時(shí)間：2022-03-02 08:38:02
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇信息的鑒別與評價(jià)，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
[中圖分類號]R446.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號] 1673-7210（2009）03（c）-110-02
正常人的尿液中沒有紅細(xì)胞，如果尿液中進(jìn)入了血液，經(jīng)離心沉淀后的尿液，顯微鏡下每高倍視野有2個(gè)以上的紅細(xì)胞，稱為血尿。主要分為腎小球性與非腎小球性血尿。腎小球疾患導(dǎo)致的血尿，其紅細(xì)胞絕大部分是畸形的，形態(tài)各異，大小明顯差異；而非腎小球性血尿，其紅細(xì)胞絕大多數(shù)大小正常，僅少部分為畸形紅細(xì)胞。兩類血尿?qū)ΠY治療原則也是相反的，腎小球性血尿常需抗凝、抗栓、抗血小板聚集或活血化瘀治療，而非腎小球性血尿常須應(yīng)用止血療法。因此，判斷血尿來源非常重要。
日本Sysmex公司生產(chǎn)的UF-100全自動(dòng)尿液分析儀(以下簡稱UF-100)結(jié)合流式細(xì)胞技術(shù)與電阻抗測定法，通過測定前向散射光，熒光的波幅和強(qiáng)度以及電阻的變化報(bào)告12種參數(shù)，對尿5種有形成分(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌)進(jìn)行分析，同時(shí)可將紅細(xì)胞分為均一型、不均一型和混合型，對鑒別紅細(xì)胞來源(腎小球、腎小管或是下泌尿道)有參考價(jià)值。以往這種檢查要用顯微鏡，而且主觀影響較大。為了解UF-100鑒別血尿來源的功能，我們對95例腎小球性血尿和153例非腎小球性血尿標(biāo)本進(jìn)行檢測，統(tǒng)計(jì)紅細(xì)胞各項(xiàng)數(shù)據(jù)，并將儀器紅細(xì)胞提示信息與光學(xué)普通顯微鏡檢查結(jié)果進(jìn)行比較。
1 材料與方法
1.1 尿標(biāo)本來源
95例腎小球血尿和153例非腎小球性血尿標(biāo)本來自我院門診及住院部各科室已確診的患者。醫(yī)務(wù)人員嚴(yán)格按照中段尿采集指南操作，取患者清潔中段尿，立即送檢。
1.2 儀器和材料
UF-100全自動(dòng)尿液分析儀及配套試劑（包括質(zhì)控品）為日本Sysmex公司產(chǎn)品。奧林帕斯顯微鏡。
1.3 UF-100使用方法
工作前先作儀器的每日質(zhì)控，數(shù)據(jù)正常時(shí)開始檢測。將進(jìn)樣針插入含充分混均樣品的試管，按進(jìn)樣開關(guān)，儀器自動(dòng)吸取800 μl樣品，分析各種參數(shù)，記錄分析數(shù)據(jù)。
1.4 臨床尿標(biāo)本檢測
取尿液標(biāo)本用UF-100尿液分析儀檢測。統(tǒng)計(jì)紅細(xì)胞各項(xiàng)數(shù)據(jù)。取尿液標(biāo)本10 ml于試管內(nèi)，以每分鐘2 000轉(zhuǎn)速離心沉淀3～5 min，棄上清，約剩0.2 ml沉渣，鏡檢。所測結(jié)果與UF-100尿液儀檢測紅細(xì)胞各項(xiàng)數(shù)據(jù)比較。用Yerushalmy模式評價(jià)鏡檢與UF-100判斷腎小球性血尿的敏感性和特異性。
2 結(jié)果
UF-100尿液分析儀檢測紅細(xì)胞各項(xiàng)數(shù)據(jù)見表1；鏡檢與UF-100鑒別血尿來源的評價(jià)見表2、3。按表2、3內(nèi)容采用Yerushalmy模式計(jì)算，該方法的靈敏度、特異性見表4。
表1 UF-100測定腎小球性血尿與非腎小球血尿中紅細(xì)胞各項(xiàng)數(shù)據(jù)（x±s,ch）
表2 UF-100鑒別血尿來源的評價(jià)(例)
表3 鏡檢鑒別血尿來源的評價(jià)(例)
表4 鏡檢與UF-100 2種檢測指標(biāo)鑒別血尿來源的評價(jià)（%）
3 討論
血尿是泌尿系統(tǒng)疾病的常見癥狀，血尿來源與尿紅細(xì)胞形態(tài)變化的關(guān)系已得到公認(rèn)。雖然腎穿刺活檢確認(rèn)出血病因及病理變化，但常會(huì)給患者帶來痛苦。近十余年來國內(nèi)外相繼使用相差顯微鏡，掃瞄電鏡等觀察尿紅細(xì)胞形態(tài)來鑒別血尿來源，但因價(jià)格或主觀影響太大而未能普及。
尿中紅細(xì)胞在鏡檢與UF-100檢測中的表現(xiàn)形式，①腎性紅細(xì)胞：鏡下特征為形態(tài)多形性大小不規(guī)則，環(huán)形和部分膨脹；②UF-100圖形在FsC/Fl上分布于Fsc區(qū)，RBC/FSC分布于直方圖的左邊，RBC-lnfo顯示腎形RBC，支持鏡下紅細(xì)胞不正常形態(tài)，在紅細(xì)胞存在于許多腎、尿道疾病和出血性疾病；③UF-100圖形在FSC/Fl上RBC出現(xiàn)在典型的RBC分布區(qū)，皺縮RBC和體外RBC出現(xiàn)在同一區(qū)域。Fsc/Fscw：較小數(shù)目的RBC分布于Fscw相當(dāng)?shù)偷膮^(qū)，在這個(gè)區(qū)，正常RBC和穿刺RBC出現(xiàn)，RBC/FsC直方圖：在左邊出現(xiàn)一個(gè)小峰表示沒有出血。
UF-100紅細(xì)胞形態(tài)分析包括三種信息，①Dysmophic：腎性紅細(xì)胞即≥80%的RBC的FSC≤126 ch且＜80%的RBC的FSC>84 ch；②Lsomophic：均一性紅細(xì)胞即>80%的RBC的FSC>84 ch；③Mixed：混合性紅細(xì)胞即(Lsomophic+Dysmophic)。
將已確診的患者作為金標(biāo)準(zhǔn)，將鏡檢和UF-100判斷結(jié)果與之比較。UF-100紅細(xì)胞提示信息與普通光學(xué)顯微鏡檢查結(jié)果判斷腎小球性血尿的敏感性分別為94.7%和82.1%，差異有顯著性(P＜0.01)，特異性分析為84.3%和86.3%，差異無顯著性(P>0.05)，誤診率分別為0.16%和0.14%，漏診率分別為0.05%和0.17%。
5 結(jié)論
鑒于UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測尿紅細(xì)胞鑒別腎小球性血尿的高敏感性(94.7%)和較高特異性(84.3%)，筆者認(rèn)為用全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測尿紅細(xì)胞非均一性和均一性來鑒別血尿來源具有一定的過篩作用。
[參考文獻(xiàn)]
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隨著寬帶網(wǎng)絡(luò)和用戶規(guī)模的不斷增長，用戶對寬帶接入業(yè)務(wù)的高可用性要求不斷增強(qiáng)，對電信運(yùn)營商在IP城域、接入網(wǎng)絡(luò)和支撐系統(tǒng)提出了更高的安全性要求。本文從信息安全管理的理念、方法學(xué)和相關(guān)技術(shù)入手，結(jié)合電信IP城域網(wǎng)，提出電信IP城域網(wǎng)安全管理、風(fēng)險(xiǎn)評估和加固的實(shí)踐方法建議。
關(guān)鍵字（Keywords）：
安全管理、風(fēng)險(xiǎn)、弱點(diǎn)、評估、城域網(wǎng)、IP、AAA、DNS
1 信息安全管理概述
普遍意義上，對信息安全的定義是“保護(hù)信息系統(tǒng)和信息，防止其因?yàn)榕既换驉阂馇址付鴮?dǎo)致信息的破壞、更改和泄漏，保證信息系統(tǒng)能夠連續(xù)、可靠、正常的運(yùn)行”。所以說信息安全應(yīng)該理解為一個(gè)動(dòng)態(tài)的管理過程，通過一系列的安全管理活動(dòng)來保證信息和信息系統(tǒng)的安全需求得到持續(xù)滿足。這些安全需求包括“保密性”、“完整性”、“可用性”、“防抵賴性”、“可追溯性”和“真實(shí)性”等。
信息安全管理的本質(zhì)，可以看作是動(dòng)態(tài)地對信息安全風(fēng)險(xiǎn)的管理，即要實(shí)現(xiàn)對信息和信息系統(tǒng)的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行有效管理和控制。標(biāo)準(zhǔn)ISO15408－1（信息安全風(fēng)險(xiǎn)管理和評估規(guī)則），給出了一個(gè)非常經(jīng)典的信息安全風(fēng)險(xiǎn)管理模型，如下圖一所示：
既然信息安全是一個(gè)管理過程，則對PDCA模型有適用性，結(jié)合信息安全管理相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)BS7799(ISO17799)，信息安全管理過程就是PLAN-DO-CHECK-ACT（計(jì)劃－實(shí)施與部署－監(jiān)控與評估－維護(hù)和改進(jìn)）的循環(huán)過程。
2 建立信息安全管理體系的主要步驟
如圖二所示，在PLAN階段，就需要遵照BS7799等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、結(jié)合企業(yè)信息系統(tǒng)實(shí)際情況，建設(shè)適合于自身的ISMS信息安全管理體系，ISMS的構(gòu)建包含以下主要步驟：
（1） 確定ISMS的范疇和安全邊界
（2） 在范疇內(nèi)定義信息安全策略、方針和指南
（3） 對范疇內(nèi)的相關(guān)信息和信息系統(tǒng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估
a) Planning（規(guī)劃）
b) Information Gathering（信息搜集）
c) Risk Analysis（風(fēng)險(xiǎn)分析）
u Assets Identification & valuation(資產(chǎn)鑒別與資產(chǎn)評估)
u Threat Analysis（威脅分析）
u Vulnerability Analysis（弱點(diǎn)分析）
u 資產(chǎn)/威脅/弱點(diǎn)的映射表
u Impact & Likelihood Assessment（影響和可能性評估）
u Risk Result Analysis（風(fēng)險(xiǎn)結(jié)果分析）
d) Identifying & Selecting Safeguards（鑒別和選擇防護(hù)措施）
e) Monitoring & Implementation（監(jiān)控和實(shí)施）
f) Effect estimation（效果檢查與評估）
（4） 實(shí)施和運(yùn)營初步的ISMS體系
（5） 對ISMS運(yùn)營的過程和效果進(jìn)行監(jiān)控
（6） 在運(yùn)營中對ISMS進(jìn)行不斷優(yōu)化
3 IP寬帶網(wǎng)絡(luò)安全風(fēng)險(xiǎn)管理主要實(shí)踐步驟
目前，寬帶IP網(wǎng)絡(luò)所接入的客戶對網(wǎng)絡(luò)可用性和自身信息系統(tǒng)的安全性需求越來越高，且IP寬帶網(wǎng)絡(luò)及客戶所處的信息安全環(huán)境和所面臨的主要安全威脅又在不斷變化。IP寬帶網(wǎng)絡(luò)的運(yùn)營者意識(shí)到有必要對IP寬帶網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行系統(tǒng)的安全管理，以使得能夠動(dòng)態(tài)的了解、管理和控制各種可能存在的安全風(fēng)險(xiǎn)。
由于網(wǎng)絡(luò)運(yùn)營者目前對于信息安全管理還缺乏相應(yīng)的管理經(jīng)驗(yàn)和人才隊(duì)伍，所以一般采用信息安全咨詢外包的方式來建立IP寬帶網(wǎng)絡(luò)的信息安全管理體系。此類咨詢項(xiàng)目一般按照以下幾個(gè)階段，進(jìn)行項(xiàng)目實(shí)踐：
3.1 項(xiàng)目準(zhǔn)備階段。
a) 主要搜集和分析與項(xiàng)目相關(guān)的背景信息；
b) 和客戶溝通并明確項(xiàng)目范圍、目標(biāo)與藍(lán)圖；
c) 建議并明確項(xiàng)目成員組成和分工；
d) 對項(xiàng)目約束條件和風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行聲明；
e) 對客戶領(lǐng)導(dǎo)和項(xiàng)目成員進(jìn)行意識(shí)、知識(shí)或工具培訓(xùn)；
f) 匯報(bào)項(xiàng)目進(jìn)度計(jì)劃并獲得客戶領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)等。
3.2 項(xiàng)目執(zhí)行階段。
a) 在項(xiàng)目范圍內(nèi)進(jìn)行安全域劃分；
b) 分安全域進(jìn)行資料搜集和訪談，包括用戶規(guī)模、用戶分布、網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)、路由協(xié)議與策略、認(rèn)證協(xié)議與策略、DNS服務(wù)策略、相關(guān)主機(jī)和數(shù)據(jù)庫配置信息、機(jī)房和環(huán)境安全條件、已有的安全防護(hù)措施、曾經(jīng)發(fā)生過的安全事件信息等；
c) 在各個(gè)安全域進(jìn)行資產(chǎn)鑒別、價(jià)值分析、威脅分析、弱點(diǎn)分析、可能性分析和影響分析，形成資產(chǎn)表、威脅評估表、風(fēng)險(xiǎn)評估表和風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系映射表；
d) 對存在的主要風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)等級綜合評價(jià)，并按照重要次序，給出相應(yīng)的防護(hù)措施選擇和風(fēng)險(xiǎn)處置建議。
3.3 項(xiàng)目總結(jié)階段
a) 項(xiàng)目中產(chǎn)生的策略、指南等文檔進(jìn)行審核和批準(zhǔn)；
b) 對項(xiàng)目資產(chǎn)鑒別報(bào)告、風(fēng)險(xiǎn)分析報(bào)告進(jìn)行審核和批準(zhǔn)；
c) 對需要進(jìn)行的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)處置建議進(jìn)行項(xiàng)目安排；
4 IP寬帶網(wǎng)絡(luò)安全風(fēng)險(xiǎn)管理實(shí)踐要點(diǎn)分析
運(yùn)營商IP寬帶網(wǎng)絡(luò)和常見的針對以主機(jī)為核心的IT系統(tǒng)的安全風(fēng)險(xiǎn)管理不同，其覆蓋的范圍和影響因素有很大差異性。所以不能直接套用通用的風(fēng)險(xiǎn)管理的方法和資料。在項(xiàng)目執(zhí)行的不同階段，需要特別注意以下要點(diǎn)：
4.1 安全目標(biāo)
充分保證自身IP寬帶網(wǎng)絡(luò)及相關(guān)管理支撐系統(tǒng)的安全性、保證客戶的業(yè)務(wù)可用性和質(zhì)量。
4.2 項(xiàng)目范疇
應(yīng)該包含寬帶IP骨干網(wǎng)、IP城域網(wǎng)、IP接入網(wǎng)及接入網(wǎng)關(guān)設(shè)備、管理支撐系統(tǒng)：如網(wǎng)管系統(tǒng)、AAA平臺(tái)、DNS等。
4.3 項(xiàng)目成員
應(yīng)該得到運(yùn)營商高層領(lǐng)導(dǎo)的明確支持，項(xiàng)目組長應(yīng)該具備管理大型安全咨詢項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)的人承擔(dān)，且項(xiàng)目成員除了包含一些專業(yè)安全評估人員之外，還應(yīng)該包含與寬帶IP相關(guān)的“業(yè)務(wù)與網(wǎng)絡(luò)規(guī)劃”、“設(shè)備與系統(tǒng)維護(hù)”、“業(yè)務(wù)管理”和“相關(guān)系統(tǒng)集成商和軟件開發(fā)商”人員。
4.4 背景信息搜集：
背景信息搜集之前，應(yīng)該對信息搜集對象進(jìn)行分組，即分為IP骨干網(wǎng)小組、IP接入網(wǎng)小組、管理支撐系統(tǒng)小組等。分組搜集的信息應(yīng)包含：
a) IP寬帶網(wǎng)絡(luò)總體架構(gòu)
b) 城域網(wǎng)結(jié)構(gòu)和配置
c) 接入網(wǎng)結(jié)構(gòu)和配置
d) AAA平臺(tái)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和配置
e) DNS系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和配置
f) 相關(guān)主機(jī)和設(shè)備的軟硬件信息
g) 相關(guān)業(yè)務(wù)操作規(guī)范、流程和接口
h) 相關(guān)業(yè)務(wù)數(shù)據(jù)的生成、存儲(chǔ)和安全需求信息
i) 已有的安全事故記錄
j) 已有的安全產(chǎn)品和已經(jīng)部署的安全控制措施
k) 相關(guān)機(jī)房的物理環(huán)境信息
l) 已有的安全管理策略、規(guī)定和指南
m) 其它相關(guān)
4.5 資產(chǎn)鑒別
資產(chǎn)鑒別應(yīng)該自頂向下進(jìn)行鑒別，必須具備層次性。最頂層可以將資產(chǎn)鑒別為城域網(wǎng)、接入網(wǎng)、AAA平臺(tái)、DNS平臺(tái)、網(wǎng)管系統(tǒng)等一級資產(chǎn)組；然后可以在一級資產(chǎn)組內(nèi)，按照功能或地域進(jìn)行劃分二級資產(chǎn)組，如AAA平臺(tái)一級資產(chǎn)組可以劃分為RADIUS組、DB組、計(jì)費(fèi)組、網(wǎng)絡(luò)通信設(shè)備組等二級資產(chǎn)組；進(jìn)一步可以針對各個(gè)二級資產(chǎn)組的每個(gè)設(shè)備進(jìn)行更為細(xì)致的資產(chǎn)鑒別，鑒別其設(shè)備類型、地址配置、軟硬件配置等信息。
4.6 威脅分析
威脅分析應(yīng)該具有針對性，即按照不同的資產(chǎn)組進(jìn)行針對性威脅分析。如針對IP城域網(wǎng)，其主要風(fēng)險(xiǎn)可能是：蠕蟲、P2P、路由攻擊、路由設(shè)備入侵等；而對于DNS或AAA平臺(tái)，其主要風(fēng)險(xiǎn)可能包括：主機(jī)病毒、后門程序、應(yīng)用服務(wù)的DOS攻擊、主機(jī)入侵、數(shù)據(jù)庫攻擊、DNS釣魚等。
4.7 威脅影響分析
是指對不同威脅其可能造成的危害進(jìn)行評定，作為下一步是否采取或采取何種處置措施的參考依據(jù)。在威脅影響分析中應(yīng)該充分參考運(yùn)營商意見，尤其要充分考慮威脅發(fā)生后可能造成的社會(huì)影響和信譽(yù)影響。
4.8 威脅可能性分析
是指某種威脅可能發(fā)生的概率，其發(fā)生概率評定非常困難，所以一般情況下都應(yīng)該采用定性的分析方法，制定出一套評價(jià)規(guī)則，主要由運(yùn)營商管理人員按照規(guī)則進(jìn)行評價(jià)。
中藥鑒定學(xué)是鑒定和研究中藥的品種和質(zhì)量,制定中藥標(biāo)準(zhǔn),尋找和擴(kuò)大新藥源的應(yīng)用學(xué)科。它是中藥專業(yè)必修的一門專業(yè)課,具有很強(qiáng)的實(shí)用性。由于受高等教育課程模式的影響,醫(yī)藥類高職高專《中藥鑒定技術(shù)》的教學(xué)過程中多偏重于理論教學(xué),實(shí)驗(yàn)課時(shí)偏少,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容基本以顯微鑒定實(shí)驗(yàn)為主。
中藥調(diào)劑員和中藥購銷員是中藥學(xué)相關(guān)專業(yè)學(xué)生日后就業(yè)比較常見的崗位。兩個(gè)崗位的職業(yè)能力要求中包括:常見的400種中藥飲片的識(shí)別；能運(yùn)用常見分析儀器對中藥進(jìn)行初步分析檢驗(yàn)。
由此可見,現(xiàn)行的教學(xué)模式與企業(yè)對就業(yè)人員的崗位要求是不相符合的。因此,以提高學(xué)生的就業(yè)適應(yīng)性為目標(biāo),對《中藥鑒定技術(shù)》的教學(xué)模式進(jìn)行探討,具有十分重要的意義。
1 《中藥鑒定技術(shù)》的教學(xué)現(xiàn)狀
1.1 理論課上缺少互動(dòng)性
目前,大部分醫(yī)藥院校在上《中藥鑒定技術(shù)》課時(shí),都是理論和實(shí)驗(yàn)分開教學(xué),理論課在先,實(shí)驗(yàn)課在后。在理論課上,老師用語言描述或用圖片來介紹藥材的性狀鑒別特點(diǎn),學(xué)生則是不停的做筆記,而不是通過口嘗,手摸,鼻嗅來學(xué)習(xí)藥材的鑒別要點(diǎn),這種“注入式”、缺少互動(dòng)性的教學(xué)模式是存在一些弊端。因?yàn)橹兴庤b定技術(shù)是一門形態(tài)學(xué)科,需要反復(fù)觀察,不斷實(shí)踐,加深印象,增強(qiáng)記憶,積累經(jīng)驗(yàn),才能真正掌握好中藥鑒定的知識(shí)與技能[1]。中藥鑒定技術(shù)的內(nèi)容繁雜,瑣碎,記憶點(diǎn)多,同一藥材存在一藥多源,同物異名,同名異物的情況；同一藥材有不同的規(guī)格、等級；由于歷史和經(jīng)濟(jì)的原因,同一藥材還存在多種混淆品。因此,如果僅僅用圖片來介紹,而沒有藥材來觀摩的話,就很難達(dá)到預(yù)期的教學(xué)效果。
1.2 實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)內(nèi)容單一,不適應(yīng)崗位需求
實(shí)驗(yàn)課的傳統(tǒng)內(nèi)容是以顯微鑒定為主。其中,顯微鑒定以“驗(yàn)證性”實(shí)驗(yàn)為主,課前老師準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料,課上講授實(shí)驗(yàn)方案和實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,然后學(xué)生按照要求去尋找藥材的粉末特征組織,最后畫藥材的顯微特征圖。這種單調(diào),“驗(yàn)證性”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)導(dǎo)致學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣淡漠,積極性不高。
根據(jù)中藥學(xué)專業(yè)學(xué)生今后就業(yè)的崗位要求可知,性狀鑒別是中藥鑒定工作者必備的基本功之一,理化鑒別也廣泛應(yīng)用于中藥鑒定的實(shí)際工作中,但是性狀鑒別和理化鑒別在實(shí)驗(yàn)課中開展的非常少,就使學(xué)生的專業(yè)知識(shí)結(jié)構(gòu)與實(shí)際的工作崗位要求之間,出現(xiàn)知識(shí)層次的斷檔。
1.3 實(shí)驗(yàn)材料選用不全面,缺乏完整藥材
性狀鑒別是中藥鑒定學(xué)最常用的方法之一,是鑒定任何藥材的關(guān)鍵步驟,學(xué)生只有多看、多比較、多學(xué)習(xí),才能更好地具備藥材的性狀鑒別能力。因此,實(shí)驗(yàn)課中所選用的材料就非常重要,應(yīng)選用不同產(chǎn)地,不同品種的完整藥材、不同規(guī)格的飲片以及相對應(yīng)的常見混淆品作為材料。然而,大部分實(shí)驗(yàn)室由于經(jīng)費(fèi),人力,物力等多方面的因素,只選用單一的飲片作為實(shí)驗(yàn)材料,導(dǎo)致很多學(xué)生只認(rèn)識(shí)飲片而不認(rèn)識(shí)原藥材,在學(xué)習(xí)過程中把原藥材和飲片割裂開。最終導(dǎo)致學(xué)生畢業(yè)后面對市場上不同規(guī)格,不同等級的藥材時(shí)常常不知所措,不能最大程度的發(fā)揮專業(yè)優(yōu)勢。
2 《中藥鑒定技術(shù)》的教學(xué)改革探討
2.1 重在實(shí)踐,實(shí)行理實(shí)一體化教學(xué)
中藥鑒定技術(shù)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的應(yīng)用學(xué)科,學(xué)習(xí)這門課的最終目的是要學(xué)生具備藥材的性狀鑒別能
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力,并且還能用常規(guī)的分析儀器來鑒別藥材的真?zhèn)巍?yōu)劣。我校從下學(xué)期開始將選用一個(gè)班級,30名學(xué)生試行理實(shí)一體化教學(xué),該教學(xué)方法是將《中藥鑒定技術(shù)》的理論教學(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)融于一體,教學(xué)場所直接安排在中藥鑒定實(shí)驗(yàn)室。在實(shí)踐中教理論,能很好地解決理論教學(xué)與實(shí)驗(yàn)教學(xué)脫節(jié)問題。
在課間,以4人為一組,將課堂上要講的藥材分組發(fā)給學(xué)生,課堂上老師邊教藥材的性狀鑒別,學(xué)生邊根據(jù)老師所講的鑒別要點(diǎn),通過眼觀、手摸、鼻嗅、口嘗等傳統(tǒng)方法,對藥材進(jìn)行觀摩。在學(xué)習(xí)過程中如有任何疑問,隨時(shí)都可以提問,老師教完后,學(xué)生也學(xué)會(huì)了怎樣鑒別藥材,所學(xué)的理論知識(shí)得到印證。下課后,以宿舍為單位,學(xué)生可以保留一份藥材,從而在課后還能繼續(xù)學(xué)習(xí)。下堂課開始前5分鐘,以宿舍為單位,讓學(xué)生根據(jù)手中的藥材,講述來源,性狀鑒別特點(diǎn),以鞏固學(xué)習(xí)效果。
2.2 重在能力,充分利用中藥標(biāo)本館資源
我校中藥標(biāo)本館藏標(biāo)本共500余種藥材,其中冬蟲夏草,鹿茸,燕窩等貴重藥材約50種。在《中藥鑒定技術(shù)》的教學(xué)過程中,安排(6～8課時(shí)）參觀中藥標(biāo)本館進(jìn)行學(xué)習(xí),尤其是要學(xué)習(xí)貴重藥材。由于實(shí)驗(yàn)材料是消耗品,大多數(shù)院校從降低實(shí)驗(yàn)成本考慮,大部分貴重藥材就不會(huì)作為學(xué)生實(shí)驗(yàn)材料。但在實(shí)際工作中,很多不法商人為牟取暴利,常用偽品或混淆品來代替正品貴重藥材。通過參觀標(biāo)本館,樹立學(xué)生對混,偽品的警惕意識(shí),既不會(huì)增加實(shí)驗(yàn)成本又可以充分利用現(xiàn)有資源,提高鑒別能力。
同時(shí),隨著數(shù)字化的快速發(fā)展,我校中藥標(biāo)本館已將館藏標(biāo)本以文字、圖像等數(shù)字化的形式存儲(chǔ),建立了中藥學(xué)習(xí)系統(tǒng),并由專任老師定期進(jìn)行維護(hù),充實(shí)。中藥學(xué)習(xí)系統(tǒng)中的每味藥都是圖文并茂,記載全面,包括中藥的四大鑒別方法,功能主治,用法用量,近年來的臨床報(bào)道等等。學(xué)生在中藥標(biāo)本館看標(biāo)本的同時(shí)還可以根據(jù)自己的需求,通過館內(nèi)配備的電腦隨時(shí)查閱相關(guān)信息,從而能夠全面又系統(tǒng)的掌握。在課外,由于中藥學(xué)習(xí)系統(tǒng)的建立,打破了地域和時(shí)間的界限,學(xué)生可隨時(shí)隨地通過網(wǎng)站進(jìn)行學(xué)習(xí),提高學(xué)習(xí)的自主性,可真正實(shí)現(xiàn)中藥資源的全面共享。
2.3 重在拓展,深入藥材市場進(jìn)行現(xiàn)場學(xué)習(xí)
藥材市場是進(jìn)行藥材交易的場所,市場里所含的藥材品種繁多,規(guī)格齊全,可彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)課上教學(xué)品種的不足。此外,市場里交易的藥材良莠不齊,真?zhèn)位煜?需要用專業(yè)的眼光去鑒別,因此,是學(xué)生學(xué)習(xí)的最佳場所。學(xué)校可安排兩周左右的時(shí)間,讓學(xué)生去當(dāng)?shù)氐乃幉氖袌鲞M(jìn)行現(xiàn)場學(xué)習(xí),要求學(xué)生每天至少學(xué)習(xí)8味藥,掌握藥材的性狀鑒別要點(diǎn),熟悉藥材的商品規(guī)格及劃分依據(jù),熟悉常見混淆品的鑒別要點(diǎn),了解市場價(jià)格,了解日成交量。每天的作業(yè)是以實(shí)驗(yàn)報(bào)告的形式把在市場上所學(xué)的知識(shí),按照藥材的性狀鑒別要點(diǎn)、商品規(guī)格、市場價(jià)格以及相應(yīng)混淆品的鑒別要點(diǎn),分門別類的記載下來。通過零距離的接觸市場,通過用專業(yè)的知識(shí)來解決實(shí)際問題,從而提高學(xué)習(xí)的積極性。
2.4 重在應(yīng)用,增加理化鑒定的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
理化鑒別是利用某些物理的,化學(xué)的或儀器分析方法,鑒定中藥的真實(shí)性、純度和品質(zhì)優(yōu)劣程度的一種鑒定方法。理化鑒別的方法很多,要全部掌握也是有困難的。《中國藥典》是國家藥品標(biāo)準(zhǔn),是從事鑒定工作的基本依據(jù)。筆者認(rèn)為參照《中國藥典》的標(biāo)準(zhǔn),掌握最常用的理化鑒別方法:薄層色譜、紫外色譜及高校液相色譜,熟悉這些鑒別方法的原理及操作步驟,這對于今后從事鑒定工作會(huì)有一定的幫助。在實(shí)驗(yàn)課的授課過程中可根據(jù)《中國藥典》的標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行鑒定程序的講解與演示,從藥材的取樣開始,然后根據(jù)不同樣品及檢測要求,選擇不同的方法進(jìn)行鑒定,最后對藥材的真實(shí)性、純度、質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)和鑒定。通過模擬情景,使學(xué)生認(rèn)識(shí)到鑒定工作的嚴(yán)謹(jǐn)性,必須按照嚴(yán)格的程序和步驟進(jìn)行。
2.5 重在創(chuàng)新,中藥鑒定的新技術(shù),新方法
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隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展,dna分子標(biāo)記技術(shù)也逐漸應(yīng)用于藥材的真?zhèn)舞b別。2010版《中國藥典》第一部中烏梢蛇[2]和蘄蛇[3]都新增了用pcr技術(shù)來鑒別藥材的真?zhèn)巍na分子作為遺傳信息的直接載體,直接分析生物的基因型而非表現(xiàn)型,其鑒別結(jié)果不受觀察者的主觀性,藥材的環(huán)境因素,樣品形態(tài)(原品,粉末或片狀)和材料來源的影響。因此,對于一些用傳統(tǒng)方法難鑒別,對觀察者經(jīng)驗(yàn)要求高的藥材,用分子生物學(xué)遺傳標(biāo)記法來鑒別,其結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。
2.6 改革考核評價(jià)方式
《中藥鑒定技術(shù)》課程傳統(tǒng)的考評方式主要包括平時(shí)考核(出勤、課堂表現(xiàn)、作業(yè)、實(shí)驗(yàn)情況）占總成績的30%,期末考試(理論考試）占總成績的70%。這種考核方式,使學(xué)生偏重于應(yīng)付理論考試,考前死記硬背性狀鑒別特點(diǎn),考完后不能理論聯(lián)系實(shí)際。
新型的考核機(jī)制根據(jù)工作崗位對知識(shí)、能力的要求,形成兩步考核法,即綜合實(shí)踐能力考核+基礎(chǔ)知識(shí)考核。綜合實(shí)踐能力考核主要包括性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和綜合分析這四個(gè)方面的內(nèi)容。基礎(chǔ)知識(shí)考核以筆試為主,結(jié)合平時(shí)成績。兩種考核分別以100分記入學(xué)生的學(xué)習(xí)成績。在綜合實(shí)踐能力考核中,如考核學(xué)生的性狀鑒別能力,可從常用藥材及常見偽品中隨機(jī)抽取60種藥材作為考試內(nèi)容,讓學(xué)生在1h內(nèi)完成辨認(rèn)。如考察學(xué)生的顯微鑒別能力,分別以3～4種混合成一包未知混合粉末,分發(fā)給學(xué)生,讓其通過顯微鑒定,鑒定出分別為何種藥材,并繪出每味藥材的主要粉末特征圖或以文字描述其主要鑒別特征。如考核學(xué)生的綜合分析能力,可通過模擬實(shí)際工作情景,選取相關(guān)的藥材,讓學(xué)生根據(jù)2010版《中國藥典》(一部）的檢測程序來鑒別這個(gè)藥材的真?zhèn)?優(yōu)劣。通過以上全方位,多層次的考核,不僅對學(xué)生的評價(jià)更為客觀,同時(shí),通過此類考核機(jī)制使教學(xué)更貼近企業(yè)和社會(huì)的需求。
關(guān)鍵詞：研究性學(xué)習(xí)；信息技術(shù)課程；應(yīng)用研究
一、研究性學(xué)習(xí)的含義
研究性學(xué)習(xí)既是一門獨(dú)立開設(shè)的課程，又是一種能夠滲透于其他學(xué)科課程的學(xué)習(xí)方式。研究性學(xué)習(xí)以轉(zhuǎn)變學(xué)生的學(xué)習(xí)方式為目的，強(qiáng)調(diào)一種主動(dòng)探究和創(chuàng)新實(shí)踐的精神，著眼于培養(yǎng)學(xué)生終身受用的學(xué)習(xí)方式。
二、研究性學(xué)習(xí)在中學(xué)信息技術(shù)課程中的應(yīng)用研究
1.研究性學(xué)習(xí)在中學(xué)信息技術(shù)課程中的課題選擇
（1）課題及其類別
中學(xué)信息技術(shù)的研究性學(xué)習(xí)課題大致有以下四類：
知識(shí)探究類：這是研究課題中的最低層次。學(xué)生在教師的指導(dǎo)下查閱文獻(xiàn)，搜集資料，體驗(yàn)探究的具體行動(dòng)，最終形成報(bào)告總結(jié)。
學(xué)術(shù)研究類：學(xué)生在課題教學(xué)的過程中，對某一個(gè)知識(shí)點(diǎn)或者某一小節(jié)感興趣，便可以在教師的指導(dǎo)下選擇研究題目，最后寫出研究論文。
社會(huì)調(diào)查類：除了在課堂上進(jìn)行研究性學(xué)習(xí)之外，還可以將研究性學(xué)習(xí)融入社會(huì)，對社會(huì)生活中的某些現(xiàn)象進(jìn)行調(diào)查，分析總結(jié)，然后撰寫調(diào)查報(bào)告。
創(chuàng)造發(fā)明類：在進(jìn)行研究性學(xué)習(xí)活動(dòng)中，最深層次的目標(biāo)便是創(chuàng)造發(fā)明，這也正是新課程教育改革要求學(xué)生應(yīng)該具有的創(chuàng)新能力。
（2）問題的由來
研究性學(xué)習(xí)的選題多數(shù)選取于生活實(shí)踐、報(bào)紙雜志論文、熱門話題、教參提供的課題。
（3）如何選題
學(xué)生在研究性學(xué)習(xí)活動(dòng)的過程中，擁有獨(dú)立自，選題時(shí)也不例外。學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，根據(jù)自身的特長和愛好選擇合適的研究題目。
2.研究性學(xué)習(xí)在中學(xué)信息技術(shù)課程中的實(shí)施過程
研究性學(xué)習(xí)基本上分為三個(gè)階段：進(jìn)入問題情境階段、完成體驗(yàn)階段、表達(dá)交流和反饋階段。在研究性學(xué)習(xí)實(shí)踐過程中，這三個(gè)階段是相互交叉、相互推進(jìn)的。
（1）進(jìn)入問題情境階段
這個(gè)階段是教師帶領(lǐng)學(xué)生參觀訪問，或者組織一些團(tuán)體活動(dòng)，創(chuàng)設(shè)一定的問題情境。
（2）完成體驗(yàn)階段
本階段中實(shí)踐、體驗(yàn)的內(nèi)容包括：搜集和分析信息資料，學(xué)生應(yīng)了解如何有效獲取所需要的信息資料，要學(xué)會(huì)判斷信息資料的真?zhèn)巍?yōu)劣，識(shí)別資料的價(jià)值，最后綜合整理信息進(jìn)行判斷，得出相應(yīng)的結(jié)論。
（3）表達(dá)交流和反饋階段
在這一階段，學(xué)生要將取得的收獲進(jìn)行歸納整理、總結(jié)提煉，形成書面材料或口頭報(bào)告材料。通過各種方式展示成果，從中反饋出有效信息。
3.研究性學(xué)習(xí)在中學(xué)信息技術(shù)課程中的案例設(shè)計(jì)
在中學(xué)信息技術(shù)的課程教學(xué)中，課題研究屬于一般的課題研究，是指學(xué)生在教師指導(dǎo)下，為了拓展學(xué)習(xí)范圍，自主探索某一方面知識(shí)，獲得學(xué)習(xí)體驗(yàn)后將其內(nèi)容轉(zhuǎn)化為研究課題的形式進(jìn)行主動(dòng)的探究，最后形成學(xué)習(xí)報(bào)告。以廣東教育出版社出版的信息技術(shù)基礎(chǔ)（必修）教材中《2.3信息的鑒別與評價(jià)》一節(jié)為例。
（1）創(chuàng)設(shè)問題情境
李某上網(wǎng)時(shí)無意間進(jìn)入一個(gè)國外網(wǎng)站，該網(wǎng)站介紹說，如果接受它發(fā)過來帶有廣告內(nèi)容的電子郵件，上網(wǎng)就能免費(fèi)，于是就在網(wǎng)站留下自己的姓名、地址、郵箱等資料。兩天后他收到一封來自國外的航空信件，說他中了26萬元現(xiàn)金大獎(jiǎng)，但需電匯250元手續(xù)費(fèi)，且兩天就能將現(xiàn)金送到。李某將信將疑，到銀行咨詢。銀行職員告知他，最近到銀行辦理這種匯款的人特別多，懷疑這有可能是國際詐騙，目的就是騙取一定數(shù)量的手續(xù)費(fèi)。于是，李某報(bào)了警，公安局通過跟蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)所有把錢匯出去的網(wǎng)民，均沒有獲得相應(yīng)大獎(jiǎng)。
（2）任務(wù)活動(dòng)
在信息時(shí)代，各種信息目不暇接，撲朔迷離。今天，同學(xué)們的任務(wù)就是幫助自己和老師鑒別評價(jià)信息。通過一些日常生活中的例子分析如何鑒別和評價(jià)信息，并且最終形成一份報(bào)告向老師和同學(xué)介紹你所了解的方法。以小組為單位進(jìn)行研究性學(xué)習(xí)。
（3）活動(dòng)過程
分組：5人為一組，自由組合，選出組長并確定相應(yīng)任務(wù)。
階段一：收集并閱讀關(guān)于信息的鑒別與評價(jià)的相關(guān)知識(shí)。收集資料是第一步，就是多問幾個(gè)為什么。了解相關(guān)知識(shí)，完成最終的報(bào)告需要大量查詢相關(guān)資料。
研究指南：①課題背景中出現(xiàn)哪些問題？②為什么會(huì)出現(xiàn)大量信息的泛濫？有沒有什么措施可以改善信息泛濫的窘境？③“信息污染”與“環(huán)境污染”有何不同？為了防止信息污染，我們可以做些什么？④信息犯罪的構(gòu)成有哪些渠道？生活中是否遇到過他人利用竊取信息犯罪的情況？如果有，你是如何處理的？
階段二：實(shí)施課題研究。在這個(gè)階段，學(xué)生需要付諸行動(dòng)，按照之前準(zhǔn)備的案例進(jìn)行分析，以文字、圖片等形式保存信息，并按照一定的邏輯將這些分析結(jié)果串聯(lián)起來，最后小組選出一個(gè)比較擅長做PPT或Word的同學(xué)將所有信息制作成一份報(bào)告，用事實(shí)來證明自己能夠?qū)⒘私獾降蔫b別與評價(jià)方法展示給同學(xué)和老師。
階段三：展示、評價(jià)。參照評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對學(xué)習(xí)成果進(jìn)行展示和評價(jià)，并以此對學(xué)生進(jìn)行督促。
本文所述的設(shè)計(jì)已經(jīng)在教學(xué)實(shí)踐中加以運(yùn)用，并已取得較好的教學(xué)效果，有效地提高了課堂的教學(xué)效率，激發(fā)了學(xué)生對信息技術(shù)的學(xué)習(xí)興趣。
關(guān)鍵詞：胰腺癌；超聲造影；低增強(qiáng)
胰腺的血供非常豐富，各動(dòng)脈間眾多的吻合構(gòu)成立體的血管供應(yīng)網(wǎng)，超聲造影可顯示胰腺以及腫瘤的微血管，對病灶的定性診斷較普通超聲更具價(jià)值。本文主要觀察胰腺癌超聲造影灌注特點(diǎn)，評價(jià)超聲造影對胰腺癌診斷價(jià)值，并與增強(qiáng)CT對比分析。
1臨床資料
對2010年10月～2012年5月擬于我院手術(shù)的胰腺局灶性占位患者行超聲造影檢查，所用超聲診斷儀為LogiQ-9（GE），探頭頻率2～4MHz，機(jī)械指數(shù)
2結(jié)果
本研究共統(tǒng)計(jì)病例28例，均病理診斷胰腺癌，其中胰頭癌16例，胰尾癌9例，胰體癌3例，年齡38～80歲，平均（56.2±5.1）歲，病灶大小1.9～7.3cm，平均（3.9±2.03）cm。22例表現(xiàn)為動(dòng)脈相、靜脈相不均勻低增強(qiáng)，其中與正常胰腺組織同進(jìn)同退2例，晚進(jìn)早退18例，同進(jìn)晚退2例；2例動(dòng)脈相表現(xiàn)為明顯不均勻高增強(qiáng)，靜脈相低增強(qiáng)，均表現(xiàn)為晚進(jìn)早退。4例表現(xiàn)為動(dòng)脈相等增強(qiáng)，靜脈相低增強(qiáng)，同進(jìn)早退。28例中5例病灶內(nèi)見不規(guī)則無增強(qiáng)區(qū)。增強(qiáng)時(shí)間（達(dá)峰時(shí)間-始增時(shí)間）統(tǒng)計(jì)：病灶增強(qiáng)時(shí)間短于正常胰腺組織增強(qiáng)時(shí)間，以動(dòng)脈相低增強(qiáng)作為診斷胰腺腺癌的標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)確性為78.6%。
3結(jié)論
胰腺癌多表現(xiàn)為局限性腫塊，與胰腺其它局限性腫塊二維超聲圖像表現(xiàn)相似，很難鑒別，其治療手段及預(yù)后卻截然不同，所以準(zhǔn)確的診斷顯得尤為重要。CEUS能夠敏感地評估病灶內(nèi)血供情況，并以此分析和鑒別病灶的性質(zhì)。胰腺的血供非常豐富，各動(dòng)脈間眾多的吻合構(gòu)成立體的血管供應(yīng)網(wǎng)，超聲造影可顯示胰腺以及腫瘤的微血管。而新型超聲造影劑Sonove作為一種真正的血池示蹤劑，不會(huì)擴(kuò)散到組織內(nèi)，可以清晰的顯示組織器官微循環(huán)的灌注情況，對病灶的診斷和鑒別診斷方面提供了重要依據(jù)[1]。本研究應(yīng)用新型超聲造影劑SonoVue對28例胰腺癌患者進(jìn)行超聲造影檢查，觀察其病灶增強(qiáng)特點(diǎn)及時(shí)間強(qiáng)度參數(shù)，并與增強(qiáng)CT進(jìn)行對比分析，評價(jià)其應(yīng)用價(jià)值。
3.1胰腺癌超聲造影特點(diǎn) 本組28例胰腺癌病灶，動(dòng)脈相、靜脈相均呈不均勻低增強(qiáng)22例，動(dòng)脈相等增強(qiáng)、靜脈相低增強(qiáng)4例（圖2，圖3）。動(dòng)脈相不均勻高增強(qiáng)2例，且均表現(xiàn)為晚進(jìn)早退。病灶內(nèi)見不規(guī)則無增強(qiáng)區(qū)共5例（圖1）。歸納其共有特征為惡性腫瘤表現(xiàn)增強(qiáng)不均，大部分動(dòng)脈相低增強(qiáng)及增強(qiáng)時(shí)間短于胰腺實(shí)質(zhì)，部分病例內(nèi)見不規(guī)則無增強(qiáng)區(qū)。惡性病灶峰值強(qiáng)度低于正常胰腺組織，增強(qiáng)時(shí)間統(tǒng)計(jì)：惡性病灶短于正常胰腺組織。以動(dòng)脈相低增強(qiáng)作為診斷胰腺腺癌的標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)確性為78.6%。
腫瘤的造影增強(qiáng)特征與其生物學(xué)行為相關(guān)，胰腺腺癌為低血供腫瘤，同時(shí)正常胰腺組織有豐富的血運(yùn)供應(yīng)，病灶造影表現(xiàn)出較正常胰腺組織低增強(qiáng)，Rickes[2]等的研究中也得出結(jié)論：胰腺導(dǎo)管腺癌呈低增強(qiáng)，病灶周邊可見腫瘤供血血管。同時(shí)由于腫瘤血管扭曲、結(jié)構(gòu)異常以及惡性腫瘤侵襲造成血管瘺等，致使隨血液進(jìn)入腫瘤內(nèi)的造影劑分布不均、程度不同[3]。胰腺惡性腫瘤多呈不規(guī)則狀生長，與周圍組織界限不清，腫瘤滋養(yǎng)血管常位于腫瘤周邊，距血管近的腫瘤細(xì)胞生長活躍[4]，造影后呈增強(qiáng)表現(xiàn)，遠(yuǎn)離血管的腫瘤細(xì)胞容易退化和壞死，表現(xiàn)為不增強(qiáng)或弱增強(qiáng)。腫瘤內(nèi)壞死、陳舊性出血、囊性變多表現(xiàn)為不規(guī)則無增強(qiáng)區(qū)。胰腺惡性腫瘤細(xì)胞釋放血管內(nèi)皮生長因子，促發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞增生，刺激誘發(fā)新生毛細(xì)血管；腫瘤中有的血管為被腫瘤組織侵犯的殘留血管，血管結(jié)構(gòu)紊亂或易形成動(dòng)靜脈短路，可能是造成腫瘤內(nèi)造影劑渡越時(shí)間明顯短于腫瘤外相對正常胰腺實(shí)質(zhì)的原因[5]。
3.2超聲造影與增強(qiáng)CT的對比分析 常規(guī)超聲檢查是一種安全方便無創(chuàng)的影像學(xué)檢查方法，同時(shí)因其無輻射性，較CT、MRI經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)，而成為臨床胰腺腫瘤篩查的首選工具，特對已發(fā)生血管侵犯、肝轉(zhuǎn)移的病例診斷正確率高，對于邊界不清或形態(tài)規(guī)則的病灶以及無明確周圍血管脂肪侵犯、肝轉(zhuǎn)移或腫大淋巴結(jié)的胰腺病灶，常規(guī)超聲的定性診斷較為困難。本研究CEUS診斷的正確率為78.6%，較常規(guī)超聲有明顯提高[6-8]。CEUS能夠敏感地評估病灶內(nèi)血供情況，并以此分析和鑒別病灶的性質(zhì)。超聲造影可較好的反映病變的微循環(huán)情況，在胰腺局造性病變鑒別診斷方面較常規(guī)超聲提供更多的信息，診斷率與增強(qiáng)CT相似，有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。
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2.2.1.3完成自我學(xué)習(xí)評價(jià)軟件-中藥鑒定學(xué)在線考試系統(tǒng)，所有考試題型全部由系統(tǒng)自動(dòng)判分，可以設(shè)定是否要進(jìn)行試題答案解析和分?jǐn)?shù)顯示，考生是否可以查看自己試卷的權(quán)限。用于及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題、獲取反饋信息。系統(tǒng)的遠(yuǎn)程管理功能非常強(qiáng)大，提供了分類查詢、分類打印、分類刪除、分類試卷查看等功能。
2.2.2《中藥鑒定學(xué)》數(shù)字化教學(xué)方式的構(gòu)建
筆者利用數(shù)字化平臺(tái)和數(shù)字化資源，在教師與學(xué)生之間開展合作學(xué)習(xí)、協(xié)商討論，并通過對教學(xué)資源的收集、探究知識(shí)、發(fā)現(xiàn)知識(shí)、創(chuàng)造知識(shí)以及展示知識(shí)的方式進(jìn)行學(xué)習(xí)，具有資源利用、自主發(fā)現(xiàn)、協(xié)商合作和實(shí)踐創(chuàng)造幾種途徑[11-12]。《中藥鑒定學(xué)》數(shù)字化教學(xué)流程見圖1。
力求在教與學(xué)數(shù)字化環(huán)境的建設(shè)、信息技術(shù)與學(xué)科整合、教師課程重建、課程開發(fā)、教學(xué)過程重建能力、教師信息素養(yǎng)的提高與教師專業(yè)化發(fā)展等方面的理論和應(yīng)用上求得突破。
教學(xué)素材庫包括了電子教學(xué)大綱、電子教材、授課教案、網(wǎng)絡(luò)多媒體課件、授課錄相、作業(yè)習(xí)題、網(wǎng)上測試系統(tǒng)、常見中藥材飲片圖庫、偽品藥材圖庫等，筆者已經(jīng)完成了電子教學(xué)大綱、電子教材、部分授課錄像、大部分網(wǎng)絡(luò)多媒體課件、授課教案、作業(yè)習(xí)題等內(nèi)容，正在完善常見中藥材飲片圖庫、偽品藥材圖庫。筆者與廣東力拓網(wǎng)絡(luò)科技有限公司合作開發(fā)，正進(jìn)行虛擬實(shí)驗(yàn)情境的設(shè)立，計(jì)劃完成顯微測量、中藥材常規(guī)檢查、120種重點(diǎn)藥材的性狀鑒別、40種中藥材橫切面組織與粉末的顯微鑒別、2種未知藥材混合粉末的鑒別等內(nèi)容。
測評系統(tǒng)已經(jīng)完成題庫建設(shè)，初步完成自我學(xué)習(xí)評價(jià)軟件――中藥鑒定學(xué)在線考試系統(tǒng)。擬將系統(tǒng)測評結(jié)果與學(xué)生在課堂上的自我評價(jià)相結(jié)合，作為考查學(xué)生掌握知識(shí)程度的最終評價(jià)。評價(jià)部分占最終課程期末成績的比例為20%～30%。
以中藥鑒定學(xué)精品課程網(wǎng)站為平臺(tái)載體，綜合教學(xué)素材庫、虛擬實(shí)驗(yàn)情境、測評系統(tǒng)、討論交流工具，創(chuàng)立藥材鑒別的教學(xué)與實(shí)踐相結(jié)合的情境，教師指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行思考、實(shí)踐，完成每種藥材鑒別知識(shí)框架的構(gòu)建。根據(jù)個(gè)體的差異性，學(xué)生可以提出不同的問題和異議，反饋給教師；教師再根據(jù)學(xué)習(xí)個(gè)體的不同，可以逐個(gè)地進(jìn)行不同層次的引導(dǎo)和啟發(fā)，也可以通過網(wǎng)絡(luò)共享的形式，建立公共分享系統(tǒng)，如微信群，讓學(xué)生可以在這種學(xué)習(xí)氛圍下，發(fā)表自己的見解。這種信息教學(xué)模式，為學(xué)生和教師營造了一個(gè)“輕松-開放-趣味性強(qiáng)”的新型教學(xué)氛圍，使這種信息教學(xué)模式進(jìn)入一個(gè)良性的循環(huán)體，創(chuàng)建一個(gè)完整的創(chuàng)新教學(xué)模式[13-14]。
2.2.2《中藥鑒定學(xué)》數(shù)字化教學(xué)效果的評價(jià)
在整個(gè)教學(xué)過程中，安排3次專題探究：中藥鑒定學(xué)的歷史與發(fā)展、藥材的經(jīng)驗(yàn)鑒別、藥材市場調(diào)查。利用湖南邵東廉橋中藥材專業(yè)市場和長沙高橋藥材大市場見習(xí)環(huán)節(jié)，或其他社會(huì)資源，對學(xué)生進(jìn)行課外分組，以報(bào)告或課程論文的方式完成，指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行自我評價(jià)和互相評價(jià)，完善中藥鑒定學(xué)知識(shí)體系。
最終建立以“情境探究學(xué)習(xí)”模式為主，“藥材市場―專題探究―合作交流學(xué)習(xí)”模式為輔的中藥鑒定學(xué)數(shù)字化創(chuàng)新性教學(xué)模式，達(dá)到能使學(xué)生熟練掌握中藥材真?zhèn)舞b別理論與實(shí)踐知識(shí)的學(xué)習(xí)目標(biāo)。
3小結(jié)
在網(wǎng)絡(luò)數(shù)字化的學(xué)環(huán)境下，教學(xué)模式必須不斷更新，使教學(xué)數(shù)字化、學(xué)習(xí)自主化、作業(yè)協(xié)同化，把培養(yǎng)學(xué)生學(xué)會(huì)學(xué)習(xí)、培養(yǎng)學(xué)生具有終身學(xué)習(xí)的態(tài)度和能力作為教學(xué)的培養(yǎng)目標(biāo)。促進(jìn)主動(dòng)式-協(xié)作式-研究型的學(xué)習(xí)，從而形成開放高效的教學(xué)新模式，更好地培養(yǎng)大學(xué)生創(chuàng)新與實(shí)踐能力。縱觀國際上先進(jìn)的教學(xué)模式，都已經(jīng)通過數(shù)字化的信息處理技術(shù)，為學(xué)習(xí)者創(chuàng)造了一個(gè)富饒的學(xué)習(xí)寶庫。這種教學(xué)模式，無疑是教會(huì)學(xué)生如何運(yùn)用數(shù)字化的信息技術(shù)成果，為自己終身的學(xué)習(xí)建立起一個(gè)知識(shí)資源寶庫。對于學(xué)生來說，擁有了主動(dòng)學(xué)習(xí)的能力，才是真正學(xué)習(xí)的開始。
本研究完成后，對中藥及其相關(guān)專業(yè)學(xué)生的學(xué)習(xí)觀念和學(xué)習(xí)方式將產(chǎn)生巨大的影響，拓展《中藥鑒定學(xué)》教學(xué)的時(shí)空界限，能大大提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣、效率和主觀能動(dòng)性；使教育資源共享的原則得以貫徹，學(xué)習(xí)選擇的自由度大大提高，因需學(xué)習(xí)、因材施教真正成為可能，從而提高中藥專業(yè)的教育資源質(zhì)量，促進(jìn)優(yōu)秀教育資源共享。不僅在校學(xué)生能受益，而且社會(huì)上的中藥從業(yè)人員也能受益，對中藥工作者的繼續(xù)教育將發(fā)揮重大作用。同時(shí)，能夠在社會(huì)上普及中藥鑒別的科學(xué)知識(shí)，為人民群眾的醫(yī)療保健作出積極貢獻(xiàn)[15-16]。
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目前,交通事故傷害已排名為全球十大傷害的前列,道路交通事故死亡人數(shù)在各類事故死亡總數(shù)中約占3/4的比例,且有不斷上升的趨勢,為此,確定和查明道路交通事故多發(fā)點(diǎn)和安全隱患點(diǎn),并開展安全改造,是預(yù)防和減少交通事故的根本手段之一。由于投資的限制,公路管理部門需要快速、準(zhǔn)確確定急需要安全改造的路段,以分清輕重緩急,發(fā)揮有限資金的最大經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。現(xiàn)階段國內(nèi)對于事故黑點(diǎn)鑒別、路段安全性評價(jià)的研究,要么過分依賴交通事故資料,要么相關(guān)方法復(fù)雜、所需基礎(chǔ)數(shù)據(jù)較多。受我國交通管理體制現(xiàn)況制約,這些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和資料往往分別被公路管理部門、設(shè)計(jì)單位和交警等部門掌握,安全改造實(shí)施路段鑒別所需的數(shù)據(jù)資料的采集成本相對較高,給基層公路管理部門的公路安全改造工作帶來諸多不便。因此,從公路管理部門自身工作條件和需要出發(fā),提出以公路管理部門易獲得的路政交通事故資料、少量實(shí)驗(yàn)觀測資料為主的兩階段公路安全改造路段鑒別方法。
1現(xiàn)有事故黑點(diǎn)(段)鑒別方法對比分析
現(xiàn)有交通事故黑點(diǎn)的確定方法主要包括:事故數(shù)法、事故率法、當(dāng)量事故率法、事故數(shù)質(zhì)量控制法,以及綜合考慮道路交通中的各種危險(xiǎn)因素的交通事故黑點(diǎn)鑒別方法,如安全系數(shù)法、綜合評價(jià)法等。(1)常見的交通事故黑點(diǎn)確定方法。此類方法主要基于概率統(tǒng)計(jì)思想,主要利用歷史道路交通事故方面的資料加以分析,如果分析所得的指標(biāo)結(jié)果顯著高于本地路網(wǎng)、路段、或者某一規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值,則將該路段點(diǎn)作為事故多發(fā)的危險(xiǎn)點(diǎn)加以初步確定。此類方法在獲得交通事故數(shù)據(jù)的前提下較簡單、易用。但在實(shí)施安全改善工程中我們發(fā)現(xiàn),由于我國交通管理體制的局限性,獲取完整的交通事故資料并非易事,且在道路交通系統(tǒng)中,誘發(fā)交通事故的因素是復(fù)雜的、多方面的,僅用道路交通事故數(shù)據(jù)衡量道路的安全性具有一定的局限性。(2)安全系數(shù)法。核心是用相鄰路段的速度變化來評價(jià)特定地點(diǎn)的危險(xiǎn)性,如果與相鄰路段的速度比值小于標(biāo)準(zhǔn)值則認(rèn)為是危險(xiǎn)路段。安全系數(shù)法降低了對有關(guān)道路條件方面數(shù)據(jù)的依賴性,很好的從行車速度方面選取了事故黑點(diǎn)路段,但沒有考慮其他通常導(dǎo)致事故的因素對行車安全的影響,且在事故多發(fā)段成因分析及改善策略制訂階段,仍然需要大量的有關(guān)道路條件、交通狀況、駕駛特征方面的數(shù)據(jù),故安全系數(shù)法通常應(yīng)與事故系數(shù)法等方法配合使用才有較好效果。(3)綜合指標(biāo)評價(jià)法。基本原理在于考慮到交通事故的發(fā)生是多方面不安全因素綜合作用的結(jié)果,因此有必要對特定路段、路網(wǎng)的交通要素的安全因子選擇合適的表征指標(biāo),進(jìn)行綜合評價(jià),得出該路段(點(diǎn))的不安全評價(jià)指標(biāo)值,再將該值與標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較排序,由此確定道路交通事故黑點(diǎn)。按照所應(yīng)用計(jì)算模型的不同,目前比較典型的有AHP模型、模糊數(shù)學(xué)模型和粗集理論等。綜上所述可見,各種鑒別方法都有一定的適用條件限制。各種鑒別方法雖然都能從不同的角度出發(fā)來鑒別事故多發(fā)點(diǎn)段,但在實(shí)際應(yīng)用時(shí)容易將一些條件(如道路條件、線形或交通量等)忽略,且采用的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)對于公路管理部門來說有很大的搜集困難,而如果數(shù)據(jù)采集不全或者數(shù)量不夠,又將使鑒別結(jié)果的準(zhǔn)確性下降。
2兩階段安全改造路段鑒別方法----第一階段
2.1指標(biāo)選取目前,我國的公路交通由多家管理的體制現(xiàn)狀,必然會(huì)導(dǎo)致一定程度上各自為政的局面。道路安全改造問題,尤其是全面、詳細(xì)的獲取公路基礎(chǔ)資料、事故資料往往由于各部門之間的利益及管理上的問題,存在一定的困難。故本文在選取指標(biāo)時(shí)主要采用駕駛員心生理變化及速度差,交通事故資料僅作為參照指標(biāo)。
2.2評價(jià)指標(biāo)(1)當(dāng)量事故數(shù)。交通事故的損失可分為經(jīng)濟(jì)損失和人員傷亡。設(shè)當(dāng)?shù)亟煌ㄊ鹿蕚⑼鋈藛T的平均賠償金額為（公式略）(2)駕駛員心率、血壓變化。道路條件除了直接引發(fā)交通事故和通過對車輛的影響致使車輛發(fā)生故障而肇事外,更多的是通過向駕駛員傳遞道路環(huán)境信息的方式間接地誘發(fā)交通事故。在試驗(yàn)車上安裝八導(dǎo)生物測試儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,駕駛員的心率、血壓變化隨著道路條件的不同變化較為明顯,行駛在危險(xiǎn)路段時(shí),駕駛員的心率、血壓增長率幅度較大,行駛在較安全的路段駕駛員的心率、血壓增長率較小。(3)運(yùn)行速度差。在試驗(yàn)車上安裝GPS等速度測量儀器,測量車輛動(dòng)態(tài)車速,從而可計(jì)算出路段之間的車輛運(yùn)行速度差,速度差越大,路段安全性越差。
2.3安全改造路段初步篩選流程初步篩選安全隱患路段及事故黑點(diǎn)(段)的流程,（圖略）(1)如果路段的當(dāng)量事故數(shù)累計(jì)頻率小于或等于15%,則直接篩選為初步黑點(diǎn)(段)。(2)如果路段的當(dāng)量事故數(shù)累計(jì)頻率大于15%,則進(jìn)入心生理負(fù)荷及運(yùn)行速度差的檢驗(yàn),如果行車過程中駕駛員心率、血壓等指標(biāo)出現(xiàn)突變點(diǎn)(增幅大于20%)或路段間的車輛運(yùn)行速度差超過20km/h,則篩選為初步安全隱患路段。
3兩階段安全改造路段鑒別方法
第二階段在道路交通系統(tǒng)中,交通行為與交通安全狀況有密切的關(guān)系,是人、車、路、環(huán)境四個(gè)方面的因素綜合作用的結(jié)果,交通行為的突變會(huì)引起交通事故的發(fā)生,而交通行為在直觀上只體現(xiàn)為兩個(gè)變量,即車輛的行駛速度和行車軌跡。因此在第二階段,針對初步篩選路段,選取運(yùn)行速度與軌跡偏移作為評價(jià)指標(biāo),并建立相應(yīng)的鑒別模型。
3.1評價(jià)指標(biāo)(1)車輛行車軌跡。車輛行車軌跡為車輛進(jìn)入彎道路段后車輛左前角經(jīng)過的路徑,實(shí)驗(yàn)中所測的車輛軌跡點(diǎn)到外側(cè)邊緣線距離主要指車輛左前輪碾壓沙帶留下軌跡的最左側(cè)距離內(nèi)側(cè)邊緣線的距離。路段測量點(diǎn)布設(shè)（圖略）(2)車輛運(yùn)行速度。采用攝像法對彎道路段關(guān)鍵斷面的運(yùn)行速度進(jìn)行測量,測量斷面與軌跡測量相同,各斷面間的最大運(yùn)行速度差,記為Δν。
3.2運(yùn)行速度-行駛軌跡鑒別模型標(biāo)定通過對多個(gè)路段進(jìn)行調(diào)查與實(shí)驗(yàn),部分行車軌跡及運(yùn)行速度差數(shù)據(jù)（表略）即,當(dāng)0<Δν<10,0<h<0•4時(shí),屬于危險(xiǎn)程度較低路段,危險(xiǎn)等級定為四級;當(dāng)0<Δν<10,h≥0•4時(shí),屬于一般危險(xiǎn)路段,危險(xiǎn)等級定為三級;當(dāng)Δν≥10,0<h<0•4時(shí),屬于較危險(xiǎn)路段,危險(xiǎn)等級定為二級;當(dāng)Δν≥10,h≥0•4時(shí),屬于高度危險(xiǎn)路段,危險(xiǎn)等級定為一級。并且根據(jù)此模型將路段根據(jù)危險(xiǎn)程度的高低排序。
3.3安全改造路段二次篩選流程第二階段篩選安全隱患路段及事故黑點(diǎn)(段)的流程(圖略根據(jù)危險(xiǎn)路段的危險(xiǎn)程度分級模型,通過一定量的觀測,即可最終按危險(xiǎn)程度從高到低篩選出需要進(jìn)行安全改造的路段。
超聲、細(xì)針穿刺活檢、磁共振成像（MRI）、計(jì)算機(jī)體層成像（CT）、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像（sin-glephotonemissioncomputedtomography，SPECT）和正電子發(fā)射斷層顯像（positronemissiontomography，PET）都是診斷唾液腺腫瘤可用的檢查方法。影像學(xué)對于診斷、臨床診療、決定是否手術(shù)等方面有重要作用。一些疾病表現(xiàn)可能有重疊，依據(jù)不同的表現(xiàn)應(yīng)選擇不同的最佳影像手段。近年來多模態(tài)醫(yī)學(xué)影像在腫瘤診治中的地位越發(fā)重要，SPECT和PET屬于功能成像，從細(xì)胞和分子水平動(dòng)態(tài)觀察病灶，但其分辨率低，不能準(zhǔn)確定位病變部位，而CT、MRI具有良好的定位功能，將兩者融合的SPECT/CT、PET/CT、PET/MR等設(shè)備結(jié)合了兩者的優(yōu)勢，有效解決了單一顯像方法的不足。
二超聲和細(xì)針穿刺活檢
在唾液腺腫瘤中的應(yīng)用超聲鑒別腺體內(nèi)還是腺體外腫塊的準(zhǔn)確率達(dá)98%，能證實(shí)臨床所懷疑的腫塊。腫瘤組織比正常腺體組織回聲低，是初步評估腮腺淺葉和頜下腺的理想工具。基于多普勒技術(shù)的高分辨超聲提供了優(yōu)異的軟組織形態(tài)、多維信息和血流信息，因?yàn)楸憷姨峁?shí)時(shí)圖像引導(dǎo)，是引導(dǎo)細(xì)針穿刺的最理想工具。但超聲的用途僅限于表淺結(jié)構(gòu)，局限性在于不能評價(jià)腮腺深部組織（被下頜骨遮擋）、咽后組織、小唾液腺病變、外周神經(jīng)受累的病變、顱內(nèi)病變和骨侵蝕，它往往是進(jìn)一步影像檢查的基礎(chǔ)。超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺可提供組織學(xué)診斷和分級，幫助指導(dǎo)治療，然而超聲檢查具有個(gè)體差異性，靈敏度和特異性分別為88%~93%和60%~75%，特異性不足最主要原因是取材不足造成的假陰性。
三CT和MRI在唾液腺腫瘤中的應(yīng)用
CT和MRI是顯示腫瘤范圍及區(qū)域淋巴結(jié)的理想手段。MRI提供了良好的軟組織對比度和空間分辨率，評估肌肉與腫瘤分界面時(shí)優(yōu)于CT，能評價(jià)周圍神經(jīng)擴(kuò)散和深葉侵犯，也能顯示咽旁間隙。CT能發(fā)現(xiàn)惡性病變引起的骨侵蝕，能評價(jià)咽、頸部淋巴結(jié)異常，增強(qiáng)CT可用于惡性腫瘤分期。最近有研究報(bào)道利用CT灌注成像鑒別腮腺良、惡性腫瘤，結(jié)果表明其可提供血流灌注信息及組織時(shí)間密度變化曲線，有助于鑒別腮腺良、惡性腫瘤。在腺體脂肪的對比下，MRIT1加權(quán)成像能識(shí)別多數(shù)唾液腺病灶，正常腮腺信號介于脂肪和肌肉之間，隨著年齡增大信號越接近脂肪。MRI對腫瘤邊緣及侵犯深度評價(jià)較好。多數(shù)唾液腺腫瘤的T2圖像較T1亮，含水量高的病變，例如腮腺囊腫、Warthin瘤和囊性黏液表皮樣癌的T2信號更亮。在所有現(xiàn)有影像學(xué)手段中，MRI是觀察面神經(jīng)是否受侵的最佳方法。然而傳統(tǒng)T1和T2加權(quán)成像在面神經(jīng)識(shí)別中作用有限，一些新序列例如靜態(tài)梯度回調(diào)采集、平衡超快速場回波已經(jīng)逐步發(fā)展，這些序列顯示范圍、空間分辨率和信號/噪聲比方面比傳統(tǒng)序列更好。基于舌下腺腫瘤潛在的高度惡性，舌下腺腫物首選MR檢查。
四PET/CT在唾液腺腫瘤中的應(yīng)用
PET/CT是一種靈敏度高、準(zhǔn)確性好、無創(chuàng)的檢查手段，對許多疾病尤其是惡性腫瘤可早期發(fā)現(xiàn)。PET/CT檢查可一次性全身成像，是一種很有力的顯像模式，能夠?qū)⒇灤┤淼纳锘瘜W(xué)和病生理改變形象化體現(xiàn)。目前最常用的PET顯像劑為18F-FDG，已廣泛用于多種腫瘤包括頭頸部腫瘤初始分期、復(fù)發(fā)檢測以及治療療效評價(jià)。
1PET/CT對診斷和治療的影響
1.1PET/CT診斷唾液腺腫瘤
PET/CT顯像中，腮腺微量至少量的FDG攝取被認(rèn)為是正常攝取。但在無癥狀的腮腺里常遇到低到中度的攝取或者不對稱性攝取，F(xiàn)DG攝取灶的形態(tài)和密度都有重要提示作用，雙側(cè)對稱的攝取增高通常是生理性的；不對稱的，尤其是局灶性的，可能需要更多影像檢查和病理檢查來排除惡性。當(dāng)滿足一條或多條以下標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，PET/CT被認(rèn)為是有意義或者說與腫瘤相關(guān)：軟組織或淋巴結(jié)FDG攝取增高且不能歸因于生理攝取；淋巴結(jié)伴有中央壞死；FDG攝取增高或CT提示惡性特點(diǎn)的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。可疑病灶的評價(jià)一方面基于對圖像的定性視覺判斷，另一方面利用標(biāo)準(zhǔn)化攝取值（standardizedup-takevalue，SUV）。高級別惡性腫瘤比中、低級別腫瘤具有更高的平均SUV值(4.6vs2.8)，但SUV鑒別高度和中低度惡性腫瘤意義不明確，因?yàn)閮烧咧丿B區(qū)域很大。同時(shí)，雙時(shí)相顯像亦不適合用于鑒別腮腺良、惡性腫瘤，腮腺良性腫瘤常表現(xiàn)為FDG高攝取，延遲顯像其代謝也可進(jìn)一步增高。
1.2PET/CT影響腫瘤患者
臨床診療研究證明PET/CT診斷唾液腺腫瘤具有74.4%的靈敏度和近100%的特異性，陽性預(yù)測值達(dá)到100%，陰性預(yù)測值為61.5%，識(shí)別出其他手段未發(fā)現(xiàn)的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶更敏感。在高度和中低度惡性腫瘤中PET/CT沒有表現(xiàn)出顯著性差異。PET/CT對于初始分期、發(fā)現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、治療后監(jiān)測很有意義，可以提示手術(shù)必要性以及手術(shù)切除范圍。SUV可能對預(yù)測組織學(xué)分級有幫助，進(jìn)而為手術(shù)計(jì)劃提供有用的術(shù)前信息。然而和其他頭頸部腫瘤比起來，SUV預(yù)測唾液腺惡性腫瘤患者預(yù)后方面的作用稍低。PET/CT的主要優(yōu)勢在于發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶，對原發(fā)位置、復(fù)發(fā)可能性、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移這些易改變患者治療決策的方面提供更準(zhǔn)確評估。臨床中常見PET/CT發(fā)現(xiàn)患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移從而將手術(shù)治療改為放化療，也有患者因頸部淋巴結(jié)無攝取而避免了原計(jì)劃的頸淋巴結(jié)清掃術(shù)。PET/CT在發(fā)現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面具有相當(dāng)高的診斷準(zhǔn)確率，可幫助指導(dǎo)臨床治療，決定患者適合接受根治療法還是姑息療法。
2PET/CT較CT的優(yōu)勢
有研究表明，PET/CT和單獨(dú)CT相比較診斷準(zhǔn)確性提高，尤其在腫瘤范圍確定、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面，在SUV較高的高度惡性腫瘤中更明顯，但不代表它是發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移的惟一影像方法。PET/CT特異性較高，但靈敏度稍低，可能是因?yàn)橥僖合侔┯蠪DG親和力不一，導(dǎo)致小淋巴結(jié)或局部復(fù)發(fā)灶判定的假陰性。PET/CT診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率高于傳統(tǒng)影像方法，靈敏度和特異性分別提高到90%和94%，而CT是82%和85%，MRI是88%和79%。
3PET/CT較單獨(dú)
PET的優(yōu)勢單獨(dú)PET檢測低度唾液腺癌，易發(fā)生假陰性，因?yàn)槠銯DG攝取值低于高度惡性腫瘤，不易與其他疾病區(qū)分。假陰性也易發(fā)生在直徑小于5mm的小腫瘤中，PET顯示和正常組織很類似。唾液腺炎癥病變會(huì)造成攝取增高，導(dǎo)致假陽性。但傳統(tǒng)CT有較好的解剖定位功能，也能識(shí)別良性和低度惡性腫瘤，所以在診斷腫瘤方面將PET與CT或MR結(jié)合起來，能夠消除單獨(dú)PET的不足。PET/CT將診斷準(zhǔn)確性提高，提供了功能和解剖兩方面的信息，同時(shí)也比PET具有更高的空間分辨率。不論P(yáng)ET還是CT，誤差可能和固有顯像模式有關(guān)，不論哪種影像手段都不能完全取代病理。
五總結(jié)
高效液相色譜（HPLC）是20世紀(jì)60年代末70年代初出現(xiàn)并發(fā)展起來的一項(xiàng)分離分析技術(shù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，色譜也不斷的被改進(jìn)與完善。由于其具有高分離速率，高分離效率，高檢測靈敏度等特點(diǎn)，高效液相成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。尤其是藥物，直接關(guān)系到人的生命健康，只有對藥品的研制、生產(chǎn)、經(jīng)營和使用各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行全面的動(dòng)態(tài)的藥物分析研究和監(jiān)測控制，才能確保藥品使用的安全、有效與合理。因此，高效液相色譜廣泛運(yùn)用于藥物分析的各個(gè)方面。
1高效液相色譜在藥物鑒別中的應(yīng)用
在H P L C法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)，可用于藥物的鑒別，中國藥典采用此法進(jìn)行藥物鑒別。由于西紅花價(jià)格昂貴，經(jīng)常出現(xiàn)假品偽品，常見偽品有紅花、、玉米須、蓮須、紙漿等；其摻偽現(xiàn)象比較復(fù)雜，給真?zhèn)舞b別和優(yōu)劣評價(jià)帶來難度。安慧景采用高效液相色譜法對西紅花及其偽品的特征成分進(jìn)行鑒別，確定正品西紅花中沒有綠原酸和羥基紅花黃素A，并建立了HPLC-DAD含量測定方法，通過測定樣品中的綠原酸、HSYA，一次性鑒別西紅花、常見偽品、紅花，并測定摻偽量。此方法不僅能鑒別藥材及提取物是否摻偽，而且能確定所摻偽品的種類并估測摻偽量，是對西紅花摻偽鑒別方法的有益探討和嘗試[1]。隨著高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展和在藥典中的重要性不斷提高，出現(xiàn)了一些采用高效液相色譜法鑒別藥物的新方法。例如，克拉霉素、利福平滴眼液、崗梅等七種冬青屬中草藥以及南北五味子的鑒別等[2-5]。這些新方法的發(fā)展無疑為進(jìn)一步完善、開發(fā)藥物鑒別的方法提供了一種新的思路。
2高效液相色譜在藥物雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用
隨著H P L C 技術(shù)的不斷發(fā)展，有不少藥物分析工作者研究和探討了H P L C法在藥物的有關(guān)物質(zhì)檢查方面的應(yīng)用，并建立了一些新方法。例如，鹽酸噻吩諾啡、奧沙西泮原料藥及其片劑、鹽酸喹那普利原料藥、氟他胺中有關(guān)物質(zhì)的檢查等[6-9]。這些方法簡便、可行且專屬性較強(qiáng)，是藥物雜質(zhì)檢測的新發(fā)展。程磊等通過合成胸腺法新雜質(zhì)對照品后確證其結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行雜質(zhì)測定的方法學(xué)研究測得各雜質(zhì)相對于胸腺法新的校正因子，從而建立一種高效液相色譜測定胸腺法新及其制劑中雜質(zhì)的方法，并可對含量超過0.1%的雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定[10]。胡政華等建立苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋雜質(zhì)的HPLC檢查方法，該方法專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，是手性藥物中雜質(zhì)分析方法的進(jìn)步[11]。
3高效液相色譜在藥物含量測定中的應(yīng)用
用高效液相色譜法測定合成藥及其制劑的含量，可以消除藥物中的雜質(zhì)、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。張美娟采用高效液相色譜法測定舒心糖漿中阿魏酸的含量，所建立的方法分離效果好、靈敏、準(zhǔn)確、簡便[12]。此外，高效液相色譜在復(fù)方制劑中藥物含量測試中也有廣泛應(yīng)用，如月乃湯中甘草的鑒別和甘草酸含量測定[13]以及復(fù)方葛斛膠囊中葛根素含量的測定等[14]。
4高效液相色譜在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用
與氣相色譜法相比，高效液相色譜法不受樣品揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性及相對分子質(zhì)量的限制，只需把樣品制成溶液即可測定，非常適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大的有機(jī)合成藥物。張莉等建立了一種快速、準(zhǔn)確測定大鼠血清中（E）-3-（3，5-二羥基-4-異丙基苯基）丙烯酸含量的反相HPLC分析方法，該方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可用于臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究中血藥濃度的測定[15]。付洪瑜等建立大鼠血漿中卡瓦內(nèi)酯麻醉椒苦素的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）定量分析方法，并用于大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究，該分析方法特異性好、分析速度快、靈敏度高，可用于臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究[16]。
綜上所述，高效液相色譜法分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理簡單。高效液相色譜法還可以在檢查雜質(zhì)的同時(shí)進(jìn)行含量測定， 為分析工作節(jié)約了時(shí)間，同時(shí)也降低了分析成本。因此在藥物分析的各個(gè)方面都有優(yōu)勢。該文原載于中國社會(huì)科學(xué)院文獻(xiàn)信息中心主辦的《環(huán)球市場信息導(dǎo)報(bào)》雜志http：//總第547期2014年第15期-----轉(zhuǎn)載須注名來源近年來， HPLC 法在儀器、檢測器、固定相等方面都有很大的發(fā)展，與其他分析技術(shù)的聯(lián)用也越來越成熟。如高效液相色譜儀和電感耦合等離子體質(zhì)譜儀聯(lián)用、高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用以及高效液相色譜-傅立葉變換紅外吸收光譜聯(lián)用等多種技術(shù)。高效液相色譜與其他技術(shù)的聯(lián)用是高效液相色譜今后的主要發(fā)展方向，也將是今后質(zhì)量規(guī)范化、國際化的重要途徑。
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PET/CT是將PET和CT進(jìn)行結(jié)合，利用CT可以提供更加準(zhǔn)確的解剖位置而彌補(bǔ)PET的不足，使其在臨床的應(yīng)用更加廣泛。本文就PET/CT在神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和腫瘤系統(tǒng)中的臨床應(yīng)用分別進(jìn)行闡述。
1 PET/CT在神經(jīng)系統(tǒng)中的臨床應(yīng)用
1.1阿爾海默茨病（AD） PET/CT檢查在AD早期診斷和鑒別診斷中較有價(jià)值。Engler等發(fā)現(xiàn)應(yīng)用與β-淀粉樣蛋白（β-AP）相結(jié)合的化合物PIB標(biāo)記后可進(jìn)行腦β-AP顯像，有助于AD的早期診斷、認(rèn)知功能損害評價(jià)、療效評價(jià)和危險(xiǎn)人群的篩查，且有助于預(yù)測輕度認(rèn)知功能障礙患者是否發(fā)展成AD。
1.2帕金森病（PD） PD病理改變是以黑質(zhì)紋狀體通路為主的，對于早期癥狀不典型者診斷較困難。而18F-多巴胺PET可對PD高危人群進(jìn)行早期診斷，可客觀評價(jià)病情嚴(yán)重程度，在鑒別原發(fā)和繼發(fā)PD中有很大作用。此外，多巴胺受體顯像在PD早期診斷、繼發(fā)性PD的鑒別診斷、左旋多巴替代治療對象的篩選和療效的評定中均有指導(dǎo)作用[2-4]。
1.3癲癇 PET顯像表現(xiàn)主要為發(fā)作間期18F-FDG代謝減低，發(fā)作期代謝增高。對于顳葉內(nèi)外的癲癇定位準(zhǔn)確率均超過90%。
1.4藥物成癮 在藥物成癮領(lǐng)域，腦顯像主要通過相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)的受體、轉(zhuǎn)運(yùn)體等作為顯像劑，因此利用PET/CT可以較清晰地顯示此區(qū)域，有望為研究藥物成癮治療提供新的階層。
1.5精神疾病 PET可提示精神疾病在腦血流、代謝、神經(jīng)遞質(zhì)等方面的異常。神經(jīng)受體顯像發(fā)現(xiàn)多種精神疾病表現(xiàn)為5-羥色胺、多巴胺、γ-氨基丁酸等受體系統(tǒng)功能異常。
2 PET/CT在心血管系統(tǒng)中的臨床應(yīng)用
2.1冠心病 PET/CT通過結(jié)合PET心肌灌注顯像和CT冠狀動(dòng)脈造影對冠心病患者行形態(tài)和功能的綜合評價(jià)，彌補(bǔ)了冠狀動(dòng)脈造影診斷冠心病無法顯示功能特征方面的不足。在早期冠心病危險(xiǎn)人群中，PET/CT通過冠狀動(dòng)脈鈣化積分的評價(jià)結(jié)合心肌血流儲(chǔ)備測量能增加識(shí)別早期冠心病危險(xiǎn)人群，通過改變他們的生活方式及藥物治療而降低心血管病危險(xiǎn)。
2.2心力衰竭 PET的18F-FDG顯像結(jié)合心肌灌注顯像既能獲得心功能信息，還能鑒別功能障礙心肌的存活性。利用CT冠狀動(dòng)脈造影可準(zhǔn)確判斷有無冠心病，利用PET心肌灌注可確定心功能障礙心肌是否為可逆性損害，為此PET/CT有助于心力衰竭患者病因診斷、預(yù)后評估，且能避免不必要的有創(chuàng)檢查。
3 PET/CT在腫瘤系統(tǒng)中的臨床應(yīng)用
3.1早期診斷 腫瘤早期時(shí)CT檢查容易漏診且難以區(qū)別良惡性，但腫瘤由于其代謝水平明顯不同于正常細(xì)胞，對18F-FDG的攝取遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常組織和良性腫瘤，則結(jié)合PET的高18F-FDG聚集生物學(xué)特性，有助于早期尚無明顯癥狀的腫瘤小病灶的檢出。
3.2尋找原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移 臨床中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)一些腫瘤轉(zhuǎn)移灶，而原發(fā)灶和全身情況并不清楚；或體檢中發(fā)現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物明顯提高，常規(guī)檢查卻未發(fā)現(xiàn)病灶；或雖然檢查發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶，但是需要明確有無轉(zhuǎn)移灶。選擇PET檢查，則可在腫瘤功能、代謝變化，尋找轉(zhuǎn)移性腫瘤原發(fā)灶方面發(fā)揮很重要的作用[1]。
3.3良惡性腫瘤的鑒別診斷 FDG標(biāo)準(zhǔn)攝取值（SUV）在惡性腫瘤中明顯增高。有研究表明將SUV值≥2.5作為判斷良惡性腫瘤的相對客觀指標(biāo)，對結(jié)果判斷有很大的指導(dǎo)作用。一般認(rèn)為惡性程度越高，其SUV值就越高[2]。
3.4臨床分期 腫瘤臨床分期在指導(dǎo)臨床治療策略中起了很重要的作用，18F-FDG檢查既能檢出原發(fā)灶又能檢出轉(zhuǎn)移灶，且能了解全身臟器累積情況，一般隨著腫瘤惡性程度的增高，18F-FDG攝取率也增高，故可利用此特點(diǎn)評估腫瘤的惡性程度，故可提高腫瘤分期的準(zhǔn)確性。
3.5監(jiān)測腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及療效評估 PET/CT可通過監(jiān)測腫瘤細(xì)胞代謝活動(dòng)的早期改變提示腫瘤復(fù)發(fā)，同時(shí)監(jiān)測是否有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。且可對腫瘤標(biāo)志物升高而常規(guī)解剖影像學(xué)正常的病例進(jìn)行監(jiān)測。同時(shí)PET/CT對放化療早期療效評估有很大優(yōu)勢。
3.6指導(dǎo)活檢和介入治療。
3.7指導(dǎo)放療計(jì)劃 CT結(jié)合了PET后能明確顯示腫瘤活性區(qū)，更有利于針對性地指導(dǎo)放療計(jì)劃。
總之，隨著影像學(xué)技術(shù)的發(fā)展，PET和CT同機(jī)結(jié)合，相互補(bǔ)充了各自的不足，在多種疾病系統(tǒng)中發(fā)揮了越來越重要的作用。但其仍存在不足之處，盡管如此我們?nèi)韵嘈烹S著技術(shù)的不斷進(jìn)步，PET/CT在臨床中的應(yīng)用會(huì)越來越廣泛。
參 考 文 獻(xiàn)
【摘要】 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用的分子標(biāo)記技術(shù)之一，以PCR反應(yīng)為基礎(chǔ)，其特點(diǎn)是快速簡便、易操作、成本較低，DNA需要量少、無需放射性分析，也不會(huì)污染等。該文簡述了RAPD技術(shù)的原理及優(yōu)缺點(diǎn)以及其在藥用植物遺傳多樣性分析、藥材鑒別和DNA指紋圖譜的構(gòu)建、親緣關(guān)系及系統(tǒng)學(xué)研究、藥材的道地性等方面的應(yīng)用，并展望了其發(fā)展前景。
【關(guān)鍵詞】 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA 遺傳多樣性 藥材鑒別 道地性
分子標(biāo)記（Molecular marker）是以個(gè)體間遺傳物質(zhì)內(nèi)核苷酸序列變異為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記，是DNA水平遺傳多態(tài)性的直接反映，以其快速、準(zhǔn)確、所提供的信息量大、不受環(huán)境影響等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于遺傳學(xué)評價(jià)、目的基因定位和遺傳圖譜的構(gòu)建等領(lǐng)域。隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用的分子標(biāo)記技術(shù)之一，以PCR反應(yīng)為基礎(chǔ)，其特點(diǎn)是快速簡便、易操作、成本較低、DNA需要量少、無需放射性分析也不會(huì)污染等［1］。
1 RAPD技術(shù)的原理
RAPD （ random amplified polymorphic DNA ）是 1990 年美國杜邦公司科學(xué)家 J. G. K. Williams 和加利福尼亞生物研究所 J. Welsh 領(lǐng)導(dǎo)的兩個(gè)小組幾乎同時(shí)發(fā)展起來的一項(xiàng)新的分子標(biāo)記技術(shù)。Williams 稱之為 RAPD，Welsh 稱之為 AP-PCR（arbitrary primer PCR）。 其建立在 PCR 技術(shù)基礎(chǔ)上，是以任意序列的寡核苷酸單鏈 ( 通常為10個(gè)堿基，AP-PCR 則為20～30個(gè)堿基) 為引物，對所研究的基因組 DNA 進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增。RAPD 所用的一系列引物的 DNA 序列各不相同，但對于任一引物，它同基因組 DNA 序列有特定的結(jié)合位點(diǎn)。這些特定的結(jié)合位點(diǎn)在基因組某些區(qū)域內(nèi)的分布如符合 PCR 擴(kuò)增的反應(yīng)條件，即在一定范圍內(nèi)模板 DNA 上有與引物互補(bǔ)的反相重復(fù)序列時(shí)，就可擴(kuò)增出此范圍的 DNA 片段。在不同物種基因組 DNA 中，這種反相重復(fù)序列的數(shù)目和間隔的長短不同，就可導(dǎo)致這些特定的結(jié)合位點(diǎn)分布發(fā)生相應(yīng)的變化，而使 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物增加、減少或發(fā)生分子量的變化。 通過對 PCR 產(chǎn)物的檢測和比較，即可識(shí)別這些物種基因組 DNA 的多態(tài)片段。
2 RAPD技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)
2.1 RAPD技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)分子標(biāo)記的種類很多，RAPD標(biāo)記技術(shù)能夠成為最廣泛應(yīng)用的分子標(biāo)記技術(shù)之一，是因?yàn)榕c其它分子標(biāo)記技術(shù)相比，有很多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)［2］。
①不需DNA探針，設(shè)計(jì)引物也不需要知道序列信息；②用一個(gè)引物就可擴(kuò)增出許多片段(一般一個(gè)引物可擴(kuò)增6～12條片段，但對某些材料可能不能產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物)，總的來說RAPD在檢測多態(tài)性時(shí)是一種相當(dāng)快速的方法；③技術(shù)簡單，RAPD分析不涉及Southern雜交、放射自顯影或其它技術(shù)；④不象RFLP分析，RAPD分析只需少量DNA樣品；⑤成本較低，因?yàn)殡S機(jī)引物可在公司買到，其價(jià)格不高；⑥無需專門設(shè)計(jì) RAPD 擴(kuò)增反應(yīng)的引物，也無需預(yù)知被研究的生物基因組核苷酸順序，引物是隨機(jī)合成或是任意選定的［3］。⑦每個(gè)RAPD 反應(yīng)中，僅加單個(gè)引物，通過引物和模板 DNA 鏈隨機(jī)配對實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增，擴(kuò)增沒有特異性。⑧較之常規(guī) PCR，RAPD 反應(yīng)易于程序化。利用一套隨機(jī)引物，得到大量 DNA 分子標(biāo)記，可以借助計(jì)算機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)分析。
2.2 RAPD技術(shù)的缺點(diǎn)RAPD技術(shù)雖然有很多優(yōu)點(diǎn)，但是也不可避免的存在一些缺點(diǎn)：①RAPD標(biāo)記一般是顯性遺傳(極少數(shù)是共顯性遺傳的)，這樣對擴(kuò)增產(chǎn)物的記錄就可記為“有/無”，但這也意味著不能鑒別雜合子和純合子；②RAPD分析中存在的最大問題是重復(fù)性不太高，因?yàn)樵赑CR反應(yīng)中條件的變化會(huì)引起一些擴(kuò)增產(chǎn)物的改變；但是，如果把條件標(biāo)準(zhǔn)化，還是可以獲得重復(fù)結(jié)果的；③由于存在共遷移問題，在不同個(gè)體中出現(xiàn)相同分子量的帶后，并不能保證這些個(gè)體擁有同一條(同源)的片段；同時(shí)，在膠上看見的一條帶也有可能包含了不同的擴(kuò)增產(chǎn)物，因?yàn)樗玫哪z電泳類型(一般是瓊脂糖凝膠電泳)只能分開不同大小的片段，而不能分開有不同堿基序列但有相同大小的片段。
3 RAPD技術(shù)在藥用植物研究中的應(yīng)用
目前，RAPD技術(shù)在藥用植物研究中得到了廣泛的應(yīng)用。其主要用于藥用植物遺傳多樣性分析，藥材鑒別和DNA指紋圖譜的構(gòu)建，親緣關(guān)系和系統(tǒng)學(xué)研究，藥材的道地性等各個(gè)領(lǐng)域。此外，Kitanaka還用RAPD技術(shù)對人參和西洋參的雜交一代進(jìn)行了鑒定。
3.1 遺傳多樣性分析對于任何一個(gè)物種來說，其遺傳多樣性越豐富，對環(huán)境變化的適應(yīng)能力就越強(qiáng)，就越容易擴(kuò)展其分布范圍和開拓新的環(huán)境。所以，對遺傳多樣性的研究不僅可以揭示物種或居群的進(jìn)化歷史，也能為進(jìn)一步分析其進(jìn)化潛能和未來的命運(yùn)提供重要的信息。此外，它還可以幫助我們正確了解不同分類群間的親緣演化關(guān)系，為生物的分類和進(jìn)化研究提供有益的資料，為分類系統(tǒng)的建立提供強(qiáng)有力的佐證。
吳衛(wèi)（博士學(xué)位論文，2002）應(yīng)用RAPD標(biāo)記對92份魚腥草種質(zhì)資源遺傳多樣性進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)魚腥草種質(zhì)資源在分子水平上確實(shí)存在較大遺傳差異，RAPD標(biāo)記可作為構(gòu)建魚腥草DNA指紋圖譜的有效工具，魚腥草藥材道地性與環(huán)境因素有關(guān)，但更大程度上由其遺傳因素決定。鄒佳寧等［4］對貴州省境內(nèi)藥用植物天麻的野生和栽培15個(gè)樣品的基因組DNA遺傳多態(tài)性進(jìn)行RAPD分析，表明野生與栽培天麻之間的遺傳變異較大，說明地理分布和生長環(huán)境的差異是導(dǎo)致天麻形成豐富的遺傳多態(tài)性的一個(gè)重要的原因。張建清等［5］從DAN分子水平上分析甘肅黨參主要栽培區(qū)的9個(gè)栽培居群和4個(gè)自然居群的遺傳多樣性和遺傳關(guān)系，進(jìn)而探討紋黨參的來源，RAPD分析結(jié)果揭示了甘肅栽培的黨參和素花黨參在居群水平上具有豐富的遺傳多樣性。彭銳等［6］利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)技術(shù)分析了15種石斛屬藥用植物，分析結(jié)果表明，RAPD方法能有效鑒別所試石斛屬植物，其多態(tài)位點(diǎn)百分率為84.85％，表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性。Pan等［7］對廣藿香的研究表明，應(yīng)用RAPD隨機(jī)引物對廣藿香遺傳多樣性的分析及不同居群的鑒定是可行的。RAPD技術(shù)為廣藿香遺傳種質(zhì)資源的鑒定和分類提供了新的途徑。Rout GR［8］運(yùn)用RAPD技術(shù)對心葉青牛膽進(jìn)行研究，證明RAPD技術(shù)具有檢測藥用植物遺傳變化的潛力。
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3.2 藥材鑒別和指紋圖譜的構(gòu)建長期以來，局限于粗放經(jīng)營的種植方式，藥材存在種質(zhì)不清、品種混雜和種質(zhì)退化嚴(yán)重的現(xiàn)象，嚴(yán)重影響了我國藥材的出口，現(xiàn)在我國的中藥在國際市場上僅占4％的份額，這與我們中藥大國的身份和地位嚴(yán)重不符，運(yùn)用RAPD技術(shù)可以在分子水平上解決我國藥材嚴(yán)重混雜的現(xiàn)狀。
王潤玲等［9］采用RAPD技術(shù)進(jìn)行了玉竹及其摻偽品熱河黃精、黃精等藥用植物的鑒別，證明RAPD技術(shù)可用作區(qū)分玉竹及其摻偽品的依據(jù)。胡挺松等［10］用RAPD技術(shù)對紅景天屬的大花紅景天、長鞭紅景天、狹葉紅景天和高山紅景天4種藥用植物進(jìn)行分子水平鑒定，證明了RAPD法能有效地鑒別紅景天類藥材，把大花紅景天、長鞭紅景天、狹葉紅景天和高山紅景天區(qū)分開。周曄等［11］采用原植物鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定和RAPD手段，對中藥黃精及主要摻偽品長梗黃精進(jìn)行鑒別，表明RAPD技術(shù)為黃精與長梗黃精的區(qū)分提供了分子鑒別依據(jù)。黃蕓等［12］用RAPD技術(shù)對射干類藥材射干及混淆品鳶尾、野鳶尾、蝴蝶花、德國鳶尾等5種藥用植物進(jìn)行分子水平的鑒定，研究結(jié)果表明RAPD法能有效的鑒別射干類藥材，把射干和鳶尾、野鳶尾、蝴蝶花、德國鳶尾等藥用植物區(qū)分開。曾明等［13］采用RAPD技術(shù)對葛屬6種植物進(jìn)行分析，利用RAPD及PHYLIP軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，峨嵋葛與野葛的遺傳距離小，應(yīng)歸為野葛、野葛與粉葛、山葛間的遺傳距離大，粉葛、山葛應(yīng)獨(dú)立成種。指紋圖譜可用于葛屬植物間的鑒別。沙明等［14］采用RAPD技術(shù)對地榆屬的4個(gè)品種及其混淆品進(jìn)行分析， RAPD可提供清晰RAPD指紋譜，表明RAPD技術(shù)可以做為4種地榆品種及其混淆品的質(zhì)量評價(jià)方法。Guo WL等［15］對車前的研究表明，RAPD技術(shù)能夠很好的鑒別不同地域車前之間的差別。在生藥鑒定方面，該方法在人參及其偽品、甘草、黃連、冬蟲夏草及其偽品、貝母等藥材的鑒定中都有應(yīng)用。
3.3 親緣關(guān)系和系統(tǒng)學(xué)研究植物在長期的演化過程中，類群之間存在或遠(yuǎn)或近的親緣關(guān)系，親緣相近的種類其遺傳上的聯(lián)系也必然相近，運(yùn)用RAPD技術(shù)分析藥用植物的親緣關(guān)系，可以進(jìn)一步了解藥用植物的遺傳關(guān)系，為優(yōu)良品種的選育和藥材的分類和鑒定打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
李娟等［16］用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)鑒別8種卷柏屬藥用植物并進(jìn)行親緣關(guān)系分析，并建立了8種卷柏屬植物類群親緣關(guān)系的樹系結(jié)構(gòu)圖，該方法顯示了8種卷柏屬植物之間明顯的種間差異，能為這些植物種以及種下的分類鑒定提供遺傳學(xué)依據(jù)。丁鴿等［17］采用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)，對鐵皮石斛8個(gè)野生居群的遺傳多樣性、親緣關(guān)系以及分子鑒別等進(jìn)行研究，表明鐵皮石斛居群間遺傳差異明顯，具有較豐富的遺傳多樣性，RAPD可以作為鐵皮石斛野生居群遺傳多樣性、居群親緣關(guān)系和分子鑒別研究的有效手段。虞泓等［18］對云南常見的3種6個(gè)居群59個(gè)紅景天樣品進(jìn)行了遺傳關(guān)系研究，結(jié)果表明RAPD分子標(biāo)記可很好地用于紅景天物種的分子鑒定和遺傳背景研究。傅大煦等［19］從DNA分子水平上分析新疆藥用桑樹資源9個(gè)栽培群體的遺傳關(guān)系，發(fā)現(xiàn)RAPD分析結(jié)果與新疆藥用桑樹資源植物的遺傳關(guān)系的傳統(tǒng)劃分是基本一致的。Warude等［20］用RAPD技術(shù)對余甘子的遺傳特性進(jìn)行研究，證明RAPD技術(shù)可以很好的鑒別余甘子的親緣關(guān)系。
3.4 藥材的道地性古人云：“諸藥所生，皆有其界”，可見生態(tài)地理因素對中藥材質(zhì)量具有重要的影響。“地道藥材”是同種異地，是生物學(xué)上的“居群”，是一個(gè)具有共同基因庫的由和親緣關(guān)系聯(lián)系起來的同一物種的個(gè)體群，它的形成是由基因型與環(huán)境飾變共同作用的結(jié)果。因此，研究中藥資源的生態(tài)地理不僅將揭示我國中藥資源的分布規(guī)律，為中藥種植區(qū)劃研究打下基礎(chǔ)，而且從生態(tài)地理的高度研究地道藥材形成的環(huán)境原因，并與遺傳基因的研究一起為解釋藥材地道性提供理論基礎(chǔ)，從而打造出我國的“地道藥材”商品基地，使中藥資源中得到持續(xù)利用。
顧華等［21］運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA（RAPD）方法研究了來自山西黎城、長治、平順、壺關(guān)、吞留及安澤6個(gè)地區(qū)11個(gè)連翹地方栽培品系的親緣關(guān)系，結(jié)果顯示運(yùn)用RAPD分析手段進(jìn)行藥材道地性研究具有可行性。雷高鵬等［22］對來自四川、湖北、浙江、上海的麥冬的13個(gè)居群和兩個(gè)沿階草種的RAPD分析，也證明RAPD是一個(gè)能有效區(qū)分麥冬與其他同屬物種以及麥冬道地性分析的方法。李穎等［23］利用RAPD技術(shù)、瓊脂糖電泳等技術(shù)研究了廣藿香的道地性，顯示了不同產(chǎn)地廣藿香基因組的多態(tài)性，為廣藿香的道地鑒別和引種栽培的質(zhì)量控制提供一種新方法。
4 展望
隨著生物技術(shù)手段的發(fā)展，分子標(biāo)記技術(shù)必然會(huì)得到廣泛的應(yīng)用，RAPD技術(shù)出現(xiàn)雖然短短幾年的時(shí)間，但在其應(yīng)用過程中顯示了廣泛的前景，特別是在藥用植物方面也得到了很好的發(fā)展。筆者認(rèn)為隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和藥用植物分子遺傳特征研究的不斷深入，RAPD技術(shù)將在藥用植物研究領(lǐng)域中得到更加廣泛的應(yīng)用。
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1在食品水分分析與檢測中的應(yīng)用
低分辨核磁共振儀及其技術(shù)在水分分析與檢測中應(yīng)用尤為廣泛。水分是構(gòu)成食品的主要元素之一，它的遷移、變化影響著食品的品質(zhì)與風(fēng)味，因此，檢測食品中水分對食品加工、儲(chǔ)藏以及食品質(zhì)量安全具有非常重要的指導(dǎo)意義。傳統(tǒng)的食品水分檢測方法采用干燥法、蒸餾法、卡爾·費(fèi)休法，在檢測過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些蛋白質(zhì)變化或淀粉糊化等物理或化學(xué)變化，破壞了被檢樣品的完整性以及成分結(jié)構(gòu)，不能反映食品中水分的物理狀態(tài)的直接信息;新的技術(shù)如紅外、近紅外分析技術(shù)等來測定食品水分，只反映的是被檢樣品中水分的部分信息，其應(yīng)用也有一定的局限性。而低分辨核磁共振技術(shù)無損檢測，能夠有效獲取水分分布的全部信息，當(dāng)水與底物結(jié)合穩(wěn)固時(shí)，T2值降低;當(dāng)水流動(dòng)性好時(shí)，T2值較高。氫核的弛豫時(shí)間會(huì)隨著食品的組成成分、保存溫度、儲(chǔ)藏時(shí)間、水分流動(dòng)性等因素的變化而變化，這個(gè)參數(shù)能夠提供與水分子的結(jié)合力和移動(dòng)相關(guān)的重要信息，應(yīng)用于食品水分檢測具有明顯的優(yōu)勢。近年來，科研工作者利用低分辨核磁共振技術(shù)對肉質(zhì)水分分析作了大量的研究。韓劍眾基于低分辨核磁共振技術(shù)，研究了不同品種(中國金華豬和杜長大豬)生鮮豬肉的水分存在狀態(tài)和變化規(guī)律，得到了宰后生鮮豬肉中水的存在狀態(tài)及分布情況，為低場核磁共振技術(shù)在評價(jià)宰后肉質(zhì)的持水性能及變化方面的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。戚軍等通過低分辨核磁共振技術(shù)研究肌肉中水T2的變化，考察了凍融過程中羊肉持水力的變化規(guī)律，指出肌肉中不易流動(dòng)水的弛豫時(shí)間可以作為考察凍融后肉品質(zhì)持水力的一個(gè)重要指標(biāo)，為快速無損檢測肉類水分提供了一種新方法。姜曉文也利用LF－NMR技術(shù)對豬肉持水性進(jìn)行了研究，通過T2的積分面積反映宰后豬肉水分含量的變化，特別是國內(nèi)注水豬肉問題嚴(yán)重的情況下，為食品安全豬肉的檢測與監(jiān)管提供了一種切實(shí)可行有效的方法與手段。
2在食品摻假鑒別中的應(yīng)用
由于核磁共振技術(shù)無損檢測的特點(diǎn)，使得其在食品摻假識(shí)別、鑒定中得到應(yīng)用。牛乳的摻假、摻雜現(xiàn)象成為嚴(yán)重的食品安全問題。LF－NMR通過對乳制品中脂固液比、脂肪結(jié)晶溫度、持水量、水分結(jié)合狀態(tài)、蛋白質(zhì)變性、蛋白質(zhì)聚集狀態(tài)等方面進(jìn)行分析測試，能達(dá)到鑒別真?zhèn)蔚男Ч＝钡热艘該郊倥Ｈ闃悠?摻入水、食鹽、尿素、豆?jié){等)復(fù)原乳以及純牛乳樣品為低場核磁共振檢測對象，利用主成分分析法(PCA)分析處理Carr－Purcell－Meiboom－Gill(CPMG)序列的檢測數(shù)據(jù)，在主成分得分圖上很好地區(qū)分出純牛乳和摻入不同物質(zhì)的摻假牛乳，純牛乳、復(fù)原乳及其混合乳也得到有效的辨識(shí)，同時(shí)各種摻假牛乳樣品隨摻假物質(zhì)的摻加比例在圖中呈規(guī)律性分布，通過低分辨核磁共振結(jié)合PCA法得到一種快速檢測與監(jiān)控牛乳品質(zhì)的有效分析方法。低分辨核磁共振技術(shù)另具吸引力的一點(diǎn)是它能夠進(jìn)行油品中的油份進(jìn)行檢測。利用核磁共振技術(shù)能夠檢測到食用油脂(肉、黃油、棕櫚油、牛奶、巧克力等)中固體脂肪的含量，因此，LF－NMR還可以用于鑒定食用油的摻偽。王永巍等應(yīng)用低分辨核磁共振技術(shù)測定了煎炸油分別摻有3種食用植物油(橄欖油、花生油、芝麻油)油樣的橫向弛豫時(shí)間T2弛豫圖譜，發(fā)現(xiàn)煎炸油在10ms處出現(xiàn)了一個(gè)特征峰，而其他三種純品油中并未檢出。隨著摻偽量的增加，該峰的峰面積比例逐漸增大，而峰開始時(shí)間則逐漸縮短。通過測定該特征峰面積比例和峰開始時(shí)間可定量測出煎炸油，提供了一種煎炸油摻偽食用植物油的快速鑒別方法。ZhangQing等通過LFNMR分析玉米油、花生油、油菜籽油、和大豆油與兩種煎炸油的T2峰值，建立了線性方程用以檢測摻假食用油。其實(shí)，鑒別油品的研究在很早就開始了，欽理力［30］用脈沖核磁共振鑒別法檢測餐飲廢油脂中的地溝油、泔水油及三種食用油在10℃和0℃下的SFC值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明地溝油和泔水油的固體脂肪含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于食用油，在0℃下固脂含量為0的食用油，只要其摻偽了1%以上的餐飲廢油脂，就可以鑒別出來。花生油在10℃下SFC值雖達(dá)到了1.52%，但當(dāng)其僅僅摻入1%的地溝油或泔水油時(shí)，SFC值明顯變高，可認(rèn)為只要花生油中摻入了1%以上的餐飲廢油脂，即可檢測出來。此外，如果煎炸老油曾煎炸過動(dòng)物食品，也可用本法檢出。此法操作簡單，快速準(zhǔn)確，靈敏度高，實(shí)驗(yàn)過程中不需要用任何化學(xué)藥品，只要稍加指導(dǎo)一般工作人員即可完成。另外，有研究表明，正常食用油脂與地溝油的弛豫反演譜有顯著區(qū)別，有明顯的特征峰出現(xiàn)。而且這種區(qū)別穩(wěn)定性很高，對于同一種地溝油，這種明顯特征不會(huì)隨著地溝油的過濾、脫膠、脫嗅、脫色等加工過程而消失。低分辨核磁共振技術(shù)在食用油摻假鑒別檢測中表現(xiàn)出了突出的技術(shù)優(yōu)勢，衛(wèi)生部公布核磁共振技術(shù)成為食用油摻假識(shí)假檢測的四種儀器方法之一。
3在食品微生物檢測中的應(yīng)用
低分辨核磁共振技術(shù)在檢測微生物方面也嶄露頭角。食品微生物檢測是食品檢測中常規(guī)、必檢項(xiàng)目。針對食品中的病原微生物(如細(xì)菌、真菌和病毒等)以及其他有害生物(如寄生蟲)，傳統(tǒng)而有效的檢測方法為分離培養(yǎng)法。分離培養(yǎng)需要增菌、生化鑒定或血清學(xué)鑒定，整個(gè)過程需要2～3d甚至5～6d的時(shí)間才能完成，勞動(dòng)強(qiáng)度大，耗時(shí)，不能及時(shí)、快速評價(jià)食品中微生物的安全性。目前，微生物快速檢測方法主要有紙片法、膠體金檢測法、微孔濾膜法、光電檢測法、酶底物法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫層析法、PCR法、分子雜交法等，各種技術(shù)在食品微生物快速篩查中發(fā)揮了重要作用。低分辨核磁共振技術(shù)以其獨(dú)特的檢測原理被作為一項(xiàng)新型快速檢測技術(shù)得到研究。J.ManuelPere等人通過將抗皰疹病毒多克隆抗體與直徑為46nm左右的Fe3O4納米磁珠連接制成納米傳感器，然后與病毒分子孵育，在1.5T(60MHz)核磁共振儀上檢測到了病毒顆粒，檢測限為5個(gè)病毒顆粒/10μL。該方法不需要生化鑒定或血清學(xué)鑒定，檢測靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速便捷，磁性Fe3O4納米晶體在磁場中影響周圍水分子中氫原子的弛豫時(shí)間，核磁共振技術(shù)能非常精確地記錄水分子中氫原子內(nèi)的原子核的行動(dòng)，病原菌造成水量的1%的變動(dòng)，都能被核磁共振檢測到。基于相同的技術(shù)原理，建立了牛奶中分支桿菌的快速檢測方法，檢測限達(dá)15.5CFUs，核磁共振技術(shù)檢測微生物不需要增菌，整個(gè)檢測時(shí)間不到1h，快速、靈敏，方法新穎，在病原微生物分析檢測中表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
4展望
低分辨核磁共振技術(shù)是一種非常有潛力并具有優(yōu)勢的快速檢測技術(shù)，它在食品安全領(lǐng)域的研究正處于萌動(dòng)發(fā)展時(shí)期。隨著低場核磁共振技術(shù)的快速發(fā)展以及低場核磁共振設(shè)備的不斷成熟，隨著對食品安全監(jiān)管力度的不斷加強(qiáng)，會(huì)吸引越來越多的科研工作者開發(fā)更多的技術(shù)與方法應(yīng)用于食品安全領(lǐng)域，推動(dòng)低分辨核磁共振技術(shù)的蓬勃發(fā)展。
作者：杜美紅孫永軍單位：北京市理化分析測試中心北京市食品安全分析測試工程技術(shù)研究中心
