時(shí)間：2023-05-29 17:46:05
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇免疫球蛋白e，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
【關(guān)鍵詞】 鼻息肉 免疫球蛋白E 白細(xì)胞介素5 嗜酸粒細(xì)胞
鼻息肉是耳鼻咽喉科的常見病，患病率約占成年人的1%～2%，術(shù)后復(fù)發(fā)率約為10%～20%［1］，是一種由多種因素所致的鼻黏膜慢性炎性病變，發(fā)生機(jī)制尚未十分清楚。其最常見的組織學(xué)特點(diǎn)是以嗜酸粒細(xì)胞（EOS）為主的炎性細(xì)胞浸潤和組織水腫。本研究通過檢測鼻息肉組織中免疫球蛋白E（IgE）和白細(xì)胞介素5（IL-5）水平，同時(shí)觀察EOS浸潤的程度，探討IgE和IL-5在鼻息肉中EOS浸潤聚集機(jī)制的作用。
1 資料與方法
1.1 標(biāo)本來源及制備 31例鼻息肉標(biāo)本來自2006年1月～2007年12月在我院行鼻息肉手術(shù)的患者（鼻息肉組），男17例，女14例；年齡12.9～66.2歲，平均43.6歲。所有患者均無變應(yīng)性疾病史及近期內(nèi)未服用類固醇激素、抗組胺藥及抗生素藥物，無阿司匹林耐受不良。25例對照組標(biāo)本來自因鼻中隔偏曲并下鼻甲肥大而行部分下鼻甲切除患者的下鼻甲黏膜（無全身疾病史，無變態(tài)反應(yīng)史，無慢性鼻竇炎病史），年齡18.2～65.9歲，平均39.4歲。鼻息肉和下鼻甲黏膜標(biāo)本分為兩份，一份用4%多聚甲醛固定后石蠟包埋，行常規(guī)病理檢查；另一份用生理鹽水洗凈血跡，置-20 ℃低溫保存。
1.2 檢測方法 將標(biāo)本室溫融化，稱重后剪碎，每100 mg組織加生理鹽水1 ml，在冰浴中用BY89-1電動(dòng)玻璃勻漿器（寧波新芝科技器材研究所）將組織細(xì)胞碾碎，用低溫離心機(jī)（德國）于4 ℃、以5000 r/min，離心10 min，取上清液備用。
1.2.1 IgE測定 使用美國Beckman公司Accessimmoassay system，應(yīng)用連續(xù)兩步免疫酶法（Sandwich法）檢測標(biāo)本組織中IgE水平。
1.2.2 IL-5測定 應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA法）。試劑盒購自美國TPI Inc公司，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，設(shè)零孔及陰性對照孔。用法國Pasteur LP400酶標(biāo)儀測各孔450 nm吸光度（A）值。酶標(biāo)儀根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及A值，自動(dòng)得出標(biāo)準(zhǔn)曲線，由標(biāo)本的A值分別在相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出各個(gè)組織標(biāo)本中IL-5水平（ng/L）。
1.2.3 組織學(xué)觀察 鼻息肉及下鼻甲黏膜的石蠟包埋標(biāo)本，切片，蘇木精-伊紅常規(guī)染色。使用NIKONE600型顯微鏡（日本）行雙盲法檢測，每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)選取2張切片，從中隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野（×400），手工計(jì)數(shù)鼻息肉組織和下鼻甲黏膜下、血管周圍的EOS數(shù)，其平均值為該標(biāo)本EOS浸潤數(shù)。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 10.0 for Window軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。用t檢驗(yàn)分析比較兩組組織中IgE、IL-5水平和的EOS浸潤程度；用相關(guān)分析比較IgE、IL-5水平與EOS浸潤程度的相關(guān)性，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
鼻息肉組黏膜下可見不同程度的EOS浸潤，主要分布在黏膜上皮下或小血管周圍，該細(xì)胞胞質(zhì)豐富，色澤鮮艷，顆粒飽滿，具有2～3個(gè)分葉核，水腫型息肉中EOS浸潤較多；對照組黏膜下EOS浸潤明顯少于鼻息肉組。兩組IgE、IL-5與EOS檢測結(jié)果見表1。鼻息肉組IgE、IL-5水平分別與EOS浸潤數(shù)呈正相關(guān)（P＜0.01）。表1 鼻息肉組和對照組IgE、IL-5及EOS水平的比較 注：與對照組比較，*P＜0.01
3 討論
鼻息肉是一種常見病，既往多認(rèn)為鼻息肉的發(fā)生與慢性炎癥和變態(tài)反應(yīng)有關(guān)。近年來隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)的進(jìn)展，國內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為鼻息肉的發(fā)病機(jī)制是多因素、多步驟的過程，并發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞因子在鼻息肉中存在并影響其發(fā)生及病理變化［2］。
大多數(shù)鼻息肉中存在著明顯的EOS浸潤。這些浸潤的EOS胞質(zhì)顆粒中含有血管活性物質(zhì)（vasoactive sutstances）、嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白（eOS inophilcationic protein，ECP）、主要堿性蛋白（major basic protein，MBP）、趨化因子（chemotactic factors）和嗜酸粒細(xì)胞過氧化物酶（eosinophilperoxidase，EPO）等，它們的釋放對鼻黏膜上皮損傷和鼻息肉的形成具有重要作用。本研究在排除了變應(yīng)性鼻炎和全身變應(yīng)性疾病的條件下，發(fā)現(xiàn)鼻息肉組織中EOS浸潤數(shù)明顯高于對照組下鼻甲黏膜，鼻息肉組織中的IgE較對照組明顯增加，且IgE水平與鼻息肉組織中EOS浸潤數(shù)呈正相關(guān)，說明鼻息肉中存在局部變態(tài)反應(yīng)，它對EOS的浸潤聚集具有重要作用。EOS浸潤聚集的機(jī)制可能與下列因素有關(guān):（1）變態(tài)反應(yīng)的作用:以IgE介導(dǎo)的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)學(xué)說來解釋鼻息肉中EOS的浸潤聚集，但目前仍存在爭議。Kramer等［3］發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎和非變應(yīng)性鼻息肉患者鼻分泌物中IgE水平上調(diào)，從而認(rèn)為兩種病有類似的病理過程。一方面，IgE與肥大細(xì)胞上的高親和受體FcεRI結(jié)合，除引起效應(yīng)細(xì)胞脫顆粒外，還激活肥大細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，共同引起EOS在組織的聚集；另一方面，當(dāng)EOS接觸IgE或抗原后，出現(xiàn)脫顆粒、釋放化學(xué)遞質(zhì)并可傳遞抗原，也可引起EOS的趨化聚集等多種生物學(xué)效應(yīng)。（2）細(xì)胞因子IL-5的作用：IL-5是近年來研究比較多的細(xì)胞因子之一，它主要由抗原活化的T-輔助細(xì)胞產(chǎn)生，具有多種生物學(xué)活性，它對鼻息肉組織中嗜酸粒細(xì)胞浸潤有重要作用。近年的研究表明，鼻息肉中的多種細(xì)胞因子與EOS的浸潤具有密切的關(guān)系。Hirschberg等［4］通過免疫組化方法研究IL-5在鼻息肉中表達(dá)狀況及其與Eos浸潤的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鼻息肉中IL-5的表達(dá)明顯上升，IL-5的表達(dá)程度與鼻息肉組織中Eos的浸潤程度密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，鼻息肉中IL-5表達(dá)水平明顯高于下鼻甲組織，且與浸潤的EOS數(shù)呈正相關(guān)，說明IL-5對鼻息肉中EOS的趨化浸潤聚集也具有重要影響。IL-5通過細(xì)胞膜相關(guān)受體而實(shí)現(xiàn)其作用，而人類白細(xì)胞中EOS是唯一特異性表達(dá)IL-5受體者，因此，IL-5對鼻息肉組織中EOS的浸潤發(fā)揮關(guān)鍵作用。IL-5可上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞血管細(xì)胞黏附分子1（vascular cell adhesion molecule，VCAM）和EOS表面整合素（very late activation antigen 4，VLA4）的表達(dá)，而VLA4是VCAM1的配體，EOS通過VLA4與VCAM1結(jié)合，黏附于血管內(nèi)皮進(jìn)而向炎癥部位移行和聚集。（3）IgE對IL-5的影響:本研究發(fā)現(xiàn)鼻息肉中IgE與IL-5表達(dá)水平呈正相關(guān)，說明IgE對IL-5表達(dá)水平上調(diào)具有重要作用，這可通過上述依賴IgE的肥大細(xì)胞和EOS激活、脫顆粒和傳遞抗原等效應(yīng)，促進(jìn)IL-5的合成和釋放，或者說IgE的高表達(dá)對EOS自分泌IL-5有促進(jìn)作用，從而使鼻息肉中EOS浸潤聚集增加。在鼻息肉形成的初始階段，T細(xì)胞是IL-5的主要來源，隨著鼻息肉的生長、發(fā)展，EOS替代T細(xì)胞而成為IL-5的主要來源。
綜上所述，IgE在鼻息肉中高表達(dá)，表明局部變態(tài)反應(yīng)存在于鼻息肉中，它對鼻息肉中IL-5的表達(dá)上調(diào)具有重要作用；IgE與鼻息肉中高表達(dá)的IL-5通過不同的方式對鼻息肉中EOS的浸潤聚集具有重要作用。使EOS進(jìn)一步增加聚集，以致?lián)p傷上皮細(xì)胞黏膜固有層，黏膜固有層疝出導(dǎo)致息肉再次形成。
參考文獻(xiàn)
1 Bachert C，Gevaert P，Holtappels G，et al.Nasal polyps:from cytokines growth.Am J Rhinol，2000，14:279-290.
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[關(guān)鍵詞] 多發(fā)性骨髓瘤；免疫固定電泳；免疫球蛋白；血清蛋白電泳
[中圖分類號] R446.6[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號] 1673-7210（2010）10（b）-064-02
Laboratory diagnosis and evaluation of 78 cases of multiple myeloma
HUANG Cuibo
(Department of Clinical Laboratory, the National Hospital of Guangxi Zhuang Autonumous Region, Nanning 530001, China)
[Abstract] Objective: To evalute the diagnostic value of serum immunofixation electrophoresis (IFE), serum protein electrophoresis and immunoglobulin assay in the mutiple myeloma (MM). Methods: Serum sample from 78 patients with MMwere detected and compared by IFE, serum protein electrophoresis and immunoglobulin assay. Results: 78 patients with MM of IFE were positive. M belt appeared in 72 serum samples, in which IgG, IgA, IgM, free light chain and double chain type were 52.6%,29.5%,1.3%,15.1% and 2.5%. The major M protein of IgG and IgA was κ type and 12 patients with renal insufficiency were subject to λ type. Content of immunoglobulin and light chain type increased obviously, accompanying with else abnormal component. Conclusion: Serum protein immunofixation electrophoresis can be valuable to the diagnosis of MM with accurate type for M protein, good specificity, high sensibility, at the same time decrease missed diagnosis and misdiagnosis.
[Key words] Multiple myeloma; immunofixation electrophoresis; Immunoglobulin; Serum protein electrophoresis
M蛋白是多發(fā)性骨髓瘤（MM）的特征之一，它是由單細(xì)胞系漿細(xì)胞株所合成的單一免疫球蛋白，免疫固定電泳（IFE）是免疫球蛋白增殖病鑒定的一項(xiàng)新技術(shù)，它包括瓊脂凝膠電泳和免疫沉淀兩個(gè)過程的操作，它能對M蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確分型和鑒定。筆者將78例多發(fā)性骨髓瘤患者血清進(jìn)行血清蛋白電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白測定，現(xiàn)分析如下：
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本來源
2007年1月～2009年12月在我院住院的多發(fā)性骨髓瘤患者78例，按WHO制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)確診，其中，男54例，女24例；男女比例為2.25∶1；最小年齡33歲，最大年齡83歲，中位年齡57歲。其中12例以腎功能不全入院，后確診為多發(fā)性骨髓瘤。
1.2 方法
①血清蛋白電泳：采用法國Sebia Hydrasys全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)進(jìn)行電泳和掃描。②免疫固定電泳：采用法國Sebia Hydrasys全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)及原裝配套試劑盒，取按操作規(guī)程稀釋的患者血清10 μl加入點(diǎn)樣梳內(nèi)，經(jīng)瓊脂糖凝膠板電泳后，在每份樣本的6個(gè)泳道上分別加入抗IgG，抗IgA，抗IgM，抗KAP，抗LAM血清10.5 μl。孵育，固定，沉淀蛋白，吸去多余的血清，干燥，酸紫染色，脫色，烘干，觀察結(jié)果。③免疫球蛋白含量測定：采用美國德靈公司生產(chǎn)的BN2特種蛋白分析儀及原裝配套試劑盒，利用免疫散射比濁法進(jìn)行測定。
2 結(jié)果
78例多發(fā)性骨髓瘤分型結(jié)果：IgG占52.6%，IgA占29.5%，IgM占1.3%，游離輕鏈型占15.1%，其中IgG，IgA型以κ型為主。首診以腎功能不全入院的12例患者中，IgG λ型6例，IgA λ型3例，IgG κ型2例，LAM型1例，λ型占了75%。
78例多發(fā)性骨髓瘤血清免疫固定電泳檢出率均為100.0%，血清蛋白電泳的檢出率為92.3%，其中IgA 和輕鏈型血清蛋白檢出率分別為82.0%和63.0%。因此免疫固定電泳的檢出率明顯高于血清蛋白電泳。
各型多發(fā)性骨髓瘤的免疫球蛋白定量結(jié)果見表1。表1顯示同型的免疫球蛋白顯著升高。
表1 各型多發(fā)性骨髓瘤的免疫球蛋白定量結(jié)果(mg/dl)
Tab.1Quantitative results of various types of multiple myeloma immunoglobulin (mg/dl)
3 討論
多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞病中最常見的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率近年有逐漸上升趨勢，其免疫學(xué)特征表現(xiàn)為血清及尿中出現(xiàn)M蛋白、血清免疫球蛋白明顯降低。增生的漿細(xì)胞浸潤及其所生成的產(chǎn)物可引起一系列器官功能障礙，臨床多有骨痛、溶骨損害、貧血、腎功能不全、高鈣血癥等表現(xiàn)[1]。患者多以骨痛、腎病等繼發(fā)病就診，常被誤診為骨折、腎小球腎炎等疾病。據(jù)不同醫(yī)院統(tǒng)計(jì)資料分析，誤診率可達(dá)54.00%～69.11%[2]。在我院確認(rèn)的78例多發(fā)性骨髓瘤中，其中12例是以腎功能不全入院，3例是以骨折入院后經(jīng)血清免疫固定電泳、血清蛋白電泳、免疫球蛋白測定及骨髓細(xì)胞學(xué)檢查確診為多發(fā)性骨髓瘤。在這12例以腎功能不全入院的患者中，9例是λ型占75%。多發(fā)性骨髓瘤中，λ鏈腎損害發(fā)生率高于κ鏈，所有尿中排泌本-周蛋白的患者均發(fā)展至腎損害[3]，本組實(shí)驗(yàn)與文獻(xiàn)報(bào)道一致。因此對腎功能不全者應(yīng)做免疫固定電泳檢測以避免誤診或漏診，同時(shí)對免疫固定電泳為λ型的患者應(yīng)密切關(guān)注其腎臟功能的損傷。
血清蛋白電泳雖然具有簡單、快速、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)，但在多發(fā)性骨髓瘤出現(xiàn)M蛋白早期或非惡性單克隆γ球蛋白增多時(shí)，多克隆性免疫球蛋白常不減低，單克隆性蛋白因含量低，在血清蛋白電泳中M蛋白峰弱或隱含于正常β或γ區(qū)帶而被忽略。另外輕鏈病和重鏈病的M成分在蛋白電泳圖上通常不明顯，在血清蛋白電泳中不一定出現(xiàn)M帶，易造成漏診，此時(shí)應(yīng)進(jìn)行免疫固定電泳，因免疫固定電泳靈敏度為0.5～1.5 g/L，其靈敏度高于血清蛋白電泳。在本組實(shí)驗(yàn)中，血清蛋白電泳檢出率為92.3%，其中輕鏈型檢出率僅占63.0%，IgA型檢出率為82.0%，免疫固定電泳檢出率均為100.0%，檢出率明顯高于血清蛋白電泳，而且免疫固定電泳能對M蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確分型。M蛋白的分型對多發(fā)性骨髓瘤的診斷和鑒別診斷、預(yù)后及治療具有重要意義。由于不同的免疫球蛋白類型會(huì)出現(xiàn)不相同的臨床結(jié)果[4]。免疫固定電泳能有效地減少漏診，同時(shí)能快速地為臨床提供確診依據(jù)。
多發(fā)性骨髓瘤是單克隆漿細(xì)胞惡性增殖，產(chǎn)生的免疫球蛋白是均一的單克隆性，呈同一型、同一亞型、同一基因型。惡性漿細(xì)胞的增生，抑制正常免疫球蛋白的產(chǎn)生，因此M蛋白所屬免疫球蛋白顯著增高（大多在30 g/L以上）[5]。由表1可知，不同類型的多發(fā)性骨髓瘤中，同型的免疫球蛋白明顯升高，其他各種免疫球蛋白正常或相對降低。M蛋白的數(shù)量反映腫瘤容量的大小和單克隆增生的程度，而免疫球蛋白定量測定有助于確定M蛋白的類別及數(shù)量。因此，多發(fā)性骨髓瘤患者應(yīng)進(jìn)行免疫固定電泳對M帶準(zhǔn)確分型后，測定免疫球蛋白含量有助于臨床觀察療效。
免疫固定電泳技術(shù)是一種特異、靈敏及分辨率高的快速分離及鑒別單克隆蛋白的方法，它具有比骨髓細(xì)胞學(xué)檢查更簡單、快速的優(yōu)勢。因此免疫固定電泳是快速鑒別與診斷多發(fā)性骨髓瘤的最理想的方法，同時(shí)免疫球蛋白的測定能進(jìn)一步印證分型結(jié)果，并能給臨床觀察療效提供有利的依據(jù)。
[參考文獻(xiàn)]
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[4]Klouche M, Bradwell AR, Wilhelm D, et al. Subclass typing of IgG paraproteins by immunofixation electrophoresis [J]. Clin Chem,1995,41(10):1475-1479.
近日筆者遇上這么一個(gè)病人：她因?yàn)樵诋a(chǎn)前檢查中發(fā)現(xiàn)患有乙肝，其丈夫堅(jiān)持一定要其引產(chǎn)，理由是乙肝會(huì)傳染給腹中胎兒。那么問題有沒有如此嚴(yán)重呢?
患了乙型肝炎或是乙肝病毒攜帶者的媽媽，她們所生的嬰兒有40％以上可因垂直傳播而染上乙肝病毒。若媽媽的e抗原陽性或是其他復(fù)制指標(biāo)陽性，則嬰兒染上乙肝病毒的機(jī)會(huì)更大，可達(dá)90％以上。那么，是不是這樣的媽媽就沒有辦法保護(hù)她們的孩子呢?當(dāng)然不是。
目前，臨床上已采取這樣的方法乙肝媽媽在懷孕的最后3個(gè)月里，每月分別注射乙肝高效價(jià)免疫球蛋白(HBIG)200國際單位，新生兒在出生后24小時(shí)內(nèi)，倘若條件允許，則最好在6小時(shí)內(nèi)注射乙肝高效價(jià)免疫球蛋白200國際單位，15天后再注射200國際單位的乙肝高效價(jià)免疫球蛋白，然后分別于出生后1個(gè)月、2個(gè)月和7個(gè)月注射基因乙肝疫苗10微克。倘若是e抗原陽性的母親，則基因乙肝疫苗的注射劑量為20微克。注射部位為上臂三角肌皮下或肌肉。據(jù)統(tǒng)計(jì)，使用這種接種方法，乙肝或乙肝病毒攜帶者的母親所生的新生兒保護(hù)率可達(dá)95％。
但是，我們?nèi)赃z憾地看到，仍有5％左右的乙肝和乙肝病毒攜帶者媽媽所生的嬰兒，在進(jìn)行免疫接種后半年以上仍不產(chǎn)生乙肝表面抗體(抗HBs)，或僅產(chǎn)生低滴度的乙肝表面抗體(小于10國際單位／升)。這種情況即屬于免疫失敗，這部分嬰兒仍可感染乙肝病毒。這種免疫失敗的原因可以從以下幾個(gè)方面分析：
宮內(nèi)感染：胎盤受到某些病理和生理影響，通透性發(fā)生改變，乙肝病毒可通過胎盤而侵入胎兒體內(nèi)。由于胎兒尚未發(fā)育完全，很容易產(chǎn)生免疫耐受，或乙肝病毒基因與胎兒肝細(xì)胞基因發(fā)生整合，這種胎兒分娩后雖經(jīng)乙肝高效價(jià)免疫球蛋白及乙肝疫苗注射，仍不能使已有的感染消除。
免疫功能低下：免疫功能低下的人，乙肝表面抗體產(chǎn)生比正常人低。如果乙肝病毒潛入白細(xì)胞、肝臟或其他組織中，則乙肝高效價(jià)免疫球蛋白不能中和它，當(dāng)乙肝表面抗體滴度降低后，乙肝病毒會(huì)再次出現(xiàn)于血中。
乙肝病毒低水平感染：乙肝病毒低水平感染，也可以造成免疫失敗。
基因變異：乙肝病毒基因變異也可以造成免疫失敗。疫苗注射后雖可產(chǎn)生乙肝表面抗體(抗HBs)。但同時(shí)乙肝表面抗原也出現(xiàn)陽性。
人體遺傳差異：有研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞抗原(HLA)免疫反應(yīng)相關(guān)區(qū)(DR區(qū))參與了乙肝表面抗原(HBsAg)的抗體反應(yīng)。如果某些人受遺傳因素影響，該基因區(qū)變異或缺損，就可對乙肝疫苗呈無反應(yīng)狀態(tài)，以后仍可遭到乙肝病毒水平傳播。
其他因素：如被丙肝病毒和人類免疫缺陷病毒(HIV)感染者，對乙肝疫苗反應(yīng)一般很差。另外由于乙肝疫苗免疫原性不足、劑量不足等原因也可造成免疫失敗。
對于以上種種情況所致的免疫失敗者，宜進(jìn)行重復(fù)接種，再補(bǔ)種一次基因乙肝疫苗，最終約有半數(shù)可出現(xiàn)有效免疫。
【關(guān)鍵詞】 六味地黃丸; 胃潰瘍; 免疫球蛋白; 白細(xì)胞介素-2; 中西醫(yī)結(jié)合療法
Abstract：ObjectiveTo explore the therapeutic effect and mechanism of Liuweidihuang pills.MethodsThe rats were randomly pided into 5 groups:A(normal control group)， B(gastric ulcer group induced by acetic acid)， C(ranitidine group)， D(Liuweidihuang pills group)and E(ranitidine cooperating with Liuweidihuang pills group). Determine the expression of immunoglobulin by SDS-PAGE technique， change of IL-2 by ELISA， and examine the index of ulcer. ResultsIn cellular immunity aspect：the level of IL-2 in serum of B group was significantly less than A group， IL-2 was increased by pharmacological treatment， group E was more remarkable than C and D groups. In human immunity aspect：compared with A group， groups B and C had no statistic difference in the expression of immunoglobulin (IgA，IgG，IgM).By treatment of Liuweidihuang pills， IgA and IgM were significantly higher than above three groups， and IgG elevated more remarkably. In therapeutic result aspect: index of ulcer was decreased significantly in Pharmacological treatment groups (C，D，E )， and therapeutic effect of E group was superior to C and D groups， and C group was superior to D group. ConclusionRanitidine is superior to Liuweidihuang pills in therapeutic effect of gastric ulcer， but Liuweidihuang pills can cure gastric ulcer in rats by increased immunologic function， by cooperating with ranitidine， Liuweidihuang pills has certain auxiliary function to therapeutic effect of gastric ulcer.
Key words：Liuweidihuang pills; Gastric ulcer; Immunoglobulin; IL-2; Chinese traditional medicine
抑制胃酸分泌是最常用的促進(jìn)潰瘍愈合手段，盡管H2 受體拮抗劑及質(zhì)子泵抑制劑使治愈率明顯提高，但病情容易反復(fù)，難以痊愈。消化性潰瘍中醫(yī)辨證多有不同程度的脾氣虧損，導(dǎo)致患者機(jī)體免疫功能發(fā)生障礙，處于相對抑制狀態(tài)[1]。大量研究表明，六味地黃丸具有補(bǔ)益脾胃的功效，對機(jī)體免疫系統(tǒng)具有明顯的調(diào)節(jié)作用[2]。因此，本實(shí)驗(yàn)據(jù)此采用在西藥抗酸藥治療方案的基礎(chǔ)上，辨證加服中藥六味地黃丸，觀察六味地黃丸對大鼠乙酸胃潰瘍模型的治療作用，探索其輔助抗酸藥物治療胃潰瘍的機(jī)理。
1 材料
SD大鼠30只，雌雄各半，體重(180±20)g，由浙江大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;六味地黃，河南省宛西制藥股份有限公司產(chǎn)品;雷尼替丁膠囊，杭州民生制藥有限公司產(chǎn)品;免疫球蛋白試劑盒，四川邁克科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品;IL-2 ELISA試劑盒為RD公司產(chǎn)品。
2 方法
2.1 動(dòng)物模型建立及分組取大鼠24只，參照Okabe乙酸誘導(dǎo)法[3]，大鼠禁食16 h，3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，劍突下作腹正中切口，分離出胃，以內(nèi)徑4 mm的玻璃管按在胃前壁胃小彎角切跡下方約5 mm處的漿膜面上，向玻璃管內(nèi)注入100%乙酸0.1 ml，持續(xù)1 min，用生理鹽水棉簽擦拭2次，輕拉大網(wǎng)膜覆蓋在乙酸涂抹面，將胃還納入腹腔，縫合腹壁。造模3d后，隨機(jī)分為4組，每組6只：模型對照組(以生理鹽水等量灌服)、六味地黃丸組(20g·kg-1灌服)、雷尼替丁組(30 mg·kg-1灌服)和六味地黃丸加雷尼替丁組(六味地黃丸20 g·kg-1加雷尼替丁30 mg·kg-1灌服)。另取6只未造模大鼠作為正常對照組，予等量生理鹽水，各組動(dòng)物均每d給藥，7 d后提取標(biāo)本。
2.2 觀察指標(biāo)
2.2.1 潰瘍指數(shù)和抑制率分別結(jié)扎賁門、幽門端后取胃，向胃內(nèi)注射中性甲醛溶液固定胃壁15 min，然后沿胃大彎剪開，測定潰瘍指數(shù)和抑制率。以潰瘍面積作為潰瘍指數(shù)，潰瘍面積(S)=1/4×潰瘍長徑(DL)×短徑(DS)×π;抑制率(%)=(對照組損傷指數(shù)-給藥組損傷指數(shù))/對照組損傷指數(shù)×100%。
2.2.2 血清免疫球蛋白及IL-2含量的檢測大鼠眼眶采血2 ml，靜置30 min，3 000 r/min離心30 min，取血清放入20℃冰箱保存待測。采用單向免疫擴(kuò)散法檢測血清IgA，IgG，IgM含量，ELISA法檢測血清IL-2的變化。
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均以±s表示，做差異的顯著性分析，P
3 結(jié)果
3.1 六味地黃丸對各組大鼠潰瘍指數(shù)及潰瘍抑制率的影響 肉眼觀察，正常對照組大鼠胃粘膜光滑，未見充血、水腫及潰瘍灶;模型對照組，潰瘍灶與潰瘍邊緣有明顯分界，侵犯粘膜并穿越粘膜下層或深達(dá)肌層，潰瘍灶表面覆蓋白苔，邊緣充血水腫，呈典型的胃潰瘍病理改變(圖1a)。六味地黃丸組(圖1b)、雷尼替丁組(圖1c)和六味地黃丸加雷尼替丁組(圖1d)比模型對照組潰瘍指數(shù)均明顯降低(P
3.2 六味地黃丸對各組大鼠血清免疫球蛋白及IL-2的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對照組、模型對照組和雷尼替丁組間血清免疫球蛋白IgA，IgG，IgM差異無顯著意義(P>0.05);六味地黃丸組、六味地黃丸加雷尼替丁組與上述3組相比較，IgA、IgM含量明顯升高(P
與正常對照組比較，aP
4 討論
制酸劑在臨床上是治療胃潰瘍的常用藥物，但是在潰瘍病的發(fā)生過程中，患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能發(fā)生障礙，表現(xiàn)為免疫功能抑制、局部防御功能減弱，易引起胃酸、胃蛋白酶和幽門螺旋桿菌等的侵襲，發(fā)生潰瘍[1]。消化性潰瘍中醫(yī)辨證多屬脾虛肝郁、氣滯血瘀，潰瘍患者均有不同程度的脾氣虧損，機(jī)體免疫功能紊亂，脾虛胃潰瘍的大鼠動(dòng)物模型發(fā)現(xiàn)胃粘膜局部免疫反應(yīng)功能低下[2]。六味地黃丸具有“補(bǔ)腎為主，兼補(bǔ)肝脾，三補(bǔ)三泄，補(bǔ)泄結(jié)合”的功效，中醫(yī)的“腎”功能與下丘腦-垂體-腎上腺功能密切相關(guān)，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)理論極其相似[4]。同時(shí)大量的研究表明，六味地黃丸對細(xì)胞免疫和體液免疫均具有促進(jìn)和調(diào)節(jié)作用[5，6]。因此以六味地黃丸輔助治療胃潰瘍符合中醫(yī)辨證用藥的思路。
人體的免疫包括細(xì)胞免疫和體液免疫，細(xì)胞免疫是以T細(xì)胞為介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，IL-2是調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能最主要的細(xì)胞因子之一，IL-2參與調(diào)節(jié)T細(xì)胞的兩個(gè)不同亞群TH1/TH2細(xì)胞間的平衡[7]，促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，從而增強(qiáng)免疫功能。臨床研究表明胃潰瘍患者血清IL-2水平顯著低于正常人，提示患者T細(xì)胞增殖分化受到抑制，細(xì)胞免疫功能低下[8]。本研究結(jié)果顯示，大鼠模型對照組IL-2含量顯著低于正常，與以上研究結(jié)果相一致。六味地黃丸及六味地黃丸輔助抗酸藥藥物治療后，IL-2含量明顯升高，雖其數(shù)值未能回復(fù)至正常水平，但仍然可以表明六味地黃丸具有改善機(jī)體免疫功能的作用。體液免疫抗體主要存在于血清中的丙種球蛋白，包括IgA，IgG，IgM等，免疫球蛋白可以與免疫復(fù)合物或感染抗原作用形成不溶物質(zhì)，引起單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的消除作用;充當(dāng)活化補(bǔ)體成分的受體，防止補(bǔ)體介導(dǎo)性免疫損傷;增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，提高耐藥菌的殺菌比例[9]。臨床研究表明，胃潰瘍患者血清免疫球蛋白含量與正常人相比無明顯變化[10]，但是應(yīng)用免疫球蛋白靜脈注射，對胃炎及胃十二指腸炎潰瘍患者具有療效[9]。在本實(shí)驗(yàn)中，正常對照組、模型對照組和雷尼替丁組間血清免疫球蛋白IgA，IgG，IgM含量無顯著差異，六味地黃丸能夠明顯升高IgA，IgG，IgM含量，其中IgG的升高最為顯著，而雷尼替丁對血清免疫球蛋白IgA，IgG，IgM含量無明顯影響。因此，六味地黃丸通過提高IL-2、免疫球蛋白IgA，IgG，IgM含量，提高細(xì)胞免疫和體液免疫水平、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫平衡，這可能是其治療胃潰瘍機(jī)制的一個(gè)重要方面。
綜上所述，制酸劑在大鼠乙酸胃潰瘍的治療中仍占主導(dǎo)地位，六味地黃丸通過提高細(xì)胞免疫和體液免疫水平，對大鼠乙酸胃潰瘍具有治療作用，在聯(lián)合抗酸藥藥物治療胃潰瘍中，對于提高療效有一定的輔助作用。本研究應(yīng)用中醫(yī)辨證施治傳統(tǒng)理論，通過中西醫(yī)結(jié)合的方法，探明六味地黃丸輔助抗酸藥藥物治療胃潰瘍的作用和機(jī)理，在促進(jìn)潰瘍愈合的治療中彌補(bǔ)了西藥的不足。但是六味地黃丸通過何種途徑提高血清中IL-2、免疫球蛋白IgA，IgG，IgM的水平，其在劑量、療程、優(yōu)化完善方劑及治療方案等方面還有待進(jìn)一步深入的研究。
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【關(guān)鍵詞】POEMS綜合征；心臟病變
POEMS綜合征是一組病因不明，以多系統(tǒng)器官受損為表現(xiàn)的漿細(xì)胞病或漿細(xì)胞異常增生綜合征，臨床比較少見，并以神經(jīng)系統(tǒng)病變?yōu)橥怀霰憩F(xiàn)[1-3]。我院在2010年4月收治1例以心臟病變?yōu)槭装l(fā)癥狀的POEMS綜合征患者，現(xiàn)報(bào)告如下。
1臨床資料
1.1病歷摘要
患者，男性， 63歲。入院前8月無明顯誘因，出現(xiàn)活動(dòng)后胸悶，胸骨后氣堵干，自行休息3～5min左右緩解，暈厥，黑朦摔倒在地，約2min后自行清醒，未予重視。之后癥狀進(jìn)行性加重，于3個(gè)月前就診我院心內(nèi)科，診為“亞急性心肌梗死”經(jīng)拜阿司匹林，氯吡格雷，達(dá)肝素鈉，單硝酸異山梨酯擴(kuò)冠，阿托伐他汀鈣"等治療，癥狀好轉(zhuǎn)出院。14天前出現(xiàn)胸骨中下段悶痛，胸骨后氣堵感加重，靜息狀態(tài)仍感氣促。稍活動(dòng)氣促明顯，夜間喜高枕臥位（大約2～3枕），偶有夜間陣發(fā)性呼吸困難。查體：T 36.0℃ 、 P 50次/min、R 12次/min、BP 110/70mmHg 。神清，全身皮膚及黏膜無黃染，淺表淋巴結(jié)未觸及腫大，口唇無紫紺，伸舌居中，頸軟，頸靜脈稍充盈無怒張，雙中下肺可聞及濕性音，心界稍向左下擴(kuò)大，心率50次/min，律齊，S1低鈍，S2中強(qiáng)，各瓣膜聽診區(qū)未聞及雜音，腹平軟，無壓痛、反跳痛，肝脾肋下未觸及，肝腎區(qū)無扣擊痛，移動(dòng)性濁音陰性。雙下肢輕度浮腫，雙側(cè)腱反射減弱，雙側(cè)巴氏征、克氏征、布氏征陰性。
1.2實(shí)驗(yàn)室輔助檢查
血常規(guī)：正常；生化：尿酸576μmol/L，空腹血糖7.21mmol/L，糖化血紅蛋白8.58%，總蛋白75.1g/L，球蛋白39.2g/L，血沉44mm/h，超敏C反應(yīng)蛋白3.94mg/dl；血清蛋白電泳：γ球蛋白25.8g/L，β球蛋白6.20g/L。免疫球蛋白：IgG26.70g/L，免疫球蛋白輕鏈K5.14g/L，免疫球蛋白輕鏈λ31.50g/L；內(nèi)分泌檢查：促甲狀腺激素（TSH）4.91uIu/ml，性激素水平正常，免疫全套正常，肌鈣蛋白（TNT）0.14ng/mL，腦利鈉肽（BNP）7290.00pg/mL。乙肝病毒表面抗原陽性，乙肝病毒e抗體陽性，乙肝病毒中心抗體陽性。骨髓細(xì)胞學(xué)檢查：漿細(xì)胞占9.0%；骨髓病理提示：骨髓造血組織增生活躍，部分脂肪組織液性壞死，纖維組織局灶性增生；腹部B超示：肝脾腫大，腹腔少量積液，頭顱平片+骨盆正位片示未見明顯病變；胸部X線片示：心影增大，以左心室增大為主，主動(dòng)脈粥樣硬化；心臟彩超示：室間隔及左室后壁均增厚，主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全+，二尖瓣關(guān)閉不全2+，三尖瓣關(guān)閉不全3+，肺動(dòng)脈壓力增高。左室舒張功能減退，心包少-中量積液；頸動(dòng)脈彩超示：雙側(cè)頸動(dòng)脈粥樣硬化；心電圖示：竇性心律，1度房室傳導(dǎo)阻滯，Ⅰ、avL、V4～V6的T波低平，U波高大；冠脈造影示：左前降支中段可見冠脈肌橋，收縮期管腔狹窄達(dá)50%，右冠狀動(dòng)脈近段狹窄約40%。根據(jù)Nakanishi 1984年提出POEMS綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)，本例患者最后診斷為POEMS綜合征，行VAD方案化療。出院4個(gè)月后因多器官功能衰竭死亡。
2討論
POEMS綜合征是以多發(fā)性周圍神經(jīng)病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的多系統(tǒng)受損的征侯群[3-5]。臨床常表現(xiàn)為：多發(fā)性神經(jīng)病（Polyneuropathy，P）、臟器腫大（Organomegaly，O）、內(nèi)分泌病變（Endocrinopathy，E）、血清中出現(xiàn)M蛋白（M protein，M）以及皮膚病變（Skin changes，S）。本病例在入院前8個(gè)月曾因表現(xiàn)為心臟病變而被誤診為“亞急性心機(jī)梗死”。最后根據(jù)其雙側(cè)腱反射減弱，雙下肢浮腫，肝脾腫大，心包、腹腔積液，內(nèi)分泌指標(biāo)改變，免疫球蛋白及輕鏈異常以及骨髓細(xì)胞學(xué)檢查，才確診為POEMS綜合征。由于該綜合征臨床上少見，癥狀多樣化且復(fù)雜，尤以心臟病變?yōu)槭装l(fā)表現(xiàn)者更為罕見。因此，臨床醫(yī)師在詢問病史和查體時(shí)應(yīng)盡可能詳盡，當(dāng)有疑及POEMS綜合征時(shí)，應(yīng)盡快做相關(guān)的生化指標(biāo)和骨髓細(xì)胞學(xué)檢查，以避免誤診和延遲治療。
參考文獻(xiàn)
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HBV基因組（HBV-DNA）由雙鏈不完全環(huán)形結(jié)構(gòu)的DNA組成，含3200個(gè)核苷酸。由于其宿主范圍較小，體外細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒尚未成功。近年隨著分子克隆技術(shù)的應(yīng)用及體外培養(yǎng)細(xì)胞系轉(zhuǎn)染的成功，對HBV復(fù)制過程有了進(jìn)一步的了解。HBV-DNA分為負(fù)鏈（長鏈）及正鏈（短鏈）所組成。其負(fù)鏈有4個(gè)開放讀碼框架（ORF）：①S基因區(qū)，由S基因，前S2(pre-S2)基因、前S1(pre-S1)基因組成。②C基因區(qū)，由前C基因和C基因組成。③P基因區(qū)，編碼HBV-DNAp，并具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性；④X基因區(qū)，編碼HBxAg，并具有激活HBcAg基因的作用。
HBV復(fù)制過程：HBV基因組雖為雙鏈環(huán)形DNA，但其復(fù)制過程有RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒的特性，需要逆轉(zhuǎn)錄酶活性產(chǎn)生RNA/DNA中間體，再繼續(xù)進(jìn)行復(fù)制。其過程為：①在由病毒和（或）細(xì)胞來源的DNA-p作用下，正鏈?zhǔn)紫妊由煨纬晒矁r(jià)閉合環(huán)狀DNA（DNA）。②以此為模板，通過宿主肝細(xì)胞酶的作用轉(zhuǎn)錄成復(fù)制中間體。③再以此為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，形成第1代和第2代DNA。此雙鏈DNA部分環(huán)化，即完成HBV-DNA的復(fù)制。
HBV突變株研究：由于HBV復(fù)制方式有其特殊性，即mRNA中間體進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄過程中，由于缺乏校對酶易發(fā)生HBV-DNA序列內(nèi)變異。①S區(qū)基因突變導(dǎo)致HBsAg亞型改變及血清HBsAg阻性、HBV-DNA陽性乙型肝炎，使臨床診斷困難。一些人接種乙肝疫苗后產(chǎn)生抗-HBs，但仍可被HBV的S區(qū)基因突變株感染，而逃避宿主的免疫反應(yīng)。②前C基因區(qū)突變與HBV感染后免疫及重型肝炎發(fā)病有關(guān)。③P區(qū)基因突變可致HBV復(fù)制減弱或停止。④X區(qū)基因突變可使HBxAg合成障礙。
乙型肝炎的主要發(fā)病機(jī)制是肝細(xì)胞受乙肝病毒入侵后，并不直接引發(fā)肝細(xì)胞病變，乙肝病毒復(fù)制的表面抗原、e抗原和核心抗原都釋放在肝細(xì)胞膜上，激發(fā)人體的免疫系統(tǒng)辨認(rèn)，并發(fā)生反應(yīng)，這種在細(xì)胞膜上發(fā)生的抗原、抗體反應(yīng)可造成肝細(xì)胞的損傷和破壞，從而引起一系列的臨床癥狀。
乙肝病毒的抗原與肝細(xì)胞膜結(jié)合要產(chǎn)生新的抗原，叫肝細(xì)胞特異性抗原(LSP)。人體免疫系統(tǒng)在產(chǎn)生肝細(xì)胞膜特異性抗體的同時(shí)會(huì)刺激K細(xì)胞（殺傷細(xì)胞）K細(xì)胞通過肝細(xì)胞膜上的Fe受體與肝細(xì)胞膜的特異性抗體復(fù)合物結(jié)合，對肝細(xì)胞起殺傷作用，同時(shí)消滅部分病毒，（稱為ADCC）。當(dāng)人體免疫反應(yīng)不足時(shí)，抵抗力降低，這種引起消滅部分病毒的作用時(shí)強(qiáng)時(shí)弱，以致不能完全清除乙肝病毒，造成慢性肝細(xì)胞病變就周而復(fù)始的持續(xù)存在，導(dǎo)致疾病遷延不愈。由于乙型肝炎的特殊發(fā)病機(jī)制使其不容易治療，所以搞好乙型肝炎的預(yù)防特別重要。
特異性免疫預(yù)防
及時(shí)應(yīng)用乙肝免疫球蛋白（HBIC）：乙肝免疫球蛋白（HBIC）是由含抗-HBS（表面抗體）的人血清濃縮純化而成。乙肝免疫球蛋白和一般蛋白不同，完全是專門針對乙肝的表面抗體。它可以在血液中或細(xì)胞液中、或在黏膜表面與侵入體內(nèi)的乙肝病毒起中和作用，并逐步清除乙肝病毒。乙肝病毒入侵人體后，在肝細(xì)胞內(nèi)繁殖而乙肝免疫球蛋白（HBIC）只能在液體中而不能進(jìn)入肝細(xì)胞，所以它只能在乙肝病毒進(jìn)入肝細(xì)胞之前與病毒中和發(fā)揮作用。所以乙肝免疫球蛋白（HBIC）的注射時(shí)間非常重要，雙陽性母親的新生兒應(yīng)在出生后6小時(shí)以內(nèi)注射，注射的越早效果越好，出生48小時(shí)注射時(shí)效果明顯降低，如果乙肝病毒宿主肝細(xì)胞內(nèi)，即使加大劑量注射液是無效的。發(fā)生在醫(yī)療損傷的醫(yī)務(wù)人員，應(yīng)在暴露與傳染性血液后24小時(shí)內(nèi)，和1個(gè)月后各注射1次乙肝免疫球蛋白（HBIC）。
乙肝疫苗預(yù)防：乙肝疫苗預(yù)防是根本途徑。自1986年起我國已經(jīng)大批量生產(chǎn)血液性乙肝疫苗，經(jīng)上億次接種證明了該疫苗的免疫原性且安全。
（1）接種對象：所有新生兒、學(xué)齡前兒童為主要對象，其次為乙肝患者和表面表面抗原（HBsAg）攜帶者和密切接觸血液的人員，如醫(yī)務(wù)人員、血液透析者與意外受乙肝病毒感染者。
（2）免疫途徑：乙肝疫苗的免疫途徑有肌肉和皮下注射可分為臂三角肌和臀部兩種，一般不主張臀部注射，因?yàn)橥尾恐矩S富妨礙乙肝疫苗的吸收，不能誘導(dǎo)產(chǎn)生足夠的表面抗體，故以臂三角肌為宜。對嬰兒可接種大腿前外側(cè)肌肉，皮下接種乙肝疫苗適宜血友病患者，可防止肌肉注射引起的血腫。
（3）免疫程序劑量：①對表面抗原陰性母親的新生兒可采取0、1、6月齡程序，每次10μg。②表面抗原和e抗原（HBsAg）和（HBeAg）雙陽性的母親所生的新生兒應(yīng)予生后6小時(shí)內(nèi)注射乙肝免疫球蛋白（HBIC）1支，生后1個(gè)月再注射1支乙肝免疫球蛋白（HBIC）。2、3、6月齡時(shí)各注射1支20μg的乙肝疫苗。③對單純表面抗原陽性母親的新生兒，應(yīng)0、1、6月齡接種20μg的乙肝疫苗。④急性乙肝病毒感染者和密切接觸者，應(yīng)檢查表面抗原、表面抗體和核心抗體（HBsAg）、抗-HBS和抗-HBC三項(xiàng)均為陰性者，為易感者，按0、1、6個(gè)月程序接種30、10、10μg乙肝疫苗。
非特異性預(yù)防
主題詞 抗乙肝免疫核糖核酸
透天涼 帶病原狀態(tài)/針灸療法 肝炎,乙型/針灸療法T
多年來,治療由于母嬰垂直傳播而成慢性乙型肝炎病毒(HBV)攜帶者,欲使乙肝病毒表面抗原(HBsAg)陰轉(zhuǎn),較因?yàn)槠渌鼈魅就緩剿轮瓾BsAg陽性者,著實(shí)難矣。筆者1996年1～8月應(yīng)用"透天涼"針刺法聯(lián)合抗乙肝免疫核糖核酸(抗HBViRNA)專項(xiàng)治療因垂直感染的慢性HBV攜帶者(ASC)64例,并與單用抗HBViRNA進(jìn)行對照,其結(jié)果差異有明顯意義(P
1 臨床資料
共觀察128例,男86例,女42例;年齡14～27歲;病程最短13.5年,最長26年,平均為18.5年。所選病例之母或患有多年慢性乙型肝炎(CPHB),或?yàn)锳SC,而且血清HBsAg及乙肝病毒e抗原(HBeAg)為雙陽性。其中以母親為主體的家庭HBsAg聚集現(xiàn)象的84例,另有27例患者之父HBsAg及HBeAg亦為雙陽性。本組病例大多無臨床癥狀及陽性體征,就診前查肝功能均正常。其乙肝病毒標(biāo)志物(HBVM)檢測結(jié)果:應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)戏磻?yīng)(PCR)法測得全部病例血清乙肝病毒脫氧核糖核酸(HBVDNA)均為陽性。其中HBsAg、HBeAg及乙肝病毒核心抗體(抗HBc)陽性者56例;HBsAg、乙肝病毒e抗體(抗HBe)及抗HBc陽性者72例。按就診日期先后隨機(jī)分為治療及對照兩組,每組64例。兩組于治療前均分別檢測了免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(LTT),其中治療組免疫球蛋白有36例低于正常值,15例略高于正常值,余13例正常。LTT有41例低于正常值,23例正常。對照組免疫球蛋白有32例低于正常值,14例略高于正常值,余18例正常。LTT有39例低于正常值,余25例正常。兩組臨床資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理P>0.05,有可比性。
2 治療方法治療組肌肉注射抗HBViRNA(北方制藥廠生產(chǎn))3 mg/次,每周2次;另采用"透天涼"手法針刺足三里、內(nèi)關(guān)、合谷穴,得氣后須"動(dòng)留針"(即每隔5分鐘使用透天涼手法行針1次),30分鐘后起針,每日1次。對照組肌肉注射抗HBViRNA3 mg/次,每周2次。兩組均3個(gè)月為一療程,兩個(gè)療程后即停止治療。每個(gè)病例均于停止治療后隨訪1年,在觀察期間兩組均停止使用任何抗病毒、護(hù)肝及免疫調(diào)節(jié)劑等藥物。
3 治療效果
兩組治療1療程后血清HBVM各項(xiàng)陰轉(zhuǎn)率為14%～26%,且兩組間差異無明顯意義,P>0.05。治療2個(gè)療程及停止治療1年后隨訪情況見表1、表2。
從表1可以看出治療2個(gè)療程后,血清HBVM陰轉(zhuǎn)率治療組已明顯優(yōu)于對照組,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理P
治療2個(gè)療程以后,兩組均復(fù)檢了免疫指標(biāo)。治療組中免疫球蛋白原低于及略高于正常值者均恢復(fù)至正常,原正常者無變化;LTT原低于正常值者亦皆恢復(fù)至正常,原正常者亦無變化。對照組免疫球蛋白及LTT原低于正常值者部分病例恢復(fù)至正常,原正常及高于正常值者無明顯變化。
4 體會(huì)大多學(xué)者認(rèn)為,ASC之所以持續(xù)HBsAg陽性,主要是宿主產(chǎn)生免疫耐受現(xiàn)象。因此,如何促使機(jī)體產(chǎn)生正常的免疫應(yīng)答,是清除HBV的重要手段。有文獻(xiàn)報(bào)道,應(yīng)用"透天涼"法針刺足三里、內(nèi)關(guān)、合谷穴,可以增強(qiáng)人體的免疫功能,亦可以調(diào)節(jié)人體的免疫狀態(tài)[1]。
本文治療組經(jīng)臨床驗(yàn)證,療效確切。對照組用藥后血清免疫指標(biāo)原增高者則未能得到改善。足三里是強(qiáng)壯穴,與內(nèi)關(guān)、合谷相配,確能補(bǔ)虛扶正,激發(fā)人體正氣,進(jìn)而祛除病邪。本文治療組其HBVM陰轉(zhuǎn)率無論近期或遠(yuǎn)期效果均優(yōu)于對照組,P
抗HBViRNA用于治療乙型肝炎曾一度被臨床醫(yī)生所認(rèn)可,由于其療效遜于干擾素等藥物,故近期有被冷落之勢。但該藥或改變給藥途徑[2],或與它法(如本文"透天涼"針刺法)聯(lián)合應(yīng)用,其效果仍不亞于其它抗病毒或免疫調(diào)節(jié)劑。"透天涼"針刺法是一種復(fù)式補(bǔ)瀉手法,是從《內(nèi)經(jīng)》針下寒的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的,其操作比較復(fù)雜,只有熟練掌握其基本要領(lǐng),方能達(dá)到預(yù)期的治療效果。
5 參考文獻(xiàn)
1 沈陽市中醫(yī)研究所針灸經(jīng)絡(luò)研究室.燒山火、透天涼對人體反應(yīng)的觀察.針灸雜志,1965;(1):41
2 蔡聰麟,等.大劑量抗乙肝免疫RNA腹腔注射治療慢乙肝的療效觀察.臨床肝膽病雜志,1998;(1):63
1 產(chǎn)前護(hù)理
1.1 加強(qiáng)圍生期保健
孕婦在妊娠20周左右需做乙肝六項(xiàng)化驗(yàn)。凡孕婦血清試驗(yàn)HbsAg(+)者應(yīng)在傳染科和產(chǎn)科醫(yī)生共同監(jiān)護(hù)下，平安度過孕期。做好產(chǎn)前檢查。如果HbsAg(+)者，需要進(jìn)一步檢查e抗原，核心抗體為新生兒接種疫苗做好準(zhǔn)備。同時(shí)定期復(fù)查肝炎病毒血清標(biāo)志物及肝功，密切觀察有無肝炎癥狀如乏力、惡心、厭油肝區(qū)痛等癥狀，如有以上癥狀隨時(shí)看醫(yī)生。
1.2 飲食護(hù)理
孕期加強(qiáng)營養(yǎng)滿足胎兒營養(yǎng)需要，孕婦應(yīng)多攝取高蛋白、高碳水化合物和高維生素食物。
1.3 HbsAg(+)母親在懷孕第7、8、9月份注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200IU，HBIG能起到宮內(nèi)阻斷作用，降低胎兒在官內(nèi)感染率。母嬰傳播是乙肝病毒傳播的主要途徑。母嬰傳播引起乙肝病毒感染約占嬰兒感染1/3。而官內(nèi)傳播是母嬰傳播的一種。乙肝免疫球蛋白直接中和母親血中游離病毒顆粒，降低母體外周血中HBV濃度，減少HBV胎盤傳播。孕期多次注射HBIG，抗-HBs通過胎盤到達(dá)胎兒體內(nèi)，使期在宮內(nèi)獲得被動(dòng)免疫，減少HBV宮內(nèi)感染。由于嬰兒T細(xì)胞功能尚未完全發(fā)育，對HbsAg有免疫耐受，容易成為慢性攜帶狀態(tài)。以后發(fā)展為肝硬化或原發(fā)性肝癌。因此HbsAg(+)孕婦在孕7、8、9月份注射HBIG尤為重要。
1.4 HbsAg(+)孕婦有肝功變化，有肝炎臨床癥狀者，產(chǎn)前護(hù)理如下。
1.4.1隔離
按乙型肝炎隔離。消化道隔離。孕婦用品、餐具應(yīng)專用。用品應(yīng)嚴(yán)格消毒處理。產(chǎn)科門診設(shè)有專用診查室，室內(nèi)物品按傳染科常規(guī)消毒處理。
1.4.2健康教育
對孕婦做好衛(wèi)生知識(shí)宣傳rqg。傳授衛(wèi)生防疫知識(shí)，向孕婦及家屬講解肝炎與母嬰的相互影響和利害關(guān)系。隔離可以避免傳染家人重要意義。
1.4.3妊娠早期妊娠早期患有急性肝炎。為癥狀輕者應(yīng)積極治療，可繼續(xù)妊娠。慢性活動(dòng)性肝炎妊娠后對母嬰威脅較大，故適當(dāng)治療后終止妊娠。
1.4.4妊娠中晚期盡量避免終止妊娠、避免手術(shù)、藥物對肝臟的影響，加強(qiáng)胎兒監(jiān)護(hù)，防治妊娠期高血壓疾病。避免妊娠延期或過期。
1.4.5患有急性肝炎孕婦，至少應(yīng)于肝炎痊愈后半年，最好兩年后懷孕。
1.5 加強(qiáng)心理護(hù)理
HbsAg(+)孕婦心理壓力大，擔(dān)心嬰兒健康，孕期是否平安度過，恐懼分娩過程。因患傳染疾病產(chǎn)生顧慮，精神緊張、焦慮，產(chǎn)生自卑心理。我們加強(qiáng)對孕婦心理護(hù)理，給其講解乙肝一些知識(shí)，胎兒知識(shí)，了解孕期保健、衛(wèi)生知識(shí)，了解分娩過程。
給孕婦以精神上安慰、支持、理解。疏導(dǎo)孕婦緊張情緒，消除思想顧慮，保持孕婦好心態(tài)，對當(dāng)母親充滿信心。
2 產(chǎn)后護(hù)理
2.1 隔離
孕婦住院應(yīng)住在隔離病房，以免交叉感染。餐具應(yīng)專用并進(jìn)行嚴(yán)格的終末消毒，應(yīng)有專用廁所。臨產(chǎn)及分娩應(yīng)有隔離待產(chǎn)室、產(chǎn)床。產(chǎn)后母嬰應(yīng)嚴(yán)格隔離，母親不要咀嚼食物給孩子吃防止因口腔粘膜破損而造成傳播。 轉(zhuǎn)貼于
2.2 心理護(hù)理
醫(yī)護(hù)人員應(yīng)主動(dòng)關(guān)心產(chǎn)婦，盡量排除因?qū)m縮引起緊張、恐懼及不適感，消除孕婦因隔離而引起孤獨(dú)和自卑的心理負(fù)擔(dān)，以促產(chǎn)程順利進(jìn)行。
2.3 密切觀察出血傾向
產(chǎn)時(shí)、產(chǎn)后密切觀察出血情況。產(chǎn)后注意陰道流血情況。由于乙肝產(chǎn)婦凝血機(jī)制功能欠佳，所以在分娩過程中，產(chǎn)時(shí)和產(chǎn)后易大出血所以可查出凝血時(shí)間及凝血酶原活動(dòng)度。口服或肌肉注射維生素K制劑。有促使凝血酶原、纖維蛋白原及一些凝血因子等合成作用。備好新鮮血備用。
2.4 盡量縮短第二產(chǎn)程，減少孕婦體力消耗。分娩后及時(shí)給宮縮劑，以促進(jìn)宮收縮，減少出血。
2.5 注意無菌操作，防止感染。HbsAg(+)產(chǎn)婦在分娩時(shí)易將HBV傳播給嬰兒。在分娩時(shí)胎兒接觸陰道內(nèi)血液、分泌物或吸人、吞咽血液和羊水而受感染。分娩時(shí)盡量保持新生兒少受損傷，少受羊水和陰道分泌物污染。
2.6 注意水電解質(zhì)平衡，注意血壓、尿量變化。
2.7 對重癥患者，密切注意凝血機(jī)制障礙或DIC跡象，嚴(yán)密觀察神志情況，以防止肝、腎功能衰竭。
2.8 產(chǎn)后應(yīng)用對肝臟損傷小的廣譜抗生素控制感染是防止肝炎病情惡化的關(guān)鍵。給予頭孢菌素類或氨芐西林等。如果不易哺乳者及時(shí)回奶，不能用對肝臟有損害藥物如雌激素、可口服生麥芽或乳房外敷芒硝。
2.9 HbaAg(+)產(chǎn)婦哺乳一般認(rèn)為肝炎產(chǎn)婦不宜喂奶。因哺乳及營養(yǎng)需要量增加都給肝臟加重負(fù)擔(dān)。、由于HbsAg(+)攜帶者的乳汁有較高滴度，極易傳染嬰兒，故不應(yīng)哺乳。但近年來又有新觀點(diǎn)。如果母親血HbsAg、HbeAg、抗-HBc三項(xiàng)陽性或后二項(xiàng)陽性產(chǎn)婦不宜哺乳。乳汁HBV-DNA陽性者不宜哺乳。目前主張只要新生兒接受免疫，僅HbsAg陽性母親可以為嬰兒哺乳。但為了新生兒安全，最好不哺乳。
2.10 新生兒聯(lián)合免疫新生兒聯(lián)合免疫包括乙肝疫苗的主動(dòng)免疫、乙肝免疫球蛋白被動(dòng)免疫。凡 HbsAg(+)產(chǎn)婦所分娩新生兒都需要進(jìn)行新生兒聯(lián)合免疫。HBIG聯(lián)合乙肝疫苗不僅不影響主動(dòng)免疫的建立，且其保護(hù)性抗體持續(xù)時(shí)間更長，聯(lián)合免疫有效保護(hù)率更高。
乙肝疫苗：主動(dòng)免疫，新生兒出生后24小時(shí)內(nèi)注射乙肝疫苗5ug，生后1、6個(gè)月再分別注射乙肝疫苗5ug。新生兒對疫苗的免疫應(yīng)答良好，體內(nèi)產(chǎn)生抗-HBs，可有效地保護(hù)新生兒肝臟不受HBV的感染。
免疫球蛋白的注射：被動(dòng)免疫。母親HbsAg(+)新生兒出生后24小時(shí)內(nèi)注射乙肝免疫球蛋白200IU，二周后再注射乙肝免疫球蛋白200IU，可減少或阻止乙肝病毒進(jìn)入肝臟。乙肝免疫球蛋白母嬰雙重免疫，大大提高阻斷效果，降低乙肝病毒在宮內(nèi)感染。
抗核抗體（ANA）譜
ANA是以細(xì)胞核成分（核酸、白）為靶抗原的自身抗體的總稱，包括抗雙鏈DNA抗體、抗可提取的核抗原抗體等。ANA的檢測通常采用間接免疫熒光法，報(bào)告中給出陽性滴度以及核型，不同核型通常可以提示ANA中的主要成分，而高滴度ANA陽性對于結(jié)締組織病的診斷有重要意義。
抗雙鏈DNA（dsDNA）是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的標(biāo)記抗體。敏感性70%，與SLE的疾病活動(dòng)性相關(guān)，抗dsDNA陽性的患者易出現(xiàn)狼瘡腎損害。
可提取的核抗原抗體（抗ENA） 以小分子核糖白（鹽水可提取的非組蛋白成分）為靶抗原的自身抗體的總稱。以下是最常見的抗ENA抗體。
抗核糖白抗體（抗nRNP） 可以見于多種結(jié)締組織病中，臨床上常與雷諾現(xiàn)象相關(guān)；高滴度抗nRNP抗體陽性提示混合性結(jié)締組織病的診斷。
抗Sm抗體（抗Srmith） 常與抗nRNP同時(shí)存在，對SLE的敏感性約30%，特異性達(dá)99%，因此是SLE的標(biāo)記性抗體，但是與SLE的疾病活動(dòng)性無關(guān)。
抗SSA抗體 主要見于SLE和SS患者中。臨床上與皮疹、光過敏現(xiàn)象相關(guān)。由于抗SSA抗體可通過胎盤，因此可能導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)狼瘡表現(xiàn)。
抗SSB抗體 抗SSB抗體陽性總是伴有抗SSA抗體陽性，抗SSB抗體較抗SSA抗體對干燥綜合征的診斷更具特異性。
抗Scl-70抗體 為系統(tǒng)性硬化癥的標(biāo)記性抗體，陽性率低，約為20%。一些研究顯示抗Scl-70抗體陽性患者預(yù)后不良，易早期出現(xiàn)嚴(yán)重的器官損害。
抗Jo-1抗體 是炎癥性肌肉病（多發(fā)性肌炎/皮肌炎）的標(biāo)記抗體。但陽性率
抗核糖體P蛋白抗體（抗rRNP） 是診斷SLE的特異性抗體，常在SLE活動(dòng)期存在，陽性率20%左右。抗rRNP抗體陽性患者精神神經(jīng)狼瘡的發(fā)生率高。隨患者病情穩(wěn)定，抗rRNP抗體可能消失，但通常需要1-2年后方可能轉(zhuǎn)陰。
抗著絲點(diǎn)抗體（AcA） 主要見于硬皮病中。尤其是CREST綜合征（即鈣化癥、雷諾現(xiàn)象、食管運(yùn)動(dòng)障礙、硬指及毛細(xì)血管擴(kuò)張）中的陽性率可以高達(dá)80%。原發(fā)性膽汁性肝硬化患者中抗線粒體抗體陽性的同時(shí)常伴ACA陽性。
抗核小體抗體（AnuA） 是SLE的早期標(biāo)記性抗體。陽性率約50%，特異性>95%。
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎抗體譜
類風(fēng)濕因子（RF） 最多見于RA患者中，對其診斷有重要意義，同時(shí)RF滴度與RA的疾病活動(dòng)度也有一定相關(guān)性，RF陽性患者容易出現(xiàn)關(guān)節(jié)外表現(xiàn)、骨侵蝕進(jìn)展快，也是提示患者預(yù)后不良的重要指標(biāo)。
需要指出的是，RF在RA中的陽性率僅約70%。因此不能根據(jù)RF陰性就排除類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷；RF還可見于多種其他自身免疫性疾病（如干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性血管炎等），在干燥綜合征患者中RF陽性率達(dá)60%。此外，在肝病、慢性感染、腫瘤患者中也可以出現(xiàn)RF陽性，甚至在正常老年人也可以檢測到低滴度RF陽性。因此，不能看到RF陽性就診斷患者為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，需要詳細(xì)詢問患者的病史，并結(jié)合臨床情況。
抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（抗CCP） 在HA患者中的陽性率約50%，但是特異性>95%。研究顯示，早在RA患者m現(xiàn)關(guān)節(jié)腫痛癥狀前14年已經(jīng)可以在血中查到抗CCP抗體，因此抗CCP抗體對于RA的早期診斷非常重要。抗CCP抗體與RA的活動(dòng)性不相關(guān)，然而是提示HA患者預(yù)后不良的重要指標(biāo)。
抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA） 是針對中性粒細(xì)胞胞漿中抗原成分所產(chǎn)生的自身抗體，通常采用間接免疫熒光的方法檢測，分為胞漿型（cANCA）和核周型（pANCA）。cANCA的抗原成分為胞漿中的絲氨酸蛋白酶-3，主要見于肉芽腫性多血管炎，陽性率>70%，尤其在全身型肉芽腫性多血管炎患者中，其滴度與疾病活動(dòng)性相關(guān)。pANCA的抗原為髓過氧化物酶，mNCA陽性對于診斷的特異性相對差，除多見于顯微鏡下多血管炎和嗜酸性肉芽腫性多血管炎外，還可以見于其他多種疾病中，例如潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病和自身免疫性肝病等。
抗磷脂抗體抗磷脂抗體是針對細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的磷脂為抗原而產(chǎn)生的一系列自身抗體。目前在臨床上可以檢測的抗磷脂抗體主要包括抗心磷脂抗體、狼瘡抗凝物和抗B2-糖蛋白I。抗磷脂抗體可以導(dǎo)致AFFr延長、梅毒試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。臨床上最相關(guān)的表現(xiàn)是抗磷脂抗體綜合征。表現(xiàn)為動(dòng)靜脈血栓/栓塞和病態(tài)妊娠（如反復(fù)自然流產(chǎn)、胎死宮內(nèi)等），還町以表現(xiàn)為血小板減少、溶血性貧血、心臟瓣膜病變、神經(jīng)系統(tǒng)受累、皮膚網(wǎng)狀青斑等。這些抗磷脂抗體的持續(xù)陽性對于抗磷脂抗體綜合征的診斷非常重要。通常需要間隔12周反復(fù)檢測2次，持續(xù)性抗體陽性對于診斷的幫助很大。
抗磷脂抗體綜合征可以在沒有任何其他疾病的情況下出現(xiàn)，稱為原發(fā)性抗磷脂抗體綜合征；也常常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征等患者中出現(xiàn)，這種情況稱為繼發(fā)性抗磷脂抗體綜合征。
自身免疫性肝病抗體譜
自身免疫性肝病是由于自身免疫紊亂所介導(dǎo)的慢性肝臟炎癥性疾病，主要包括自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和硬化性膽管炎，臨床表現(xiàn)為小同程度的肝酶升高、高v-球蛋白血癥和自身抗體陽性，嚴(yán)重者可進(jìn)展為肝硬化，甚至肝衰竭。自身免疫性肝病抗體譜中以下幾種抗體臨床非常重要，需要了解。
抗平滑肌抗體（SMA） 主要見于自身免疫性肝炎，高滴度SMA陽性對其診斷的敏感性>90%。需要注意的是，低滴度SMA還可見于干燥綜合征、酒精性肝硬化、炎癥性腸病、白塞病、心肌炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、腫瘤等。
抗線粒體抗體（AMA） 靶抗原是線粒體膜上的多種蛋白，成分復(fù)雜。分為MI-M9等多種亞型，AMA-M2型抗體是PBC的特異性抗體，>1：80陽性對PBC診斷的特異性達(dá)97%。
抗SP100 在PBC患者中抗SP100的陽性率為10%-30%。可以出現(xiàn)在臨床肝損傷表現(xiàn)之前，對于PBC診斷。尤其是AMA陰性PBC患者的診斷具有重要意義。
抗gp210 對PBC高度特異（99%），診斷PBC的敏感性為10%～41%，對于臨床、生化和組織學(xué)表現(xiàn)疑診PBC而AMA陰性的患者，或AMA陽性而臨床癥狀不典型、存在重疊綜合征（如與干燥綜合征重疊）的患者。抗gp210抗體檢測有重要價(jià)值。抗gp210的滴度一般不隨病程和肝功能狀態(tài)的變化而變化，但與PBC患者的預(yù)后不良相關(guān)。
免疫球蛋白
免疫球蛋白（Ig）指具有抗體結(jié)構(gòu)。但不具有抗體活性那些的球蛋白。可以分為5類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（Ig9）和免疫球蛋白E（IgE）。其中，IgE主要與過敏反應(yīng)和寄生蟲感染相關(guān)。在風(fēng)濕免疫病中應(yīng)用最多的是IgG、IgM和IgA。在結(jié)締組織病的急性期，3種Ig都可能會(huì)反應(yīng)性增高。尤其在干燥綜合征患者中高球蛋白血癥可以非常突出，是干燥綜合征疾病活動(dòng)的重要血清學(xué)指標(biāo)。
免疫球蛋白也是人體抵御感染的重要機(jī)制，低免疫球蛋白血癥者易發(fā)生各種感染，分泌型IgA可以通過消化道和呼吸道黏膜，是機(jī)體黏膜局部免疫的主要因素。
另外，在人類，IgG是唯一能通過胎盤的Ig類型，母體的IgG通過胎盤轉(zhuǎn)移給胎兒是一種重要的自然被動(dòng)免疫，對于新生兒抗感染具有重要意義。
補(bǔ)體
補(bǔ)體是存在于正常人和動(dòng)物血清與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)，可輔助特異性抗體，介導(dǎo)免疫溶菌、溶血作用，故稱為補(bǔ)體補(bǔ)體系統(tǒng)包括30余種蛋白受體，是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，臨床上最常檢測的補(bǔ)體成分是c3和c4。
補(bǔ)體增高常見于各種感染性疾病和部分腫瘤性疾病等，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中補(bǔ)體多正常或略有升高，而補(bǔ)體降低往往臨床意義更大，常見于SLE活動(dòng)期、免疫復(fù)合物介導(dǎo)的慢性腎小球腎炎、急性鏈球菌感染后腎小球腎炎等，除對疾病診斷有幫助外，也是判定疾病活動(dòng)性的重要指標(biāo)：
人白細(xì)胞抗原B27（HLA-B27）
屬于主要組織相容性復(fù)合體-I類基因，在有腰背痛的患者中常常進(jìn)行相關(guān)檢測，因?yàn)镠LA-27與強(qiáng)直性脊柱炎等脊柱關(guān)節(jié)炎高度相關(guān)。然而，需要特別注意的是，HLA-B27只是個(gè)與強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病相關(guān)的基因，在強(qiáng)直性脊柱炎患者中90%HLA-B27陽性，但絕對不是HLA-B27陽性就意味著患有強(qiáng)直性脊柱炎，因?yàn)檎Ｈ巳褐杏?0%的HLA-B27陽性，要作出強(qiáng)直性脊柱炎的診斷還需要結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)和影像學(xué)檢查。
小結(jié)
目的 制備人原發(fā)性膽囊癌單克隆抗體，對其特異性進(jìn)行研究。方法 以膽囊癌細(xì)胞系SGC-996免疫Balb/c小鼠，應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，獲得穩(wěn)定分泌抗SGC-996單克隆抗體的陽性雜交瘤細(xì)胞。結(jié)果 雜交瘤細(xì)胞符合融合細(xì)胞核型特點(diǎn)，有較強(qiáng)的成瘤性。抗體亞類為IgG1。相對應(yīng)的抗原主要表達(dá)在胞質(zhì)和胞核中，分子量約為67kD。抗體對膽囊癌有較強(qiáng)的免疫反應(yīng)，其他癌組織、癌旁組織及間質(zhì)、正常膽囊上皮和成纖維細(xì)胞均呈陰性。結(jié)論 建立一株雜交瘤細(xì)胞系，能穩(wěn)定分泌單克隆抗體，該抗體具有較高特異性。
【關(guān)鍵詞】 膽囊癌；雜交瘤；單克隆抗體；免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)
Abstract：Objective To prepare monoclonal antibody(McAb)against human gallbladder carcinoma antigen and to lay a foundation for further study of the tumour，clinical diagnosis and drug-guided treatment.Methods Balb/c mice were immunized with SGC-996 human gallbladder carcinoma cells.The lymphocytes hybridoma technique was used for McAb preparation.The character of McAb associated antigen was tested through the immunohistochemistry(IHC)，immunocytochemistry（ICC）and Western blott.Results The analysis of chromosome showed that the hybridoma cells had the characterization of both SP2/0 and mice spleen cell.The cell line inoculated in abdominal cavities of Balb/c could develop to tumour on mesentery.The McAb was found to be the IgG1 isotype.The antigen recognized by McAb was a protein with a molecular weight of 67kD and located in cytoplasm and karyon of SGC-996.The ICC results showed that the McAb 4E6 reacted strongly to gallbladder carcinoma and negative to gastric carcinoma，colorectal carcinoma，hepatocellular carcinoma，esophageal carcinoma and non-digestive tract tumor.Conclusion The hybridoma cell line can be prepared to secrete stably monoclonal antibody against human gallbladder carcinoma.It could react specificially with gallladder carcinoma.
Key words：Human gallbladder Carcinoma;Hybridoma;Monoclonal Antibody;Immunohistochemistry;Immunocytochemistry
原發(fā)性膽囊癌(primary carcinoma of the gallbladder，PCG)是膽道系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，早期無特殊癥狀，給膽囊癌的診斷，尤其是早期診斷，帶來很大困難。尋找原發(fā)性膽囊癌特異性腫瘤標(biāo)志物，為膽囊癌的早期診斷及預(yù)后提供可靠、準(zhǔn)確的判斷指標(biāo)，已成為研究原發(fā)性膽囊癌生物學(xué)行為的重要環(huán)節(jié)。本研究以人原發(fā)性膽囊腺癌細(xì)胞株為免疫原，制備該細(xì)胞株單克隆抗體，并對其特異性進(jìn)行了研究。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
Balb/c小鼠，雌性，9～12周齡，購自第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
1.2 組織與細(xì)胞株
膽囊癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、肺成纖維細(xì)胞，由同濟(jì)大學(xué)腫瘤研究中心提供；SP2/0骨髓瘤細(xì)胞，購自中科院上海細(xì)胞所。病理組織切片取自同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院。
1.3 主要試劑
PEG1500、HAT、HT購自SIGMA公司；SABC免疫組化試劑盒購自華美公司；小鼠單抗免疫球蛋白亞型鑒定試劑盒購自晶美公司。
1.4 方法成
1.4.1 單克隆抗體制備
采用9～12周齡雌性Balb／c小鼠，以5×105 SGC-996膽囊癌細(xì)胞免疫3次，每次間隔2周，前兩次為腹腔注射，末次為尾靜脈注射［1］。末次免疫后3天取脾細(xì)胞；與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2／0以5∶1比例在50％PEG1500作用下進(jìn)行融合。用含HAT的DMEM培養(yǎng)液在96孔板中選擇培養(yǎng)，當(dāng)雜交瘤細(xì)胞長滿孔底2/3，取上清液用ABS-ELISA法進(jìn)行克隆篩選，選擇對SGC-996細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)的克隆，擴(kuò)大培養(yǎng)于含20％小牛血清的DMEM培養(yǎng)基和5％CO2的孵箱中，部分凍存［2］。1×105雜交瘤細(xì)胞接種于注射過石蠟的Balb／c小鼠腹腔中，7天后獲得富含單抗的腹水。
1.4.2 單克隆抗體鑒定
雜交瘤細(xì)胞核型分析、腹水型McAb效價(jià)測定按文獻(xiàn)報(bào)道［3，4］的方法進(jìn)行。McAb免疫球蛋白類型及亞類鑒定參照試劑盒說明書操作。
1.4.3 免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)染色
參照常規(guī)SABC法進(jìn)行。切片抗原修復(fù)，放于0.01M枸櫞酸鈉緩沖液中，煮沸10min。本實(shí)驗(yàn)共檢測細(xì)胞株7種，腫瘤組織切片47例。
1.4.4 單抗識(shí)別抗原的提取和分析
以膀胱癌細(xì)胞為對照，取對數(shù)生長期SGC-996細(xì)胞及EJ膀胱癌細(xì)胞，用PBS沖洗細(xì)胞后，加入細(xì)胞裂解液，置冰上放置20min后，用刮匙將細(xì)胞從瓶壁上刮下；在4℃條件下，10 000r離心20min；取含蛋白質(zhì)的上清液，常規(guī)方法行SDS-PAGE和Westem-blot，二抗為堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗鼠IgG（1∶500），BCIP/NBT顯色。
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2 結(jié)果
2.1 雜交瘤細(xì)胞株建立
融合細(xì)胞生長情況良好（圖1），采用ABS-ELISA法篩選，選取OD值較高而細(xì)胞數(shù)量較少的孔進(jìn)行亞克隆，經(jīng)4次亞克隆篩選抗體陽性率逐次圖1 融合后7天雜交瘤細(xì)胞 ×400
Fig.1 hybridoma cells ×400(seven days after combination)提高，達(dá)100％。選一株持續(xù)分泌單抗并且滴度最高的雜交瘤，命名為4E6。核型分析顯示（圖2），
圖2 雜交瘤細(xì)胞染色體 ×400
Fig.2 The Chromosomal morphology of hybridoma cell ×400雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)既有中間著絲、亞中部著絲點(diǎn)等骨髓瘤細(xì)胞染色體標(biāo)記，又有小鼠脾細(xì)胞頂端著絲點(diǎn)染色體標(biāo)記，染色體數(shù)目達(dá)100條以上，符合小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞的核型特點(diǎn)。雜交瘤細(xì)胞接種小鼠腹腔一周后，腸系膜上密布粟粒大小的腫瘤，有較強(qiáng)的成瘤性，(圖3)。凍
圖3 雜交瘤細(xì)胞成瘤性
Fig.3 tumorigenicity of hybridoma cell line存半年后復(fù)蘇的雜交瘤細(xì)胞，仍能分泌抗體，具有較高的活性。
2.2 單克隆抗體的生物學(xué)特性
小鼠單抗免疫球蛋白亞型鑒定試劑盒鑒定單克隆抗體亞型為IgG1，輕鏈類型為κ鏈（圖4）。ABS
圖4 抗體免疫球蛋白亞型
Fig.4 Isotype of the McAb 4E6
-ELISA法測定培養(yǎng)上清液及腹水的效價(jià)均大于1∶128 000，效價(jià)較高。免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)及Westem-blotting發(fā)現(xiàn)（圖7）該抗體對應(yīng)抗原蛋白在胞質(zhì)和胞核中均有表達(dá)，分子量約為67kD。
2.3 單克隆抗體與腫瘤組織的反應(yīng)性
細(xì)胞系免疫細(xì)胞化學(xué)的半定量測定（圖5A，B），結(jié)果見表1。膽囊癌免疫組織化學(xué)染色（圖6）及各類癌組織免疫組織化學(xué)染色的半定量檢測見表2。表1 免疫細(xì)胞化學(xué)的半定量結(jié)果表2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
3 討論
本研究以人膽囊癌細(xì)胞為免疫原，用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)獲得了一株能持續(xù)穩(wěn)定分泌抗人膽囊癌單抗的雜交瘤細(xì)胞，命名為4E6。陽性克隆篩選中，普通ELISA檢測的靈敏度多數(shù)報(bào)道為20ng/ml～100ng/ml，且間接法ELISA抗原包被濃度需達(dá)到1μg／ml～10μg／ml［5］。我們用膽囊癌細(xì)胞SGC-996包被96孔板作為抗原對抗體進(jìn)行檢測，并依據(jù)文獻(xiàn)［6］進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法改進(jìn)，采用ABS-ELISA法，取得了較好結(jié)果。
免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示，SGC-996、GBC-SD膽囊癌細(xì)胞均呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，而胃癌細(xì)胞BGC-803、BGC-823，MCF-7乳腺癌細(xì)胞、EJ膀胱癌細(xì)胞和WI38人肺成纖維細(xì)胞則均為陰性反應(yīng)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果，膽囊癌均呈強(qiáng)陽性反應(yīng)；食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌、膀胱癌等癌組織和正常膽囊上皮，癌旁組織及間質(zhì)均為陰性。這些結(jié)果說明，該單克隆抗體對膽囊癌有高度特異性，而正常組織則陰性反應(yīng)，提示其識(shí)別的抗原極有可能是一種腫瘤標(biāo)志物。另外，Western-blot實(shí)驗(yàn)中，將膀胱癌作為對照，抽提了膽囊癌和膀胱癌細(xì)胞總蛋白，雜交的結(jié)果顯示，4E6單抗所針對的抗原在膽囊癌中有較高的表達(dá)，而在膀胱癌中無表達(dá)。進(jìn)一步驗(yàn)證了免疫細(xì)胞化學(xué)的結(jié)果。
4E6單抗顯示出了較高的膽囊癌特異性，有望用于膽囊癌及消化道腫瘤的免疫診斷及相關(guān)研究。然而，由于目前檢測的病例數(shù)尚有限，腫瘤類型也不夠齊全，該單抗的組織特異性還需要通過積累更多的病理材料才能作出更全面、準(zhǔn)確的結(jié)論。
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【Abstract】 Objective To explore the effects of estrogen， progesterone and the function of immune system on intrahepatic cholestasis of pregnancy (ICP).Methods Fifty women with ICP and fifty normal pregnant women were enrolled in the study. The levels of their serum estradiol (E2) and progesterone (P) were measured and cellular immunity and humoral immunity were determined. Radioimmunoassay was used to detect the levels of E2 and P， and APAAP was used to detect cellular immunity.Results (1)The level of estrodiol was significantly increased in ICP group than those of normal control group (25.89±6.85 μg/L， 16.92±4.98 μg/L， P＜0.01). (2)The level of CD8+ was decreased (19.06±1.93%， 26.43±2.89%)and the ratio of CD4+/ CD8+ was increased significantly in ICP group than those of control group (2.23 ±0.38， 1.73 ±0.23， P＜0.05). (3)There were negative correlation between E2 and CD8+， and positive correlation between E2 and the ratio of CD4+/ CD8+.Conclusion These results suggest that the high level of E2 of ICP patients may result in functional disorder of immune system by the means of estrogen receptor on CD8+. This may be a factor of ICP development.
【Key words】 Cholestasis，intrahepatic
Pregnancy
Estrogens
Progesterone
Immunity， cellular
妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥(intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP)是一種妊娠后期以皮膚瘙癢、膽汁淤積和黃疸為特征的疾病。ICP患者預(yù)后良好，但胎兒可發(fā)生早產(chǎn)、宮內(nèi)窘迫、胎死宮內(nèi)等。關(guān)于ICP發(fā)病原因，存在許多學(xué)說：如雌激素誘導(dǎo)的ICP學(xué)說、家族遺傳學(xué)說、外源性因素學(xué)說等。隨著神經(jīng)內(nèi)分泌免疫學(xué)的發(fā)展，國外一些學(xué)者對神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)在ICP發(fā)生過程中的作用越來越重視。我們對雌、孕激素水平及免疫功能改變與妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥的相關(guān)性進(jìn)行了研究。現(xiàn)報(bào)道如下。
資料與方法
一、研究對象
選擇1996年6月～1997年1月華西醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院門診及住院者中，ICP患者50例(ICP組)及正常妊娠婦女50例(對照組)，兩組產(chǎn)婦年齡分別為27.3±2.4歲，27.03±2.9歲，孕周分別為36.9±1.6周，36.50±2.5周，均為單胎初產(chǎn)婦。ICP組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)妊娠前無肝臟、膽道等急慢性疾病史；(2)妊娠期出現(xiàn)軀干及四肢皮膚瘙癢；(3)實(shí)驗(yàn)室檢查，血清總膽酸升高，轉(zhuǎn)氨酶有輕度或中度升高；總膽紅素及直接膽紅素正常或升高；(4)無皮膚病者；(5)分娩后上述癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查均逐漸恢復(fù)正常。
二、方法
1. 雌、孕激素水平的檢測：采用放射免疫法，藥盒購自衛(wèi)生部上海生物制品研究所。
2. T淋巴細(xì)胞亞群檢測：采用堿性磷酸酶及抗堿性磷酸酶法(APAAP)法，藥盒購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物制劑發(fā)展中心。
3. 免疫球蛋白的檢測：采用單向免疫擴(kuò)散法，藥盒購自衛(wèi)生部上海生物制品研究所。
三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
兩組間計(jì)量資料比較用t檢驗(yàn)，兩變量間的相關(guān)關(guān)系用直線相關(guān)分析法。
結(jié)果
一、激素水平的變化
雌、孕激素水平均隨孕周增加而升高。兩組結(jié)果均顯示，ICP組雌激素水平高于對照組(P＜0.01)，而孕激素水平在兩組間的差異無顯著性(P＞0.05)，見表1。
表1 兩組雌、孕激素測定結(jié)果(μg/L，)
組別 例數(shù) 雌激素 孕激素
對照組 50 16.92±4.98 225.71±84.51
ICP組 50 25.89±6.85 253.77±67.50
二、體液免疫的變化
ICP組的免疫球蛋白IgG水平低于對照組(P＜0.01)而免疫球蛋白IgM、IgA及補(bǔ)體C3、C4水平與對照組相比，差異無顯著性，見表2。
三、細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化
ICP組輔-誘導(dǎo)性T細(xì)胞(CD4+)、成熟T細(xì)胞（CD3+）與對照組相比，差異無顯著性(P＞0.05，P＞0.2)。細(xì)胞毒性-抑制性T細(xì)胞(CD8+)水平則較對照組低(P＜0.05)，CD4+/ CD8+比值增高(P＜0.05)，見表3。
四、雌激素水平與免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析
雌激素水平與CD8+呈負(fù)相關(guān)（r＝-0.581，P＜0.05）與CD4+/CD8+呈正相關(guān)(r=0.623，P＜0.05)，而與其余指標(biāo)未見有相關(guān)性。
討論
一、免疫功能的改變與ICP發(fā)病的關(guān)系
1．體液免疫的變化：妊娠期隨著胚胎的生長發(fā)育，胎兒的免疫系統(tǒng)相應(yīng)建立。20周的胚胎即可合成免疫球蛋白。所以，胎兒對通過胎盤透入的母體抗原能夠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。然而，正常妊娠時(shí)并沒有排斥反應(yīng)發(fā)生。究其原因，除免疫耐受外，還存在著其它免疫調(diào)節(jié)作用，其中之一即為封閉抗體。大量的研究證實(shí)，封閉抗體為IgG及其亞類抗體，這種抗體具有保護(hù)作用，能與滋養(yǎng)層細(xì)胞的表面抗原結(jié)合，封閉其抗原決定簇使其不能與母體細(xì)胞毒性T細(xì)胞結(jié)合，并免受母體致敏淋巴細(xì)胞的攻擊。在臨床上已證實(shí)，反復(fù)自然流產(chǎn)與封閉抗體缺乏有關(guān)［1，2］。本研究顯示，ICP患者的IgG 水平較正常妊娠明顯減少，這種封閉抗體的減少導(dǎo)致保護(hù)作用減弱，而發(fā)生免疫反應(yīng)。
2．細(xì)胞免疫功能的改變：CD4+的主要作用是促進(jìn)B細(xì)胞、T細(xì)胞和其它免疫細(xì)胞的增殖與分化，協(xié)調(diào)免疫細(xì)胞間的相互作用。CD8+中的抑制性T細(xì)胞（Ts）的主要作用是抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體免疫應(yīng)
表2 兩組體液免疫指標(biāo)測定結(jié)果(g/L，)
組別 例數(shù) IgG IgM IgA C3 C4
ICP組 50 5.89±0.74 1.02±0.42 1.04±0.57 1.09±0.27 0.56±0.16
對照組 50 7.89±1.85 1.15±0.42 1.017±0.57 1.02±0.29 0.62±0.19
P值 ＜0.01 ＞0.05 ＞0.2 ＞0.5 ＞0.1
表3 兩組細(xì)胞免疫指標(biāo)測定結(jié)果(%，)
組別 例數(shù) CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+
ICP組 50 69.9±7.24 43.37±4.38 19.06±1.93 2.23±0.38
對照組 50 73.67±6.81 45.4±4.83 26.43±2.89 1.73±0.23
P值 ＞0.05 ＞0.2 ＜0.05 ＜0.05
答，在機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)中，起主要作用。CD4+與CD8+細(xì)胞間通過相互協(xié)調(diào)、相互制約，從而調(diào)控著機(jī)體的免疫狀態(tài)。因此，CD4+/ CD8+比值的變化在免疫調(diào)控中發(fā)揮著更加主要的作用。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ICP患者CD8+水平明顯下降，CD4+/ CD8+比值增高，這可能與患者母-胎免疫平衡失調(diào)，保護(hù)反應(yīng)減弱，排斥反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān)。
二、雌激素-免疫調(diào)節(jié)與ICP發(fā)病的相關(guān)性
本研究結(jié)果顯示了ICP患者的體液免疫與細(xì)胞免疫出現(xiàn)分離的狀態(tài)，即ICP患者CD8+數(shù)目明顯下降，抑制抗體生成的作用減弱，抗體分泌應(yīng)增加，但I(xiàn)CP患者IgG水平不但沒有升高反而明顯下降，這可能是因?yàn)榇嬖谥萍に氐挠绊憽４罅垦芯恳呀?jīng)證實(shí)雌激素對B淋巴細(xì)胞進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)［3，4］。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：ICP患者的雌激素水平明顯高于對照組，該結(jié)果與近年來的多數(shù)報(bào)道一致［5，6］，雌激素與CD8+呈負(fù)相關(guān)，與CD4+/CD8+呈正相關(guān)，這也與近年來觀察雌二醇(E2)在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能中的結(jié)果相吻合［7，8］。實(shí)驗(yàn)研究已證實(shí)在CD8+細(xì)胞上存在著雌激素受體［9，10］，從而推測雌激素可能通過與CD8+細(xì)胞上的受體結(jié)合，而減弱Ts細(xì)胞的抑制活性，影響機(jī)體的免疫功能。這種發(fā)現(xiàn)已經(jīng)被臨床上很多與女性激素有關(guān)的免疫性疾病所證實(shí)。雌激素水平的升高抑制了B細(xì)胞分泌抗體，導(dǎo)致IgG水平下降，封閉抗體減少。這一系列因素的改變，可能導(dǎo)致ICP的發(fā)生，但E2增高的原因，免疫功能的改變與ICP發(fā)病的因果關(guān)系尚待進(jìn)一步進(jìn)行前瞻性研究證實(shí)。
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8 劉村蘭，匡彥德，何球藻. 雌二醇對大鼠細(xì)胞免疫功能的影響. 中國免疫學(xué)雜志. 1992， 8:95-99.
乙型病毒性肝炎（簡稱乙肝），是一種由乙型肝炎病毒（HBV）感染機(jī)體后所引起的疾病，乙型肝炎病毒是一種嗜肝病毒，主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)并損害肝細(xì)胞，引起肝細(xì)胞炎癥、壞死、纖維化，分急性和慢性兩種。乙型肝炎感染呈世界性流行，據(jù)世界性衛(wèi)生組織報(bào)道，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5億人為慢性感染者，每年約有100萬人死于HBV感染所致肝肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝癌。在我國，病毒性乙型肝炎是最嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一，乙型肝炎傳播已成為影響人口素質(zhì)的重要問題。根據(jù)調(diào)查我國人群中有60%的人感染過乙肝病毒，10%的人為HBV表面抗原攜帶者，每年新發(fā)現(xiàn)乙肝病人數(shù)為50萬，約占全國傳染病發(fā)病總數(shù)的1/4，其中有癥狀需要治療的活動(dòng)性乙肝患者約為2000多萬例，部分乙肝病毒攜帶者還將發(fā)展為肝病、肝硬化，少部分患者還會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)楦伟Ｒ腋尾粌H嚴(yán)重的影響人體健康，而且會(huì)給家庭、社會(huì)造成經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我國政府從2002年開始，投入大量資金為新生兒免費(fèi)接種乙肝疫苗，將乙肝疫苗免疫納入兒童計(jì)劃免疫程序，這將大大降低乙肝的發(fā)病率，阻斷乙肝病毒的傳播，乙肝疫苗的發(fā)展與應(yīng)用，對乙型肝炎的預(yù)防和控制起重要作用。過去十多年來，我國各地從城鎮(zhèn)向農(nóng)村逐漸鋪開對新生兒的普種工作，已經(jīng)能在一代人的時(shí)間里使HBsAg攜帶率大幅度下降。0～9歲兒童HBsAg攜帶率在我國一些地區(qū)已從10%以上下降到1%～2%。加強(qiáng)乙肝防治工作，宣傳安全預(yù)防接種措施，是我國政府和衛(wèi)生部門以及我們基層工作人員不可推卸的任務(wù)和責(zé)任。
1.乙型肝炎免疫預(yù)防措施：最有效的預(yù)防乙型肝炎措施就是及時(shí)有效地進(jìn)行免疫接種
1.1.主動(dòng)免疫：接種乙肝疫苗。乙肝疫苗能刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體，免疫作用持久，適用于所有的易感人群。
1.2.被動(dòng)免疫：注射乙肝免疫球蛋白。乙肝免疫球蛋白主要用于接觸后的緊急和暫時(shí)性預(yù)防。
2.乙肝病毒血清標(biāo)志物的臨床意義
在免疫接種前需要做乙肝病毒血清學(xué)指標(biāo)檢查，一般檢查乙肝的檢驗(yàn)項(xiàng)目，有5項(xiàng)，也稱乙型肝炎五項(xiàng)指標(biāo)（HBV-M），或說“兩對半”。“兩對半”的檢查結(jié)果，用加減號（即+、-）表示。（+），表示陽性；（-），表示陰性。這5項(xiàng)檢查，分別是：表面抗原（簡稱：HBsAg）、表面抗體（簡稱：抗HBs）、e抗原（簡稱：HBeAg）、e抗體（簡稱：抗Be）、核心抗體（簡稱：抗HBc）。九種常見模式
2.1.五項(xiàng)陰性，過去和現(xiàn)在未感染過HBV.
2.2.核心抗體（抗HBc）陽a.既往感染未能測出抗-HBs；b.恢復(fù)期HBsAg已消，抗-HBs尚未出現(xiàn)；c.無癥狀HBsAg攜帶著.
2.3e抗體（抗Be）、核心抗體（：抗HBc）陽性a.既往感染過HBVb.急性HBV感染恢復(fù)期；c.少數(shù)標(biāo)本仍有傳染性.c.1.HBV感染已過；c.2抗HBs出現(xiàn)前的窗口期.
2.4表面抗體（抗HBs）陽性a.注射過乙肝苗有免疫；b.既往感染；c.假陽性.
2.5表面抗體（抗HBs）、e抗體（抗Be）、核心抗體（抗HBc）陽性急性HBV感后康復(fù).
2.6表面抗原（HBsAg）核心抗體（抗HBc）陽性a.急性HBV感染；b..慢性HBsAg攜帶者；（c.傳染性弱.
2.7表面抗體（抗HBs）、核心抗體（抗HBc）。既往感染，仍有免疫力.HBV感染，恢復(fù)期.
2.8表面抗原（HBsAg）、e抗體（抗Be）、核心抗體（抗HBc）。a.急性HBV感染趨向恢復(fù)；b.慢性HBsAg攜帶者；c.傳染性弱.即俗稱的“小三陽”.
2.9表面抗原（HBsAg）、e抗原（簡稱：HBeAg）、核心抗體（簡稱：抗HBc）？急性或慢性乙型肝炎感染.提示HBV復(fù)制，傳染強(qiáng).即俗稱的“大三陽”.
2.哪些人需要免疫接種乙肝疫苗：接種乙肝疫苗的重點(diǎn)群體有兩部分，一部分是新生兒，一部分是成年人
2.1現(xiàn)在新生兒都實(shí)行免疫規(guī)劃，一出生就接種乙肝疫苗；
2.2成人打疫苗前需先進(jìn)行化驗(yàn)，化驗(yàn)結(jié)果顯示乙肝病毒表面抗原、表面抗體和核心抗體均陰性，轉(zhuǎn)氨酶正常才可以接種乙肝疫苗。但一般來說為保險(xiǎn)起見，凡沒有感染過乙肝病毒、自身乙肝抗體不足者都應(yīng)該注射乙肝疫苗。處于HBV感染高度危險(xiǎn)狀態(tài)的易感者（未感染過HBV的人）應(yīng)接種乙肝疫苗。主要包括：
①全部新生兒及幼兒園未接種過乙肝疫苗的孩子；
②傳染科、口腔科、血液室、透析室和經(jīng)常接觸血液的工作人員；
③新加入某一群體的人員，如新入伍的戰(zhàn)士、新入學(xué)的大學(xué)生；
④從事食品服務(wù)行業(yè)者及保育工作人員；
⑤發(fā)育障礙者，收容所中的患者和工作人員；
⑥血液透析患者；
⑦使用血液制品者；
⑧器官移植前的患者；需長期應(yīng)用免疫抑制劑者；
⑨乙肝病毒攜帶者的家庭接觸者；
⑩注射成癮者；長期教養(yǎng)機(jī)構(gòu)中的犯人。
3乙肝疫苗預(yù)防接種的具體方法乙型肝炎疫苗全程接種共3針
3.1一般新生兒、兒童、成年人接種乙肝疫苗10vg/支，按0、1、6月免疫，三角肌內(nèi)注射。
