類(lèi)藥物，及前體物規(guī)模化研發(fā)的高技術(shù)平臺(tái)。
2016 年4 月1 日，公司董事會(huì)同意以4.4988億元收購(gòu)中德美聯(lián)100%的股權(quán)。無(wú)錫中德美聯(lián)成立于2006 年，由留學(xué)歸國(guó)人員創(chuàng)辦，是我國(guó)國(guó)家核酸檢測(cè)法醫(yī)領(lǐng)域的領(lǐng)軍企業(yè)。
2016 年9 月18 日，公司與上海希元生物技術(shù)有限公司訂了《技術(shù)轉(zhuǎn)讓合同》，公司出資人民幣1000 萬(wàn)元受讓希元生物持有的重組人腫瘤靶向基因―病毒株及所有研究的技術(shù)資料及專(zhuān)利成果，同時(shí)，公司以自有資金人民幣3000 萬(wàn)元對(duì)希元公司進(jìn)行增資，取得希元公司20%的股權(quán)。
“我們的收購(gòu)主要會(huì)圍繞腫瘤和精準(zhǔn)醫(yī)療兩個(gè)方向，不會(huì)做沒(méi)有利潤(rùn)的收購(gòu)。中成藥我們不會(huì)收了，主要維持現(xiàn)有規(guī)模，化藥如果收購(gòu)也肯定與抗腫瘤相關(guān)。”宋禮華明確了公司未來(lái)的收購(gòu)方向。
作者簡(jiǎn)介：梁輝（1971-），男，主治醫(yī)師，沈陽(yáng)市沈河區(qū)第二人民醫(yī)院。
【摘要】目的：探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（CIK）過(guò)繼免疫療法對(duì)中晚期肺癌的臨床療效。方法：選擇2001-9～2009-3在我院接受治療的256例中晚期肺癌患者，用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，后加入干擾素r、白介素-2和CD3單抗等在5% CO2條件下定向誘導(dǎo)擴(kuò)增CIK細(xì)胞。培養(yǎng)15天后分次回輸給患者，隨訪觀察患者治療前后瘤體變化、臨床癥狀改善、生活質(zhì)量、卡氏評(píng)分及體重變化等，同時(shí)記錄生存期。結(jié)果：部分緩解和輕度緩解為206例，總緩解率為80.46%，隨訪1年存活率為82.81%，2存活率為76.56%和3年存活率為67.96%。臨床癥狀治療前、后有明顯改善，X2=68.17，P
【關(guān)鍵詞】肺癌；過(guò)繼免疫治療；細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展及腫瘤與免疫關(guān)系的深入研究，生物治療已經(jīng)成為國(guó)際公認(rèn)的惡性腫瘤治療的第四種手段。其中細(xì)胞過(guò)繼免疫治療是當(dāng)今國(guó)內(nèi)外的一個(gè)熱點(diǎn)，而其中的CIK細(xì)胞具有體外增值速度快，對(duì)腫瘤細(xì)胞有廣譜、高效的殺傷作用，成為一種新的治療手段越來(lái)越受到重視。現(xiàn)在我院收治的256例晚期肺癌病人的臨床療效報(bào)道如下。
1資料和方法
1.1臨床資料：本組256例患者均經(jīng)X線、CT、病理學(xué)等方法確診為肺癌，并根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟（UICC）分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，Ⅰ～Ⅱ期患者為46例（占17.6%），Ⅲ～Ⅳ期為210例（占82.4%）；其中男性為124例，女性為132例，最大年齡83歲，最小為34歲，平均年齡58歲。病理：小細(xì)胞64例，鱗癌56例，腺癌92例，其它44例。256例中接受CIK治療4個(gè)療程的有52例，3個(gè)療程的30例，2個(gè)療程的84例，余者1個(gè)療程。
2結(jié)果
2.1瘤體變化：本組256例病人，治療后無(wú)CR病例，PR24例，MR166例，SD26例，PD40例，總緩解率為74.21%。
2.2生存期：對(duì)治療后的256例病人隨訪3年，1年存活率為82.81%，2年存活率為76.56%，3年存活率為67.96%。
2.5不良反應(yīng)：在接受治療的256例病人中未見(jiàn)心＼肝、腎、不良反應(yīng)，少數(shù)病有一過(guò)性發(fā)熱（體溫38℃），24小時(shí)后恢復(fù)正常。
3討論
目前國(guó)內(nèi)外制備的用于治療的CIK細(xì)胞實(shí)際上是體外擴(kuò)增出來(lái)的CD3+CD56+、CD3+CD8+為主的一異質(zhì)細(xì)胞群。其通過(guò)三種機(jī)制發(fā)揮治療作用：（1）CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤的直接殺傷作用，在體內(nèi)某些因子的刺激后釋放具有細(xì)胞毒作用的胞漿顆粒到胞外，直接破壞腫瘤細(xì)胞；（2）進(jìn)入體內(nèi)活化的CK細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子如干擾素、腫瘤壞存因子和白介不素-2等，不僅對(duì)腫瘤有直接抑制作用，而且還可以通過(guò)免疫調(diào)解間接殺傷腫瘤細(xì)胞。（3）CIK通過(guò)表達(dá)Fasl可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[1，2]。由于本院的療法采用的是一種高溶瘤活性的CIK細(xì)胞，因此對(duì)256例病人取得了極佳的治療效果。
本研究結(jié)果顯示：（1）部分患者經(jīng)過(guò)我院CIK治療后瘤體縮小或穩(wěn)定，緩解率達(dá)到74.21%。（2）患者3年存活率為67.96%，臨床癥狀均有十分顯著的改善。并通過(guò)Karnofsky評(píng)分平均提高[3，4]15分、體重提高1.5公斤。對(duì)于病人生活質(zhì)量的提高與其它CIK細(xì)胞治療腫瘤的結(jié)果一致。（3）由于CIK作用機(jī)制不同于化療，因此，對(duì)骨髓、胃腸道及肝腎功能等無(wú)明顯影響。
總之，通過(guò)CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療不僅利于病人腫瘤與免疫部平衡的建立，達(dá)到抑制腫瘤的發(fā)展，減少轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，并能顯著提高晚期病人的生活質(zhì)量和延長(zhǎng)生存期。為病人提供了一種經(jīng)濟(jì)、安全、有效的治療手段。參考文獻(xiàn)
[1]Vemeris MR，KornackerV，mailanderV，etal.Resistance of exvivo expandedCD3CD56 T cell to fas-mediated apoptosis. Cancer Immunol Immunother，2000，49：335-345
