時(shí)間：2023-06-01 09:46:17
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇自動(dòng)化免疫分析，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
一、21世紀(jì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)
21世紀(jì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)融入學(xué)科更多，內(nèi)涵更豐富，其主要理論和技術(shù)表現(xiàn)在以下方面。
1.分子生物學(xué)技術(shù)。從20世紀(jì)50年代Watson和Crik提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)至今50余年，分子生物學(xué)領(lǐng)域取得了巨大的成就。
(1)聚合酶鏈反應(yīng)。PCR技術(shù)具有靈敏度高、特異性好、及時(shí)方便等特點(diǎn)。PCR技術(shù)根據(jù)用途和具體方法的不同，可分很多種類，如原位PCR、多重PCR、不對(duì)稱PCR、反向PCR、復(fù)合PCR等。
(2)生物芯片。又叫微陣列技術(shù)，包括基因芯片、蛋白芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等，是一種集物理學(xué)、化學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)為基礎(chǔ)的檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)技術(shù)。生物芯片不論在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)方面，還是在臨床醫(yī)學(xué)方面，都有較廣的應(yīng)用價(jià)值。
(3)飛行質(zhì)譜。 又叫蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)，由蛋白芯片和質(zhì)譜儀組成。SELDI技術(shù)具有快速、準(zhǔn)確和敏感度高等特點(diǎn)。廣泛地用于多種疾病的診斷，尤其是癌癥。我國SDA批準(zhǔn)引進(jìn)運(yùn)用SELDI技術(shù)。由于該技術(shù)具有優(yōu)良的性能，有著極光明的應(yīng)用前景，將給疾病的診斷，尤其是腫瘤的早期診斷帶來質(zhì)的飛躍。
2.免疫標(biāo)記技術(shù)。其中用于組織和細(xì)胞中抗原或抗體定位的稱免疫組化技術(shù);用于檢測(cè)液體中微量物質(zhì)的稱為免疫測(cè)定。又根據(jù)標(biāo)記物的不同，將免疫標(biāo)記技術(shù)分為：熒光免疫測(cè)定，放射免疫測(cè)定，酶免疫測(cè)定，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定，金免疫測(cè)定。這些技術(shù)已廣泛地應(yīng)用于臨床。
3.自動(dòng)化和信息技術(shù)
(1)自動(dòng)化技術(shù)。由機(jī)械傳送處理系統(tǒng)、自動(dòng)化分析儀和信息處理系統(tǒng)組成實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化系統(tǒng)。根據(jù)自動(dòng)化規(guī)模程度可將LAS分為兩類：一類是模塊式自動(dòng)化，將一定的自動(dòng)化分析儀組合，完成一定組合項(xiàng)目的檢測(cè)，這也是當(dāng)前世界上LAS應(yīng)用得較多的形式;另一類是全實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化，在日本、美國等發(fā)達(dá)國家應(yīng)用較多，而在國內(nèi)，因條件受限，真正實(shí)現(xiàn)TLA的實(shí)驗(yàn)室還沒有。
(2)信息技術(shù)。信息技術(shù)的應(yīng)用已滲透到我們生活、工作的各個(gè)角落。在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用也相當(dāng)普及。實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)是集計(jì)算機(jī)技術(shù)和現(xiàn)代化管理思想為一體的適用于實(shí)驗(yàn)室管理和控制的一項(xiàng)綜合技術(shù)。可用于患者標(biāo)本的識(shí)別、檢驗(yàn)申請(qǐng)、樣本分析、結(jié)果報(bào)告、質(zhì)量控制、行政后勤管理、科研總結(jié)等數(shù)據(jù)管理，可提高臨床實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量、管理水平和工作效率。實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化系統(tǒng)更是離不開LIS的支撐。
4.生物傳感器。生物傳感器匯集物理學(xué)、化學(xué)、醫(yī)學(xué)學(xué)科技術(shù)，是一類可將生物信息，如蛋白質(zhì)、細(xì)胞器、活細(xì)胞、組織、微生物等轉(zhuǎn)換為分析信號(hào)的器件。包括兩個(gè)基本單元，即接收器和換能器。據(jù)其類型和原理的不同，可將生物傳感器分為光學(xué)生物傳感器、電化學(xué)生物傳感器、電壓生物傳感器及基因傳感器等。生物傳感器具有制造成本低、測(cè)量設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、安全、性能穩(wěn)定、壽命長、適用面廣、范圍寬、特異性好、所需樣品量少、不需要進(jìn)行前處理等特點(diǎn)。在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中，特別是床旁分析，具有很好的應(yīng)用前景。
二、21世紀(jì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的任務(wù)
自然科學(xué)的發(fā)展，促進(jìn)了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，由此產(chǎn)生了許多新方法、新技術(shù)，豐富了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的內(nèi)容，拓寬了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的空間。這些新方法、新技術(shù)匯集了多學(xué)科理論和技術(shù)，是傳統(tǒng)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，但又不同于傳統(tǒng)檢驗(yàn)技術(shù)。怎樣掌握和應(yīng)用這些新方法、新技術(shù)，為人類健康作出貢獻(xiàn)，是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)必須完成的任務(wù)。
1.增加投資，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)。好的實(shí)驗(yàn)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)設(shè)備，是完成高質(zhì)量檢測(cè)的物質(zhì)基礎(chǔ)和必要手段。沒有基因擴(kuò)增儀及其配套設(shè)備，就無法開展分子生物學(xué)技術(shù);沒有流式細(xì)胞儀，就無法快速準(zhǔn)確地完成免疫細(xì)胞及亞型和分子表型分析等工作;沒有LAS和LIS系統(tǒng)，就無法實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化、科學(xué)化、現(xiàn)代化管理，就談不上提高工作效率。對(duì)實(shí)驗(yàn)室硬件的投資，是21世紀(jì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的基礎(chǔ)。
2.培養(yǎng)人才，練好內(nèi)功。人才培養(yǎng)是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的重要任務(wù)。無論多先進(jìn)的設(shè)備都是通過人來掌握和操作的。只有高素質(zhì)的人才操作高精度的儀器，才能完成高質(zhì)量的檢測(cè)。我國從20世紀(jì)50年代開始，通過中等專業(yè)學(xué)校或通過師帶徒形式培養(yǎng)檢驗(yàn)人員。從事臨床檢驗(yàn)工作的人員不少，但高層次、高素質(zhì)的人才缺乏。這種狀況是適應(yīng)不了21世紀(jì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展形勢(shì)的。可以通過“三基”訓(xùn)練、多媒體教學(xué)、走出去、請(qǐng)進(jìn)來，全方位、多層次的方法培訓(xùn)從業(yè)人員，以提高素質(zhì)。其中培養(yǎng)各專業(yè)學(xué)科帶頭人尤為重要，有利于促進(jìn)全學(xué)科的發(fā)展。
3.加強(qiáng)與臨床的溝通、交流。這是檢驗(yàn)人員必須重視和加強(qiáng)的工作。一方面是實(shí)施全面質(zhì)量管理的需要。檢驗(yàn)人員向護(hù)士介紹各種標(biāo)本的采集及運(yùn)送要求，這是做好分析前質(zhì)量控制的重要舉措;向醫(yī)生通報(bào)、了解檢測(cè)信息及使用效果，這是分析后質(zhì)量控制的主要目的。另一方面是提高實(shí)驗(yàn)室工作效率和質(zhì)量的需要。只有加強(qiáng)與臨床的溝通、交流，才能使醫(yī)護(hù)人員理解、重視檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);只有加強(qiáng)與臨床的溝通、交流，才能使檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)新的理論、新的技術(shù)被臨床接受和應(yīng)用。
4.樹立危機(jī)和競(jìng)爭(zhēng)意識(shí)。21世紀(jì)是知識(shí)爆炸的年代，多學(xué)科的發(fā)展，賦予了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)更多、更新的理論和技術(shù)。只有不斷學(xué)習(xí)，不斷進(jìn)步，才能與時(shí)俱進(jìn)，不被時(shí)代所淘汰。經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們健康需求的增多，為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)帶來了機(jī)遇，同時(shí)也帶來了挑戰(zhàn)。人們需要更多的、更迅捷的、質(zhì)量更高的檢驗(yàn)信息。在檢驗(yàn)科眾多和商業(yè)體檢中心正在興起的今天，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作者無疑面臨激烈的競(jìng)爭(zhēng)，怎樣在競(jìng)爭(zhēng)中求生存和發(fā)展，是我們必須回答的現(xiàn)實(shí)問題。
總之，21世紀(jì)由于科學(xué)、經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們健康的需求，使檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)得到了飛速的發(fā)展，產(chǎn)生了許多新的理論和技術(shù)。檢驗(yàn)工作者應(yīng)認(rèn)清形勢(shì)、把握機(jī)遇，努力學(xué)習(xí)，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)化和現(xiàn)代化建設(shè)，樹立實(shí)施全面質(zhì)量管理體系的理念，樹立危機(jī)和競(jìng)爭(zhēng)意識(shí)，推動(dòng)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)事業(yè)的發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】 高通量ELISA檢測(cè)；傳染病
1 研究方法和技術(shù)路線
主要對(duì)高通量ELISA法檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)多種傳染性疾病（主要是HIV、HCV、TP、HBsAg、HBcAg）標(biāo)本的檢測(cè)進(jìn)行研究，主要進(jìn)行全自動(dòng)免疫分析儀與其他全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的結(jié)果差異分析，以及臨界值的合理界定，比較兩套系統(tǒng)的優(yōu)劣。研究過程中兩者均采用相同的試劑，相同的測(cè)試編程，最后比較兩者所測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性，借以分析兩者操作步驟的差異，確定最為標(biāo)準(zhǔn)的高通量ELISA檢測(cè)各步驟操作規(guī)程，以期待為臨床提供快速可靠的結(jié)果。
2 主要技術(shù)指標(biāo)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）理論上只要能獲得某一抗原純品或相應(yīng)的抗體制劑，即可對(duì)其相應(yīng)的抗體或抗原進(jìn)行ELISA測(cè)定。因此，幾乎所有的可溶性抗原、抗體系統(tǒng)均可用該技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，其特點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有較高的敏感性和特異性，最小可測(cè)值達(dá)ng甚至pg水平，但易受諸多測(cè)定因素（如包被抗原、抗體的質(zhì)量，微孔板表面的吸附性能等）的干擾。與放射免疫分析相比，ELISA技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記試劑相對(duì)比較穩(wěn)定，且無放射性危害。
因此在血源病原體（抗原和抗體），檢測(cè)人類多種傳染性疾病方面ELISA檢測(cè)技術(shù)有著不可比擬的優(yōu)勢(shì)，高通量ELISA檢測(cè)的系統(tǒng)化標(biāo)準(zhǔn)化可以大大減少ELISA法的影響因素，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
高通量酶免分析系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化與網(wǎng)絡(luò)化是全實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化系統(tǒng)的重要組成部分，包括樣本（前處理）模塊、分析中（質(zhì)量控制）處理模塊、酶免分析后處理模塊、軟件信息模塊等，是邁向全面實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化建設(shè)的重要基石。
主要包括：
2.1 樣本處理自動(dòng)化 主動(dòng)標(biāo)本識(shí)別條碼閱讀功能；更高的標(biāo)本處理效率；更少的勞動(dòng)強(qiáng)度；職業(yè)暴露機(jī)會(huì)最小化；通過減少人為失誤、增加加樣精度與準(zhǔn)確性來改善分析質(zhì)量，采用批量或隨機(jī)組合進(jìn)行多種組合與多種模式檢測(cè)。
2.2 高通量全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化 多任務(wù)、多通道完全實(shí)現(xiàn)平行處理過程，特別是自由任務(wù)資源管理系統(tǒng)，可以隨時(shí)增加（急診）任務(wù)菜單，實(shí)現(xiàn)最優(yōu)反應(yīng)過程（試驗(yàn)質(zhì)量）和最大化分析生產(chǎn)力。
2.3 設(shè)立高精密的質(zhì)量控制系統(tǒng)，確保每一批次檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與精密度 高通量酶免分析系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化不僅是一個(gè)測(cè)定系統(tǒng)或試劑的量值溯源，其還涉及到臨床標(biāo)本的采集運(yùn)送和保存、檢測(cè)系統(tǒng)或試劑的性能驗(yàn)證、檢測(cè)程序、儀器設(shè)備的維護(hù)和校準(zhǔn)、結(jié)果的分析報(bào)告和解釋等的標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)ELISA的測(cè)定在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用，在借助必要的自動(dòng)化分析儀器設(shè)備的基礎(chǔ)上，進(jìn)行系統(tǒng)化、標(biāo)準(zhǔn)化，將極大地提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性以及其對(duì)臨床疾病診療的有效性，并大大降低患者的醫(yī)療費(fèi)用，我院以已開展傳染病的ELISA法檢測(cè)多年，目前主要是乙型肝炎表面抗原、艾滋病抗體初篩、梅毒抗體、丙肝抗體、丙型肝炎核心抗原的檢測(cè)，主要使用意大利產(chǎn)ALISEI全自動(dòng)酶免分析儀，并且實(shí)施了嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制制度，操作人員經(jīng)過嚴(yán)格的崗前培訓(xùn)考核合格并取得相關(guān)傳染性疾病的檢測(cè)資格證書，嚴(yán)格進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制并定期參加省室間質(zhì)量控制，醫(yī)院通過了ISO2001認(rèn)證，并擁有強(qiáng)大的科研團(tuán)隊(duì)和技術(shù)力量支持。
3 國內(nèi)外研究綜述
ELISA是目前國內(nèi)臨床檢驗(yàn)科室最為常用的免疫檢驗(yàn)方法，常用于一些重要檢測(cè)項(xiàng)目如傳染病或感染性疾病病原體的抗原和特異抗體、腫瘤標(biāo)志物等常規(guī)檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)度直接影響到臨床診斷、治療檢測(cè)和預(yù)后評(píng)估。要保證檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)度，實(shí)現(xiàn)在不同實(shí)驗(yàn)室間檢驗(yàn)結(jié)果的一致性，檢驗(yàn)結(jié)果必須要有溯源性。檢驗(yàn)結(jié)果能否實(shí)現(xiàn)溯源性，取決于檢測(cè)系統(tǒng)，即完成檢測(cè)所需要的儀器、試劑、校準(zhǔn)品和操作程序的組合。要對(duì)檢測(cè)過程中的各組分進(jìn)行嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)化尤為重要。一直以來，我國政府對(duì)ELISA檢測(cè)的相關(guān)傳染病十分重視，如艾滋病、梅毒等，但是在ELISA標(biāo)準(zhǔn)化方面所做的工作還不足。這就導(dǎo)致了檢測(cè)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性、假陰性，大大降低了治療質(zhì)量，也損害了人民群眾的身體健康，給患者和醫(yī)療機(jī)構(gòu)造成了不可估量的損失。
目前實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化便成為了當(dāng)務(wù)之急，標(biāo)準(zhǔn)化的檢測(cè)系統(tǒng)建立是分析中質(zhì)量管理的核心，一定要強(qiáng)化檢測(cè)系統(tǒng)的概念，重視不同檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)同一標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。而目前，國內(nèi)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)并沒有實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化，我們致力于研究如何從理念上、設(shè)計(jì)上、硬件設(shè)置上實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)的高通量、系統(tǒng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。對(duì)比國內(nèi)外目前的高通量ELISA檢測(cè)各步驟操作規(guī)程，力爭(zhēng)確定一套較為標(biāo)準(zhǔn)的操作標(biāo)準(zhǔn)，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和客觀性。
關(guān)鍵詞：臨床檢驗(yàn)；自動(dòng)生化分析；模塊化設(shè)計(jì)；全實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化；迅速床邊檢驗(yàn)
醫(yī)療化學(xué)實(shí)驗(yàn)操辦流程的吸樣、去滋擾物、以及計(jì)算成效都被稱為自動(dòng)生化分析儀。自動(dòng)生化分析儀式種種學(xué)科，尤其是電子學(xué)、光學(xué)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及各類生物學(xué)分析對(duì)診療化學(xué)查驗(yàn)需要的質(zhì)和量不停增加的成果。當(dāng)前此技術(shù)已經(jīng)在本國得到了普遍的應(yīng)用，且普及到了基層醫(yī)務(wù)所中。近年來隨著儀器設(shè)備的飛速研發(fā)，已經(jīng)做到可以為常用試劑進(jìn)行自給。
1自動(dòng)化分析儀器類型
1.1連續(xù)流動(dòng)
這種主動(dòng)理化分析儀器是全國最先出現(xiàn)的自行理化分析儀器，其管道體系結(jié)構(gòu)及其紛繁，故障頻頻發(fā)生，操辦過程困難，在如今早已被裁減。
1.2分立式
這種儀器主要靠是人工操作，將樣品的真實(shí)狀況按照恰當(dāng)比例放到分立杯中混合，獲得反應(yīng)數(shù)據(jù)。按照研究所獲數(shù)據(jù)，使用分立式儀器設(shè)備彼此不會(huì)滲透，進(jìn)而防止了污染的出現(xiàn)。技術(shù)更替將這類儀器劃分成為了兩類分別位袋式儀器和干式自動(dòng)特征。前者可以在真實(shí)的化學(xué)透光材質(zhì)中組成特殊的測(cè)試袋，能夠在混合器中被機(jī)械敲擊，以便將藥品充分融合，優(yōu)勢(shì)是污染少，數(shù)據(jù)精準(zhǔn)的特點(diǎn)。2.干式自動(dòng)生化分析儀：其特點(diǎn)為：可以把試劑穩(wěn)固在濾紙中構(gòu)成試劑片，在指定位置內(nèi)通過反射光度計(jì)算得出。如圖1所示為分立式醫(yī)學(xué)自動(dòng)生化分析儀（圖1）。
1.3離心式
此儀器屬于分立式自動(dòng)儀器范圍中，其中心構(gòu)建位離心機(jī)，全部分析過程中都要在離心作用下才能完畢。其工作原理是在離心力中將樣本與試藥加以混淆，特征為：被分析樣品能處在快速盤轉(zhuǎn)中被檢測(cè)。
2主動(dòng)化分析儀在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中的應(yīng)用
一般的基層單位使用最多的是單通道半自動(dòng)生化分析儀或是中型自動(dòng)生化分析儀，這種一起通常只能夠檢測(cè)臨床一般的生化項(xiàng)目。而大型高性能的自動(dòng)生化分析儀器可以同時(shí)檢測(cè)二十個(gè)以上項(xiàng)目的多通道分析以，同時(shí)又選擇功能。大型分析儀器設(shè)計(jì)巧妙，有可見光和紫外光、反射分光、光度計(jì)等測(cè)定功能，讓儀器除過一般生化測(cè)定外，還能夠?qū)μ厥獾牡鞍踪|(zhì)、免疫球蛋白或是檢測(cè)血液濃度。
2.1生化分析儀
在臨床上的大部分檢測(cè)儀器都是依據(jù)可以檢測(cè)的50-60指標(biāo)，除過常規(guī)生化檢測(cè)項(xiàng)目外，大多數(shù)儀器還安設(shè)有離子選擇電級(jí)，能夠用在鉀、鈉、氯離子的檢測(cè)上。這一設(shè)備有專用的急診通道只需按下：“開始”按鍵后就可自行測(cè)定，結(jié)束后返回常規(guī)模式。以分立式儀器為主流的自動(dòng)生化儀器無論在結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、或是功能開展上的應(yīng)用都比較成熟。特別是在模塊化設(shè)計(jì)與POCT理念的出現(xiàn)，自動(dòng)生化分析技術(shù)在一定規(guī)模的臨床實(shí)驗(yàn)和便攜式應(yīng)用中分別獲得了很好的進(jìn)展。這些發(fā)展趨勢(shì)分為：
2.1.1有效抗交叉污染措施當(dāng)前使用最多的被叫做惰性液膠膜技術(shù)，在取樣和試劑時(shí)，惰性液會(huì)與其一同吸入試管中，同時(shí)在管道內(nèi)外壁構(gòu)成一層膜，讓樣品與管壁完全隔離開。所以，樣品間的交叉污染與試劑的交叉污染便可以分別控制。
2.1.2任選式儀器具備在一個(gè)通道任意選擇各種項(xiàng)目的作用，最高可選水平有60多項(xiàng)，通常是20~40項(xiàng)。分為兩種形式，第一種是真正任選，根據(jù)輸入樣品的次序，測(cè)完一個(gè)樣品的全部項(xiàng)目后，再去進(jìn)行下一個(gè)，由于這種方法不用更變吸入的試劑，因此對(duì)抗擊交叉污染要求更高。第二種，是類任選式，以批量測(cè)定的辦法，把所有輸入的樣品項(xiàng)目加以分類，同類的項(xiàng)目一同測(cè)定，測(cè)完一組后再測(cè)另一組，此種方式被很多儀器設(shè)計(jì)人員所應(yīng)用。
2.2免疫檢驗(yàn)
現(xiàn)金，很多自動(dòng)生化分析儀器均有紫外光、投射光的用處，能夠除去免疫球蛋白、補(bǔ)體C3和C4等反應(yīng)性蛋白的測(cè)試。這種免疫可以將血清的特異性的敏感性相融。解決了主觀測(cè)試會(huì)生出的誤差這問題。測(cè)試原理是抗體與抗原，構(gòu)成抗體復(fù)合物。根據(jù)有關(guān)報(bào)道顯示渾濁的高低在抗體存在下和抗原的含量成正相關(guān)關(guān)系。因而消除濁液，能夠消散非抗體類物質(zhì)。顆粒增強(qiáng)抑制濁度法的使用原則是把人血蛋白40um的直徑活化構(gòu)成粒狀、人血清蛋白的單克隆抗體。在測(cè)試帶中逐漸消融。通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，從而制止?jié)岫取?/p>
2.3藥品的檢測(cè)
根據(jù)有關(guān)研究表明大型的主動(dòng)化分析儀器具備熒光偏振功能。在檢測(cè)藥物方面效果顯著。熒光偏振功能，可以在檢測(cè)藥物上有顯著是效果。熒光免疫分析技術(shù)主要利用熒光物質(zhì)對(duì)物體分析，其靈敏性、采取范疇和免疫辦法的差別太大。按照相關(guān)文獻(xiàn)匯報(bào)可得，跟放射免疫法相比，熒光免疫分析解決了酶的不穩(wěn)定，不會(huì)出現(xiàn)同位素污染問題，在藥物的檢測(cè)方面占據(jù)了很大的優(yōu)勢(shì)。熒光偏振免疫分析是在藥物和抗體連系后，經(jīng)過低熒光偏低的改變來測(cè)得。通過編輯藥物和抗體連系形成大分析復(fù)合物，接受偏正光的激發(fā)發(fā)生熒光偏振，小分子藥品沒有與抗體反應(yīng)，受光偏振是通過熒光偏振消散，其偏振強(qiáng)弱與藥物的濃談呈反比例。比如在CobasFARA型自動(dòng)生化分析儀中，光源是氦閃光等，激發(fā)光波長285~750nm連續(xù)能夠調(diào)節(jié)，發(fā)射光波為450nm和515nm，閃光的改變采納考光補(bǔ)償。適用于測(cè)定半抗原，且不用跟游離熒光標(biāo)藥品分離。當(dāng)前，F(xiàn)PLA分析在藥品檢測(cè)中使用愈發(fā)普遍。大量血藥濃度的檢測(cè)，讓臨床指導(dǎo)用藥劑量與提升療效起到了積極用處。但是讓人遺憾的是當(dāng)前改類型試劑出產(chǎn)沒有國際化，進(jìn)口試劑價(jià)格較貴。總之，伴隨自動(dòng)生化分析儀器功能的逐漸健全，改儀器必然在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中發(fā)揮出最大的應(yīng)用價(jià)值。
3實(shí)例分析
3.1貝克曼AU5800
這一主動(dòng)化理化分析，可以有效掌控樣品的質(zhì)量，以及特別元素共同下測(cè)得所測(cè)樣本中的原料，能夠確保儀器在運(yùn)作中得出最佳結(jié)果。避免系統(tǒng)運(yùn)作失誤。在樣本進(jìn)入本設(shè)備中后，測(cè)驗(yàn)所獲得信息會(huì)與樣本需要的檢驗(yàn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)。樣本經(jīng)過模塊通過儀器后，被輸送到采樣位置。R1試劑探針吸取了R1試劑后，通過反應(yīng)杯在混勻器中混合后，樣本探針會(huì)將樣本汲取到對(duì)應(yīng)的反應(yīng)環(huán)內(nèi)，樣本與R1進(jìn)行孵育，R2試劑探針吸取R2試劑，加到反應(yīng)杯中。儀器從添加R1開啟。這一時(shí)刻段每間隔18秒會(huì)繼續(xù)測(cè)量一次，共有27個(gè)測(cè)光點(diǎn)。這一時(shí)間段所測(cè)的數(shù)據(jù)與制定實(shí)驗(yàn)參數(shù)定義波長能夠?qū)y(cè)物濃度計(jì)算出。如圖2所示為貝克曼AU5800自動(dòng)生化分析儀（圖2）。
3.2貝克曼流水線
貝克曼流水線的處理模式高校，可以將工作流程進(jìn)行簡(jiǎn)化、自動(dòng)化，提升工作效率，確保產(chǎn)品質(zhì)量，給臨床提供及時(shí)、可靠、穩(wěn)定的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。讓臨床試驗(yàn)水平得到國際一流水準(zhǔn)。此流水線系統(tǒng)依據(jù)功能的不同可以分為四個(gè)部分既是：樣本處理、分析、存儲(chǔ)以及信息數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。這多個(gè)功能有機(jī)結(jié)合，可以讓軟件預(yù)計(jì)硬件更為完美，讓實(shí)踐操作達(dá)到理想效果。前處理部分有常規(guī)、急診、單管插入三種方式，在樣本輸送模式上采取電管輸送，可以讓樣本在線上運(yùn)作變得更加靈活，依據(jù)不同要求實(shí)現(xiàn)不同運(yùn)輸軌跡，能夠?qū)θ虅?dòng)態(tài)跟蹤，在連接離心機(jī)的部分依據(jù)客戶需要使用單臺(tái)或是多臺(tái)進(jìn)行連接，從而達(dá)到發(fā)展需要；樣品分析，可以對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行實(shí)時(shí)智能分配，讓每個(gè)樣本在運(yùn)作中分析完成率提高，降低復(fù)查率，同時(shí)每臺(tái)分析儀器在運(yùn)作中可以隨意添加需要試劑當(dāng)做單機(jī)使用或是保養(yǎng)，卻不能干擾總線的運(yùn)作和樣本的均衡；存儲(chǔ)部分可存放5440管樣本，讓實(shí)驗(yàn)室真實(shí)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)一體化，降低樣本分析所需要人工操作的環(huán)節(jié)。
[關(guān)鍵詞] 自動(dòng)化檢測(cè)；管理；血站；檢驗(yàn)技術(shù)
[中圖分類號(hào)] R197.324 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] C [文章編號(hào)] 1674-4721（2013）01（b）-0159-02
隨著檢驗(yàn)技術(shù)和計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)化及信息化的發(fā)展，大部分血站實(shí)驗(yàn)室都配置了全自動(dòng)分析系統(tǒng)，并根據(jù)《血站質(zhì)量管理辦法》和《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》的要求，實(shí)現(xiàn)了全面有效的自動(dòng)化管理體系。血站自動(dòng)化檢測(cè)既提高了檢測(cè)質(zhì)量和效率，也減少了人為誤差和受污染的機(jī)會(huì)。目前，血站檢測(cè)系統(tǒng)使用的自動(dòng)化儀器主要有兩大系統(tǒng)，其中前處理全自動(dòng)加樣器是AT、RSP 以及STAR，后續(xù)酶免分析系統(tǒng)是FAME 和BEPO[1]。為提高工作效率、提升檢測(cè)水平，應(yīng)采取科學(xué)、先進(jìn)、有效的管理方式，本文結(jié)合本站2年多來的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，就如何有效、長久地運(yùn)行自動(dòng)化管理手段，得到穩(wěn)定、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果作如下探討：
1 人員素質(zhì)
由于大部分設(shè)備都依靠人員操作，所以培養(yǎng)高素質(zhì)技能人才對(duì)實(shí)現(xiàn)有效的檢測(cè)是非常必要的。依據(jù)相關(guān)法律法規(guī)，實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前必須經(jīng)資深工作人員帶教，接受專業(yè)的實(shí)踐技能培訓(xùn)和職業(yè)道德培訓(xùn)，以及相關(guān)的安全、衛(wèi)生培訓(xùn)，經(jīng)測(cè)試合格后獲得國家規(guī)定的血站工作人員上崗證。實(shí)驗(yàn)室工作人員除了進(jìn)行以上的相關(guān)培訓(xùn)外，還要對(duì)新進(jìn)的儀器設(shè)備的使用進(jìn)行培訓(xùn)，使工作人員充分掌握儀器的基本操作及日常維護(hù)保養(yǎng)工作，并對(duì)新進(jìn)的設(shè)備安裝調(diào)試，建立設(shè)備及項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，對(duì)培訓(xùn)和考核結(jié)果進(jìn)行記錄，以免造成人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi)，以及檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性降低。成立質(zhì)量考評(píng)小組，每月按照各科業(yè)務(wù)考核標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)各科業(yè)務(wù)工作進(jìn)行考核，及時(shí)發(fā)現(xiàn)工作中的錯(cuò)誤，集中分析解決本月存在的問題。
2 設(shè)備與儀器管理
建立儀器設(shè)備的確認(rèn)、維護(hù)、校準(zhǔn)、監(jiān)控程序，并嚴(yán)格實(shí)施，每臺(tái)設(shè)備設(shè)專人管理并使用唯一性標(biāo)簽標(biāo)識(shí)。具體措施如下：成立儀器購置和計(jì)量管理小組，設(shè)專人負(fù)責(zé)儀器的購置。購置儀器的人員需從儀器的廠家、可行性方面考慮是否購置，并在添置洗板機(jī)、酶標(biāo)儀或離心機(jī)等高檔設(shè)備后，向計(jì)量部門申請(qǐng)檢定，驗(yàn)收合格后方可使用。定期做好儀器的維修與保養(yǎng)工作，并設(shè)專人管理設(shè)備檔案，包括購置審批手續(xù)、產(chǎn)品合格證、計(jì)量檢定合格證、驗(yàn)收手續(xù)記錄、使用說明書、使用記錄、損壞維修記錄及其他變動(dòng)情況等八個(gè)方面的內(nèi)容。另外，對(duì)于新進(jìn)的設(shè)備必須經(jīng)安裝調(diào)試確認(rèn)完成后才能使用。指定專人負(fù)責(zé)自動(dòng)化檢驗(yàn)設(shè)備程序的編制，其他工作人員不能隨便改動(dòng)，如有變動(dòng)應(yīng)立即修改。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格遵照儀器設(shè)備的操作規(guī)程進(jìn)行操作，每次使用后應(yīng)及時(shí)清潔消毒，并保持整潔干燥，定期進(jìn)行設(shè)備的維護(hù)和校準(zhǔn)，包括設(shè)備的保養(yǎng)、電源檢查等，做好維護(hù)記錄和校準(zhǔn)記錄，使設(shè)備保持良好的運(yùn)行狀態(tài)，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性。
3 標(biāo)本與試劑的處理
3.1 標(biāo)本的處理
由于血液標(biāo)本的處理對(duì)自動(dòng)化檢測(cè)結(jié)果的影響很大，所以工作人員應(yīng)做好標(biāo)本的采集、貯存等工作，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確。首先，每個(gè)采血人員需考核上崗，合格后才準(zhǔn)正式采血操作。其次，每個(gè)標(biāo)本都應(yīng)有唯一的條形碼標(biāo)簽，且貼于試管中部，以免條形碼掃描不能正常進(jìn)行。另外，工作人員還需保證離心后的血標(biāo)本無溶血、脂血的異常現(xiàn)象，保證有足夠的血清量，如有異常，填寫標(biāo)本返工單，由外采人員重新取樣，確保標(biāo)本符合各檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求。在取樣后需嚴(yán)格執(zhí)行血液貯存條件，每天對(duì)貯血冰箱溫度記錄3次，用2%戊二醛對(duì)貯血冰箱每半個(gè)月進(jìn)行一次消毒處理，血液在有效期內(nèi)發(fā)放，對(duì)于過期報(bào)廢的血液要及時(shí)處理。
3.2 試劑的處理
保證進(jìn)貨渠道正規(guī)，所有試劑必須經(jīng)國家認(rèn)可，具有質(zhì)檢部門及本站質(zhì)控科確認(rèn)的合格證書，免疫試劑還必須有批檢激光防偽標(biāo)志。使用前將試劑放于室溫平衡半小時(shí)，檢查試劑包裝密封是否完好，試劑是否足量，檢查合格后，按比例配制試劑，且盡量由一人核對(duì)，以免加錯(cuò)試劑。試驗(yàn)完成后將剩余試劑加蓋存放于2～8℃的冰箱內(nèi)，嚴(yán)格填寫出入庫、交接手續(xù)。為避免標(biāo)本的污染，出現(xiàn)花板現(xiàn)象，一般2周需清洗容器一次。
4 環(huán)境要求
由于自動(dòng)化儀器對(duì)環(huán)境要求較高，如不注重實(shí)驗(yàn)環(huán)境，往往易形成潛在隱患。實(shí)驗(yàn)室的建筑與設(shè)施應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》和《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》中的規(guī)定[2-4]，要求實(shí)驗(yàn)室布局合理且有明確的分區(qū)，有充足的照明和操作空間以及有效的消毒設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室室溫應(yīng)保持在18～25℃，相對(duì)濕度保持在50%～80%，環(huán)境溫度過低易使弱陽性標(biāo)本出現(xiàn)漏檢現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)室周圍也應(yīng)避免電網(wǎng)強(qiáng)磁場(chǎng)的干擾。為排除環(huán)境因素對(duì)儀器的影響，實(shí)驗(yàn)室主管應(yīng)購置自動(dòng)化儀器對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行評(píng)估，必要時(shí)提前做好實(shí)驗(yàn)室環(huán)境改造的準(zhǔn)備[5-6]。
5 操作流程要求
為確保檢測(cè)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)步驟、檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，對(duì)檢驗(yàn)科免疫項(xiàng)目的檢測(cè)原始記錄和實(shí)驗(yàn)操作步驟應(yīng)精確到每分每秒，并執(zhí)行嚴(yán)格的檔案管理制度，定期總結(jié)、整理，保證有據(jù)可依。
目前，按照《血站質(zhì)量管理辦法》和《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》的要求，血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系已經(jīng)建立，但建立全面有效的血站實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化體系不是最終目標(biāo)，我們旨在如何使整個(gè)體系有效、持久的運(yùn)行。為了提高血站自動(dòng)化檢測(cè)管理水平，應(yīng)保證實(shí)驗(yàn)室充足的人力資源，并加強(qiáng)工作人員的培訓(xùn)學(xué)習(xí)，保證設(shè)備儀器的正常運(yùn)行，持續(xù)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系，為安全輸血提供更有力的保證。
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（新疆伊寧衛(wèi)生學(xué)校 新疆 伊寧 835000）
摘要：通過問卷調(diào)查、專家訪談和實(shí)地考察的形式對(duì)新疆伊犁地區(qū)28家醫(yī)院進(jìn)行臨床調(diào)研，目的是掌握伊犁地區(qū)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的人員結(jié)構(gòu)，完善人才培養(yǎng)目標(biāo)，促進(jìn)學(xué)生就業(yè)。調(diào)查結(jié)果表明，人才培養(yǎng)目標(biāo)必須與市場(chǎng)需求一致，培養(yǎng)規(guī)格必須適應(yīng)臨床工作崗位群的特點(diǎn)。
關(guān)鍵詞 ：伊犁地區(qū)；醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)；人員結(jié)構(gòu)；人才培養(yǎng)；就業(yè)率
中圖分類號(hào)：G710 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5727（2014）05-0034-02
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人才是醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)衛(wèi)生技術(shù)人員中的一支重要隊(duì)伍。近年來，隨著社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、科學(xué)的迅猛發(fā)展，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)在我國也得到了快速發(fā)展，檢驗(yàn)技術(shù)裝備日趨專業(yè)化、精密化，檢驗(yàn)技術(shù)水準(zhǔn)逐步提高。與此同時(shí)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)教育也發(fā)生了深刻的變革。如何適應(yīng)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要，培養(yǎng)高質(zhì)量的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技能型人才是亟待探討的課題。2011年7～8月暑假期間，我們對(duì)新疆伊犁地區(qū)28家州級(jí)、市級(jí)、縣級(jí)及基層醫(yī)院進(jìn)行實(shí)地調(diào)研，經(jīng)過對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人員隊(duì)伍的現(xiàn)狀、發(fā)展需求、崗位分布、用人單位對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人才需求的全面調(diào)查，旨在為科學(xué)、合理地制定醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人才培養(yǎng)方案提供參考依據(jù)。
調(diào)研的基本思路與形式
調(diào)研內(nèi)容 通過對(duì)伊犁地區(qū)州級(jí)、市級(jí)、縣級(jí)及基層醫(yī)院進(jìn)行實(shí)地調(diào)研和座談交流，了解各醫(yī)院目前的檢驗(yàn)技術(shù)裝備、技術(shù)門類、檢驗(yàn)技術(shù)人員學(xué)歷及職稱情況、知識(shí)結(jié)構(gòu)和專業(yè)素質(zhì)等情況。
調(diào)研方法 2011年暑假期間，我校先后組織醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)十余名教師對(duì)伊犁地區(qū)2個(gè)州、3個(gè)市、8個(gè)縣、5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)共28家州級(jí)、市級(jí)、縣級(jí)及基層醫(yī)院進(jìn)行實(shí)地調(diào)研和座談交流，對(duì)不同層次醫(yī)院的檢驗(yàn)人員進(jìn)行調(diào)查，分析檢驗(yàn)人員人數(shù)、年齡、職稱和學(xué)歷結(jié)構(gòu)分布情況。
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)職業(yè)崗位現(xiàn)狀分析
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人員基本情況 調(diào)研結(jié)果表明，目前新疆伊犁地區(qū)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人員年齡分布結(jié)構(gòu)尚合理，以中青年檢驗(yàn)技術(shù)人員為主，但職稱和學(xué)歷結(jié)構(gòu)普遍偏低。與此同時(shí)，國家撥專款為鄉(xiāng)鎮(zhèn)、社區(qū)醫(yī)院配備了常用的檢驗(yàn)儀器設(shè)備，但多數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院由于缺乏醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)人員部分檢驗(yàn)業(yè)務(wù)沒有完全開展起來，儀器設(shè)備使用率偏低，尤其是鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生機(jī)構(gòu)，還存在人員不足、學(xué)歷及職稱偏低、知識(shí)結(jié)構(gòu)和專業(yè)素質(zhì)有待提高等問題。詳見表1、表2，下頁表3、表4。
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)對(duì)應(yīng)的職業(yè)崗位及能力分析 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人員主要分布于各級(jí)各類醫(yī)院。調(diào)查結(jié)果顯示，按科室分類崗位設(shè)置比例，從高到低依次為生化、免疫、門診、臨檢、微生物、血庫及臨床急診等七個(gè)科室，對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人員的各種能力要求包括職業(yè)基本能力、職業(yè)專業(yè)技術(shù)能力及職業(yè)基本素質(zhì)。詳見表5。
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)發(fā)展趨勢(shì)
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展，特別是檢驗(yàn)儀器的迅速發(fā)展，使生化、臨床檢驗(yàn)、免疫學(xué)和微生物學(xué)檢驗(yàn)中的部分項(xiàng)目已實(shí)現(xiàn)了全自動(dòng)或半自動(dòng)化。不斷發(fā)展的新型檢驗(yàn)技術(shù)，如生化檢驗(yàn)中的酶促速率法分析技術(shù)、臨床檢驗(yàn)中的干化學(xué)試紙條法檢測(cè)、免疫檢驗(yàn)中的放射免疫、酶免疫及化學(xué)發(fā)光、微生物檢驗(yàn)中的全自動(dòng)鑒定技術(shù)和以聚合酶鏈反應(yīng)為代表的分子生物學(xué)新技術(shù)，使檢測(cè)方法的靈敏度不斷提高，檢測(cè)結(jié)果也更加準(zhǔn)確可靠，檢驗(yàn)技術(shù)裝備日趨專業(yè)化、精密化。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展和檢測(cè)項(xiàng)目逐漸增多，臨床疾病的診斷對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目的依賴愈加明顯，已由單純的輔技術(shù)工作變成直接參與臨床診斷、科研和醫(yī)療決策的手段，對(duì)疾病的診斷、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估都起著越來越重要的作用。過去臨床檢驗(yàn)科室一直被看作是醫(yī)院的輔助科室，而目前檢驗(yàn)科室所應(yīng)用的技術(shù)手段是否先進(jìn)、開展檢測(cè)項(xiàng)目的數(shù)量及檢測(cè)水平如何，已經(jīng)成為衡量一所醫(yī)院整體水平高低的重要指標(biāo)。因此，檢驗(yàn)學(xué)科及其相關(guān)部門在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的地位和作用越來越受到重視。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的快速發(fā)展對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才培養(yǎng)提出了更高的要求，使得醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)教育中發(fā)展最快的專業(yè)之一。
應(yīng)該看到，自動(dòng)化儀器檢驗(yàn)雖具有速率快、重復(fù)性好、干擾因素小、可批量測(cè)定等特點(diǎn)，便于室內(nèi)質(zhì)控和評(píng)價(jià)，是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展的主流，但隨著自動(dòng)化儀器的普及，忽略標(biāo)本的形態(tài)學(xué)觀察造成漏檢、誤診也時(shí)有發(fā)生。實(shí)踐證明，儀器再精確、再智能也不能完全取代顯微鏡檢驗(yàn)，儀器不可能有完全的思維鑒別能力。因此，形態(tài)檢驗(yàn)技能是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人員必備的技能，是任何儀器設(shè)備無法替代的，應(yīng)注重對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)學(xué)生此項(xiàng)技能的培訓(xùn)。
參考文獻(xiàn)：
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原理,其基本操作過程是:樣本 加酶標(biāo)記物 洗板 加底物液 加終止液酶標(biāo)儀比色 判定結(jié)果。針對(duì)加終止液酶標(biāo)儀比色 判定結(jié)果這一步操作,為探討終止反應(yīng)后延時(shí)不同時(shí)間比色的樣本OD值變化對(duì)結(jié)果的影響,作者對(duì)13名HBsAg陽性的血清標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1材料和方法
1.1標(biāo)本來源從428名來我院進(jìn)行體檢的體檢者中檢出的13例HBsAg陽性血清標(biāo)本。
1.2儀器與試劑
1.2.1儀器KHB ST-360酶標(biāo)儀,KHB ST-36W洗板機(jī)。
1.2.2試劑濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)。
1.3方法
1)對(duì)13例血清標(biāo)本進(jìn)行隨機(jī)編號(hào),依次為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13號(hào),用ELISA法檢測(cè)13例血清標(biāo)本HBsAg,按照試劑盒中的說明書操作。
2)在加入終止液混勻后立即在酶標(biāo)儀上比色,記為
0 min的OD值。然后依次在加入終止液后的10 min、
20 min、30 min、40 min在酶標(biāo)儀上比色,分別記為10 min、20 min、30 min、40 min的OD值。
3)結(jié)果判斷。本試驗(yàn)的C.O.為0.105,以0 min的OD值/C.O.≥1者判為HBsAg陽性,13例血清全部陽性。
4)將0 min的OD值分別與10 min、20 min、30 min、40 min的OD值配成對(duì)子,共4對(duì)。用配對(duì)t檢驗(yàn),分別比較
0 min的OD值與10 min、20 min、30 min、40 min的OD值,結(jié)果(表1)。
2結(jié)果
從表1中可以看出,終止反應(yīng)后延時(shí)10 min、20 min的OD值與0 min的OD值比較,P>0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。終止反應(yīng)后延時(shí)30 min、40 min的OD值與0 min的OD值比較,P
3討論
實(shí)驗(yàn)室在應(yīng)用試劑盒檢測(cè)標(biāo)本時(shí),一般都是按照試劑盒中的說明書進(jìn)行操作。本試驗(yàn)試劑盒中的說明書上表明的比色時(shí)間應(yīng)在終止反應(yīng)的30 min內(nèi)完成。而作者所做的試驗(yàn)結(jié)果卻是:在終止反應(yīng)的20～30 min這段時(shí)間內(nèi),樣本的OD值便與0 min的OD值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這種差異對(duì)OD值較高的強(qiáng)陽性標(biāo)本影響不大,但對(duì)于OD值較低的弱陽性標(biāo)本,容易造成假陰性結(jié)果。從表1中可以看到,第9號(hào)標(biāo)本在延時(shí)第10分鐘比色時(shí),已經(jīng)由弱陽性轉(zhuǎn)為陰性。對(duì)于有自動(dòng)化免疫分析儀的實(shí)驗(yàn)室,不存在延時(shí)比色的問題。但對(duì)于沒有自動(dòng)化免疫分析儀的實(shí)驗(yàn)室來說,這個(gè)問題就應(yīng)引起重視。作者建議用ELISA進(jìn)行HBsAg測(cè)定的操作過程中,加終止液終止反應(yīng)后應(yīng)立即比色。我國是乙型肝炎的高發(fā)地區(qū),HBsAg攜帶者約為1.2億,攜帶率為10%[1]。為了避免給臨床造成漏診、誤診,我們?cè)趯?shí)際工作中,應(yīng)以嚴(yán)謹(jǐn)負(fù)責(zé)的工作態(tài)度,認(rèn)真實(shí)踐,嚴(yán)格控制導(dǎo)致HBsAg假陰性結(jié)果的因素,減少誤差,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
參考文獻(xiàn)
[關(guān)鍵詞]政府機(jī)關(guān)；辦公自動(dòng)化；系統(tǒng)安全
中圖分類號(hào)：TP311.52 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2015）36-0246-01
0 前言
如今政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)系統(tǒng)已經(jīng)得到相當(dāng)大普及，大大提高了政府的辦事效率。但是政府機(jī)關(guān)在運(yùn)用辦公自動(dòng)化系統(tǒng)時(shí)還是出現(xiàn)了一些問題，由于辦公自動(dòng)化系統(tǒng)的普及，網(wǎng)絡(luò)鋪蓋面積非常大，使用人員自然就會(huì)增多，其中管理水平是參差不齊的，這是導(dǎo)致政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全問題的最主要原因。由于使用管理水平的參差不齊，因而政府機(jī)關(guān)在進(jìn)行信息傳遞時(shí)，辦公自動(dòng)化系統(tǒng)是無法保證信息問安全性的。除此之外，還有一些專門攻破政府機(jī)關(guān)辦公信息的網(wǎng)絡(luò)黑客，導(dǎo)致辦公自動(dòng)化系統(tǒng)受到嚴(yán)重威脅。政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全關(guān)系著政府機(jī)關(guān)的辦事效率、關(guān)系著各類文件信息的保密、關(guān)系著能否更好的為人民服務(wù)。
1 政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全常見問題
辦公自動(dòng)化系統(tǒng)為政府機(jī)關(guān)提高辦事效率提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持，而且在使用上非常方便快捷，但是此種自動(dòng)化的辦公模式也是有缺陷的，因?yàn)檗k公自動(dòng)化的模式具有開放性特點(diǎn)，所以非常容易導(dǎo)致系統(tǒng)的安全問題，如病毒的入侵、系統(tǒng)遭到破壞等等問題。病毒入侵、系統(tǒng)遭到破壞導(dǎo)致的結(jié)果就是政府機(jī)關(guān)工作信息遭到泄露、系統(tǒng)損壞、數(shù)據(jù)庫信息丟失等等問題。
1.1 電腦黑客的侵入
電腦黑客入侵是致使數(shù)據(jù)庫信息丟失的最主要原因。電腦黑客通過非法的手段進(jìn)入政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)當(dāng)中，對(duì)整個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行破壞，如在網(wǎng)頁上、程序上、磁盤上等等進(jìn)行信息篡改、信息竊取等等破壞行為。電腦黑客之所會(huì)入侵政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)就一定有其目的性，因此必須予以重視。電腦黑客會(huì)如此輕松的對(duì)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)進(jìn)行入侵，究其原因主要是因?yàn)樵谡畽C(jī)關(guān)網(wǎng)絡(luò)設(shè)置當(dāng)中用因特網(wǎng)作為連接的出口，這樣網(wǎng)絡(luò)黑客可以很容易的進(jìn)行入侵。
1.2 病毒感染
當(dāng)今網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)飛速發(fā)展，與此同時(shí)網(wǎng)絡(luò)病毒的滋生也是不斷。網(wǎng)絡(luò)病毒并不是單一的形式出現(xiàn)，而是多種多樣的，而且破壞性強(qiáng)、病毒流通性快、不容易被除掉等等特點(diǎn)。網(wǎng)絡(luò)病毒的傳播方式是擴(kuò)散性的，一般的殺毒軟件無法進(jìn)行控制，具有一定的免疫力。由此可以看出，當(dāng)病毒進(jìn)入到政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)當(dāng)中時(shí)，就很快能做到擴(kuò)散式的傳播，使整個(gè)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)癱瘓掉。
1.3 系統(tǒng)漏洞
任何一個(gè)系統(tǒng)都是會(huì)有有漏洞、有缺陷出現(xiàn)的，這其中自然包括政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)。既然是這種情況，那么就需要我們定期、經(jīng)常的給系統(tǒng)做一些漏洞補(bǔ)丁、修補(bǔ)等等。但是由于當(dāng)今辦公自動(dòng)化系統(tǒng)應(yīng)用廣泛，使用管理人員水平參差不齊，導(dǎo)致不能夠定期為系統(tǒng)做一些修補(bǔ)。還有一個(gè)原因就是在進(jìn)行辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安裝時(shí)，安裝人員都會(huì)為系統(tǒng)留一個(gè)后門，如果這個(gè)后門遭到泄漏，那么威脅性會(huì)更大。
2 政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全策略
2.1 網(wǎng)絡(luò)安全預(yù)警策略
要想使政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全問題得到解決，那么建立網(wǎng)絡(luò)安全預(yù)警是非常重要的。在辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全問題當(dāng)中了解到有電腦黑客的入侵和病毒的感染，那么在網(wǎng)絡(luò)安全預(yù)警當(dāng)中也就分成了兩個(gè)組成部分。一個(gè)是入侵預(yù)警，另一個(gè)是病毒預(yù)警。首先說入侵預(yù)警，它的主要功能就是針對(duì)數(shù)據(jù)傳輸過程中不規(guī)范行為進(jìn)行規(guī)范。一旦發(fā)現(xiàn)沒有進(jìn)行授權(quán)的數(shù)據(jù)信息，就立即進(jìn)行自動(dòng)報(bào)警，并且在報(bào)警過后形成相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)處理報(bào)告，通過報(bào)告可以對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行改良，以防黑客的入侵。其次是病毒預(yù)警，病毒預(yù)警的處理方式就是對(duì)整個(gè)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)傳輸?shù)臄?shù)據(jù)、文件進(jìn)行掃描，一旦發(fā)現(xiàn)病毒立即報(bào)警。
2.2 數(shù)據(jù)安全保護(hù)策略
2.2.1 黑客入侵方面
首先必須對(duì)物理設(shè)備進(jìn)行防護(hù)，如在無線通信的線路方面、有線通信線路方面、各項(xiàng)服務(wù)器等等。其次是對(duì)不同的數(shù)據(jù)信息進(jìn)行不同的服務(wù)器儲(chǔ)存。而且在訪問時(shí)一定要設(shè)定相應(yīng)的身份驗(yàn)證、密碼輸入等等防護(hù)措施。最后，對(duì)一些至關(guān)重要的數(shù)據(jù)信息一定要謹(jǐn)慎處理，對(duì)其進(jìn)行加密與訪問時(shí)的認(rèn)證。
2.2.2 病毒破壞方面
首先要采取的是物理防護(hù)措施，把此種措施主要應(yīng)用在辦公自動(dòng)化系統(tǒng)的核心設(shè)置當(dāng)中，例如在電源多方面，采用冗余模塊方式，在交換端口方面，采用冗余備份方式。其次改變其存儲(chǔ)方式和數(shù)據(jù)管理的方式，利用磁盤來進(jìn)行存儲(chǔ)和管理，磁盤存儲(chǔ)方式包括鏡像和陳列。最后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行備份工作，這樣做其有利之處在于即使數(shù)據(jù)丟失也可以得到恢復(fù)。
3 總結(jié)
當(dāng)今是互聯(lián)網(wǎng)時(shí)代，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步與發(fā)展、各類新技術(shù)、新研究的層出不求，辦公自動(dòng)化系統(tǒng)的出現(xiàn)為政府機(jī)關(guān)提高辦事效率提供強(qiáng)有力技術(shù)支持。由此可見辦公自動(dòng)化系統(tǒng)的重要性，其中辦公自動(dòng)化化系統(tǒng)的安全更是關(guān)系著政府機(jī)關(guān)的辦事效率、關(guān)系著各類文件信息的保密、關(guān)系著能否更好的為人民服務(wù)。因此本文從政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全常見問題出發(fā)，再對(duì)政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)安全常見問題對(duì)策進(jìn)行探討分析。希望對(duì)政府機(jī)關(guān)辦公自動(dòng)化系統(tǒng)起到借鑒作用。
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優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)
1)親和力高、特異性強(qiáng)。適配體與靶標(biāo)之間，憑借彼此互補(bǔ)的三維結(jié)構(gòu)，相互作用后形成牢固穩(wěn)定的復(fù)合物，其解離常數(shù)通常能達(dá)到pmol/L～nmol/L的水平，并且能分辨出靶標(biāo)結(jié)構(gòu)上細(xì)微的差別。
2)庫容量大，識(shí)別范圍廣泛。SELEX技術(shù)的靶標(biāo)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于經(jīng)典的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，除了有蛋白質(zhì)、核苷酸分子外，還可以是糖類、氨基酸、維生素、抗生素、金屬離子、有機(jī)染料，甚至可以是細(xì)菌、病毒、寄生蟲等完整的細(xì)胞或組織，幾乎囊括了自然界中的全部物質(zhì)。
3)合成容易，獲得方便，易于修飾。適配體的體積比傳統(tǒng)抗體小，篩選過程簡(jiǎn)便、周期短，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的要求不高，并具備自動(dòng)化控制的巨大潛力。經(jīng)過化學(xué)合成和修飾以后可保持原生物活性不變，還可以增強(qiáng)其穩(wěn)定性并增加其他新的化學(xué)性質(zhì)，參加多類反應(yīng)。標(biāo)記了熒光、生物素和納米金顆粒之后，發(fā)展出了諸如分子成像技術(shù)等疾病診斷新方法。
4)重復(fù)性好，純度高。整個(gè)篩選和制備的過程在人為控制之下，所得到的適配體幾乎沒有生產(chǎn)批次之間的差異，便于日后的大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。的化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，不易降解，對(duì)溫度不敏感，保存時(shí)間長，即使變形也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)性，利于室溫下運(yùn)輸。
5)分子量小、穩(wěn)定性高。相對(duì)于抗體或酶，適配體的化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，不易降解，對(duì)溫度不敏感，保存時(shí)間長，即使變形也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)性，利于室溫下運(yùn)輸。
6)應(yīng)用便捷。SELEX技術(shù)所獲得的適配體又被稱作是核酸型抗體，其優(yōu)于傳統(tǒng)抗體的性質(zhì)是沒有免疫原性，因此便能獲得一些低免疫原性甚至無免疫原性靶分子的適配體。并且還省去了傳統(tǒng)抗體制備過程中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，而直接從體外文庫中獲取。而且適配體更容易通過細(xì)胞膜，并且沒有毒性，利于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的靶分子和實(shí)現(xiàn)多層次的調(diào)控，并能較快地被機(jī)體清除代謝掉，經(jīng)過特定的化學(xué)修飾后，還可使半衰期延長，穩(wěn)定性提高，便于科學(xué)研究和疾病診治。
2SELEX技術(shù)的發(fā)展
目前SELEX技術(shù)出現(xiàn)了一些新的篩選方法，越來越多的與各種標(biāo)靶相對(duì)應(yīng)的適配體被篩選出來。如毛細(xì)管電泳法、硝酸纖維素膜過濾法、磁珠分離法、親和色譜法、Non-SELEX技術(shù)、無引物PCR-SELEX技術(shù)、微流體SELEX技術(shù)、生物芯片SELEX技術(shù)、原子力顯微鏡等各種新的模式也被應(yīng)用到適配體的篩選中。同時(shí)還出現(xiàn)了SELEX技術(shù)與定量PCR，SEL-EX技術(shù)與流式細(xì)胞儀、SELEX技術(shù)與ELISA的聯(lián)合應(yīng)用，更是極大的提升了篩選的效率和準(zhǔn)確性。
2．1消減SELEX技術(shù)消減
SELEX技術(shù)是一種經(jīng)過改良的SELEX技術(shù)。以完整細(xì)胞為靶標(biāo)的消減SELEX技術(shù)，是在篩選過程中以完整的細(xì)胞作為靶標(biāo)，并消減掉能與已知或未知的共有靶標(biāo)結(jié)合的配體，經(jīng)過消減后的次級(jí)隨機(jī)文庫再投入到特異靶標(biāo)的篩選中。它的意義在于可以實(shí)現(xiàn)從兩組高度同源的完整細(xì)胞中，篩選出針對(duì)其中一種細(xì)胞的特異性適配體。這項(xiàng)技術(shù)可應(yīng)用于發(fā)現(xiàn)新的腫瘤細(xì)胞識(shí)別結(jié)構(gòu)，還可進(jìn)一步作為“生物導(dǎo)彈”，獨(dú)立完成靶向治療或攜帶藥物，未來將會(huì)在腫瘤的治療中發(fā)揮巨大的功效。
2．2自動(dòng)化SELEX技術(shù)
傳統(tǒng)的SELEX技術(shù)過程需要完成一套重復(fù)繁瑣的操作，使得篩選相對(duì)耗時(shí)耗力。自動(dòng)化SELEX技術(shù)的建立可以簡(jiǎn)化篩選過程，節(jié)約時(shí)間和物品的消耗，實(shí)現(xiàn)高通量和限定范圍，達(dá)到同時(shí)篩選多個(gè)靶分子的效果。自動(dòng)化SELEX技術(shù)離不開現(xiàn)代分離儀器的配合，后者的發(fā)展推動(dòng)了前者的進(jìn)步。2001年Cox等使用Biomek2000自動(dòng)化工作站成功篩選到了溶菌酶的特異性適配體，通過這種自動(dòng)化篩選平臺(tái)，不到2d就完成了12輪的篩選。
2．3導(dǎo)向SELEX技術(shù)
適配體的特異性是整個(gè)SELEX技術(shù)的核心所在，為了提高適配體的特異性和穩(wěn)定性，可將已知的能與靶標(biāo)非特異結(jié)合的分子摻入到文庫中或預(yù)先與靶標(biāo)進(jìn)行混合后再篩選，這樣可獲得只與靶標(biāo)特異結(jié)合的適配體。2002年Hamm等將此技術(shù)與抗個(gè)體基因型的方法聯(lián)合運(yùn)用，成功獲得了特定激酶抑制劑的特異性RNA適配體。Martell運(yùn)用特殊的導(dǎo)向SELEX技術(shù)，從隨機(jī)表達(dá)盒雜交文庫中篩選到了能與E2F蛋白具有高親和性的RNA適配體。
3SELEX技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
3．1SELEX技術(shù)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
依據(jù)核酸適配體具有與靶物質(zhì)高特異性結(jié)合的能力，可以幫助我們尋找到疾病的發(fā)病機(jī)制。Roulet等提出把SELEX技術(shù)同基因表達(dá)串行分析手段聯(lián)合應(yīng)用，并通過自動(dòng)化的序列提取工藝，建立轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的定位模型。通過對(duì)轉(zhuǎn)錄因子適配體文庫中的某一序列進(jìn)行測(cè)序，可了解該蛋白結(jié)合位點(diǎn)的特異性，探尋一些以前在基因組中從未研究過的結(jié)合位點(diǎn)，掌握在不同的核苷酸位點(diǎn)上非獨(dú)立堿基出現(xiàn)的先后順序，為闡明其結(jié)合機(jī)制提供一些線索。Bian-chi等采取SELEX技術(shù)發(fā)現(xiàn)，TRF1二聚體在端粒上有兩個(gè)相同的識(shí)別半位點(diǎn)，它們的距離可以變化，且兩個(gè)半位點(diǎn)的順序方向沒有區(qū)別。這為探索端粒長度的調(diào)節(jié)機(jī)制提供了新依據(jù)。
3．2SELEX技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用
腫瘤細(xì)胞及其標(biāo)志物的早期檢測(cè)對(duì)于腫瘤的診斷及預(yù)后極為重要，目前已經(jīng)篩選出多種腫瘤的特異性適配體，例如急性髓系白血病的適配體KH1C12、急性淋巴細(xì)胞白血病的適配體sgc8/sgc3/sgd3、惡性膠質(zhì)瘤的適配體GBI-10、Burrkitt淋巴瘤的適配體TD05、非小細(xì)胞肺癌的適配體S1/S11e/S15、小細(xì)胞肺癌的適配體HCA12/HCC03/HCH07/HCH01、乳腺癌的適配體KMF2-1a、結(jié)腸癌的適配體KDED2/KD-ED7/KDED9/KC2D3、小鼠肝癌的適配體TLS9a/TLS11a、卵巢癌的適配體DOV3/DOV4/DOV6。它們可以特異地識(shí)別腫瘤細(xì)胞，僅需少量腫瘤細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的鑒別和分型。將適配體與納米顆粒結(jié)合后通過比色檢測(cè)，觀察顏色的變化即可判斷有無靶標(biāo)細(xì)胞。這個(gè)實(shí)驗(yàn)非常敏感，樣本中的靶細(xì)胞數(shù)超過百個(gè)即可檢測(cè)出來，還不需要昂貴的檢測(cè)設(shè)備和待檢靶標(biāo)的標(biāo)記與修飾。因此，有可能成為常規(guī)篩查活體標(biāo)本中新生腫瘤細(xì)胞的一種新方案。與此同時(shí)腫瘤細(xì)胞的分子成像技術(shù)也已經(jīng)問世，它能夠從細(xì)胞水平對(duì)生物過程進(jìn)行可視化描述及測(cè)量，不僅能定位病灶，觀察某些影響腫瘤細(xì)胞行為的生物過程，還能觀察腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的反應(yīng)。Kim等研究將前列腺特異性膜抗原(PSMA)的特異性適配體與金納米材料結(jié)合后，帶有PSMA的前列腺癌細(xì)胞便能夠被特異性地標(biāo)記出來，將其作為造影劑應(yīng)用在前列腺腫瘤的影像學(xué)診斷中，比傳統(tǒng)的造影劑顯像時(shí)間更持久，毒副作用更小，應(yīng)用價(jià)值更顯著。SELEX技術(shù)還在血液的生化檢查方面，顯示出一定的應(yīng)用前景。用其檢測(cè)血液中的某些靶分子，將比傳統(tǒng)方法更特異和高效。腦尿鈉肽(BNP)常被臨床上用來評(píng)價(jià)急性心力衰竭或急性呼吸窘迫癥患者的病情和預(yù)后。Lin等采用SELEX技術(shù)的原理，篩選到了能與BNP特異結(jié)合的適配體。在微流體試驗(yàn)?zāi)Ｊ较拢粺晒鈽?biāo)記的適配體可以快速測(cè)出血液中BNP的濃度，比放射免疫分析法或是免疫分析技術(shù)更精確、更經(jīng)濟(jì)。C反應(yīng)蛋白(CRP)是機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下生成的一種非特異性的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，CRP與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死等心血管疾病具相關(guān)性。Bini等開發(fā)出了一種帶有光化學(xué)性質(zhì)的CRP特異性適配體，當(dāng)血液中的CRP濃度超0．005mg/L時(shí)就能被檢測(cè)出來，敏感度非常高。這一成果為新型CRP診斷試劑的研制奠定了基礎(chǔ)。SELEX技術(shù)還被應(yīng)用在病原微生物的檢測(cè)，其能克服傳統(tǒng)檢測(cè)方法在特異性和敏感性上的缺陷，為新型檢測(cè)試劑盒的開發(fā)提供有力支持。例如結(jié)合分支桿菌的特異性適配體CSRI2．11檢測(cè)過程比傳統(tǒng)的培養(yǎng)鑒定法更省時(shí)更敏感;丙型肝炎病毒的適配體ZE2可結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)現(xiàn)丙型肝炎的早期篩查，不受抗體檢測(cè)時(shí)窗口期的制約;瘧原蟲乳酸脫氫酶的適配體PL1在臨床實(shí)踐中，可以很好的區(qū)分患者是否感染了出間日瘧原蟲或惡性瘧原蟲。
3．3SELEX技術(shù)在疾病治療中的應(yīng)用
SELEX技術(shù)在疾病治療中的功效越來越來受到人們的重視。適配體在體內(nèi)與靶分子結(jié)合，理論上可以對(duì)靶分子的生理功能和代謝過程產(chǎn)生影響，靶分子也會(huì)因此發(fā)生信號(hào)傳導(dǎo)的改變甚至喪失原本的功能，直接或間接阻斷疾病發(fā)生進(jìn)程。以此開發(fā)的靶蛋白功能阻斷劑，日益顯示出其巨大的潛力。全球首個(gè)適配體藥物是2004年由美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)上市的哌加他尼鈉，可用來治療老年性黃斑變性。SELEX技術(shù)在凝血系統(tǒng)疾病的治療上具有一定的意義，已找到了可用作抗凝血和抗血栓藥物的適配體REG-1，其結(jié)合的位點(diǎn)是凝血酶的肝素結(jié)合位點(diǎn)以及纖維蛋白原結(jié)合位點(diǎn)。在治療免疫系統(tǒng)疾病方面，也已獲得了具有藥物開發(fā)潛力的特異性適配體，如可用來拮抗自身抗體已達(dá)到治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的適配體，還有能刺激T細(xì)胞釋放的4-1BB的適配體。對(duì)于腫瘤的治療，基于SELEX技術(shù)研制的適配體藥物更是走在前列，進(jìn)入到了臨床試驗(yàn)階段。如對(duì)實(shí)體瘤和復(fù)發(fā)性急性髓樣白血病有良好療效的AS1411，更出現(xiàn)了連接金納米棒的適配體，用作腫瘤靶向光熱治療。適配體藥物作為抗病毒藥，也展現(xiàn)出良好的前景，比如用來抑制狂犬病病毒的復(fù)制和干擾艾滋病病毒的體內(nèi)合成。除此以外，核酸適配體還可作為運(yùn)輸工具，特異性地把藥物運(yùn)送至靶標(biāo)細(xì)胞或組織達(dá)到定點(diǎn)清除的治療效果，研究比較成熟的有裝載著阿霉素，用來殺傷前列腺癌細(xì)胞的復(fù)合適配體藥物。
4展望
關(guān)鍵詞：食品微生物 檢測(cè)項(xiàng)目 檢測(cè)技術(shù) 質(zhì)量控制
中圖分類號(hào)：U46 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）06（a）-0173-01
隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)的快速發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，出現(xiàn)了各種各樣的食品安全問題，成為全世界關(guān)注的焦點(diǎn)問題[1]。食品微生物檢驗(yàn)是食品監(jiān)測(cè)必不可少的構(gòu)成部分，是判斷被檢食品是否可被食用、衡量食品衛(wèi)生狀況的重要指標(biāo)和重要判定依據(jù)之一。食品微生物檢測(cè)結(jié)果反映出食品衛(wèi)生環(huán)境和食品加工環(huán)境的具體現(xiàn)狀，能評(píng)價(jià)食品為微生物污染的狀況，為食品安全監(jiān)督和管理工作提供重要的科學(xué)依據(jù)。為了提高食品衛(wèi)生質(zhì)量，保障飲食安全，筆者對(duì)食品微生物檢驗(yàn)的主要項(xiàng)目、檢驗(yàn)技術(shù)和質(zhì)量控制進(jìn)行分析。
1 食品微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目
1.1 食品污染程度指示菌
在食品加工、運(yùn)輸、儲(chǔ)存一直到食用前的任何環(huán)節(jié)，微生物均可以通過各種途徑進(jìn)入食品中造成污染。檢測(cè)食品中的大腸菌群和菌落總數(shù)，可以評(píng)定食品污染的程度。
大腸菌群是指載7 ℃的條件下，能分解乳糖、產(chǎn)氣、產(chǎn)酸的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群與糞便污染有關(guān)，一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。因此將其作為糞便污染指標(biāo)菌提出，表明食品是否存在糞便污染。食品中的大腸菌群數(shù)是指在100 g或100 mL樣本中，大腸菌群數(shù)的最近似數(shù)（MNP）表示。大腸菌群數(shù)的高低，直接表明了糞便污染的程度，也間接反映了對(duì)人體健康危害性的大小。食品中有糞便污染，則可以推測(cè)該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性，可能出現(xiàn)食物中毒和流行病，對(duì)人體健康具有潛在的危險(xiǎn)性。
菌落總數(shù)是指載37 ℃的普通瓊脂培養(yǎng)基上，1 g或1 mL樣品在培養(yǎng)24 h后所生長的菌落總數(shù)，是評(píng)定生活飲用水和食品污染程度的一個(gè)指標(biāo)。
1.2 食品中致病菌的檢測(cè)
在國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中，明確規(guī)定了食品中某些微生物的含量，除要檢測(cè)上述反映食品污染程度的指示菌外，還應(yīng)檢測(cè)其中的致病性球菌、腸道致病菌和其他致病菌[2]，主要包括志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、沙門氏菌、空腸彎曲菌等。
2 食品微生物檢測(cè)技術(shù)
隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，涌現(xiàn)出準(zhǔn)確性高、可靠性好、特異性強(qiáng)和快速的食品微生物檢測(cè)技術(shù)。檢測(cè)技術(shù)也從傳統(tǒng)的培養(yǎng)水平轉(zhuǎn)向現(xiàn)代的分子水平，并逐漸向自動(dòng)化、儀器化、標(biāo)準(zhǔn)化的方向發(fā)展，實(shí)現(xiàn)了食品微生物檢測(cè)技術(shù)的準(zhǔn)確性、高效性和可靠性[3]。其檢測(cè)技術(shù)主要包括分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)方法和儀器分析法。
分子生物學(xué)技術(shù)主要包括核酸探針和酶聚合技術(shù)。前者的基本原理是將已知的采用同位素或其他方式標(biāo)記的核苷酸序列DN段，加入到已經(jīng)變性的需要檢測(cè)的DNA樣品中，使其在一定條件下可形成雜交雙鏈，達(dá)到判定樣品DNA的目的。其最大優(yōu)點(diǎn)在于敏感度高，特異性強(qiáng)。后者是一種在機(jī)體外擴(kuò)增DN段的新技術(shù)，又可稱為體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。岑定聚合酶產(chǎn)物的方法很多，常見的有比色測(cè)定法、凝膠電溶法和化學(xué)發(fā)光測(cè)定法，靈敏、準(zhǔn)確和快速是其優(yōu)點(diǎn)。
免疫學(xué)方法在食品微生物檢驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。乳膠凝集技術(shù)的特異度和敏感度均較高，是根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，利用人工大分子乳膠顆粒發(fā)生的肉眼可見的凝集反應(yīng)而檢測(cè)的。酶聯(lián)免疫吸附法可定性定量檢測(cè)特異性抗原抗體，用抗體包被的聚苯乙烯孔捕捉抗原，用另一個(gè)結(jié)合了酶的抗體[3]與抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，左后用比色法記錄結(jié)果或生成酶底物觀察。
隨著食品微生物檢測(cè)技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，產(chǎn)生了半自動(dòng)或自動(dòng)微生物檢測(cè)儀，以半自動(dòng)生化分析儀居多。常見的儀器分析法主要包括流式細(xì)胞技術(shù)（FCM）、免疫磁性分離技術(shù)、VIDAS全自動(dòng)免疫分析儀、VITEK-AMS系統(tǒng)、電阻電導(dǎo)檢測(cè)器和ATP生物發(fā)光法等[4]。其中FCM逐漸用于細(xì)菌、病毒的鑒定、檢測(cè)盒計(jì)數(shù)等；與以常規(guī)方法比較，免疫磁性分離技術(shù)以快速為最大優(yōu)點(diǎn)；VIDAS全自動(dòng)免疫分析儀和VITEK-AMS系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)過程的的自動(dòng)化，且快速、精確度高；電阻電導(dǎo)檢測(cè)器能推算出樣品中的原菌數(shù)；ATP生物發(fā)光法是檢測(cè)食品中微生物的最方便可靠的技術(shù)和方法。
3 質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是準(zhǔn)確檢測(cè)食品中微生物的保證，從而達(dá)到提高食品衛(wèi)生質(zhì)量，保障消費(fèi)者飲食安全的目的。
3.1 檢測(cè)人員素質(zhì)
食品微生物檢測(cè)人員必須培訓(xùn)合格后持證上崗，具有相應(yīng)微生物資質(zhì)并熟練掌握操作技能，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，具有較豐富的專業(yè)知識(shí)，認(rèn)真負(fù)責(zé)，堅(jiān)持準(zhǔn)則，不斷提高檢驗(yàn)技能。
3.2 設(shè)施設(shè)備的配置和正確使用
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配備適用的微生物檢驗(yàn)設(shè)施設(shè)備，包括基本的檢測(cè)設(shè)施輔助設(shè)施，另外要注意在特殊環(huán)境下放置操作特殊設(shè)備。在第一次安裝水浴鍋、培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、熱滅菌箱等設(shè)備時(shí)，要進(jìn)行溫度一致性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)；以后使用過程中，要作好記錄和清潔消毒工作。培養(yǎng)基采用高壓濕熱滅菌，部分煮沸滅菌，對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基采用濾膜過濾法。
3.3 采集有代表性的標(biāo)本
在采集標(biāo)本的過程中，必須保證無菌并以無菌操作采樣。要選擇具有耐消毒滅菌性能的采集工具和容器，在使用之前要認(rèn)真清洗，之后采用常規(guī)方法使其內(nèi)部干燥，還要消除其內(nèi)的細(xì)菌。其次，在采集完成后，樣品需放置在合適的容器內(nèi)密封，然后將不同樣品貼上相應(yīng)的標(biāo)簽，填寫名稱、編號(hào)、時(shí)間、地點(diǎn)、數(shù)量、采樣人等，并做好資料記錄，冷藏處理并在最短時(shí)間內(nèi)送檢；另外，采集樣品數(shù)量必須為檢驗(yàn)所需量的3倍或更多，以滿足檢驗(yàn)、復(fù)檢和存檔備查的需要。送檢樣品必須注明數(shù)量、質(zhì)量、采樣條件、采樣時(shí)間和送檢時(shí)間，收到后必須簽字，注明接到時(shí)間，并立即化驗(yàn)。
3.4 樣品的運(yùn)輸和儲(chǔ)存
在運(yùn)輸和儲(chǔ)存樣品時(shí)，要避免陽光照射和外來物的污染。采集的樣品應(yīng)盡可能在接近原有溫度的條件下送往實(shí)驗(yàn)室，防止樣品中固有微生物的生長變化。如不能及時(shí)運(yùn)送，要接近原有儲(chǔ)存溫度。運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保證樣品的完整性[4]，一般不應(yīng)超過3 h。
參考文獻(xiàn)
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【關(guān)鍵詞】 電化學(xué)
【關(guān)鍵詞】 甲狀腺過氧化物酶抗體；自身免疫性甲狀腺疾病；電化學(xué)發(fā)光免疫分析
為了探討甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）在甲狀腺疾病中的臨床價(jià)值，我們用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ECLIA）檢測(cè)了不同甲狀腺疾病患者的血清 TPOAb 水平，旨在為臨床提供診斷依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 對(duì)象
1.1.1 甲狀腺功能亢進(jìn)（甲亢）組：90 例（男 12例，女 78例），年齡12~65歲，平均年齡38.5歲。結(jié)合臨床表現(xiàn)，游離三碘甲腺原氨酸（FT3）、游離甲狀腺素（FT4）顯著升高，高靈敏促甲狀腺素（ hTSH）顯著降低。
1.1.2 甲狀腺功能減退（甲減）組：46 例（男 7例，女 39例），年齡19~58歲，平均年齡 35.2 歲。其中，橋本甲狀腺炎 42 例，特發(fā)性粘液性水腫 4 例。結(jié)合臨床表現(xiàn)，F(xiàn)T3、FT4 顯著降低，hTSH 顯著升高。
1.1.3 單純甲狀腺腫大（甲腫）組：45 例（男 9例，女 36例），年齡14~63歲，平均年齡 29.2歲。無甲狀腺功能異常表現(xiàn)，F(xiàn)T3、FT4、hTSH 均正常。
1.1.4 正常對(duì)照組：35 例（男6例，女 29例），年齡19~53歲，平均年齡32.2歲。為我院體檢中心健康體檢合格者。
1.2 方法
1.2.1 標(biāo)本采集：所有受檢者均清晨空腹靜脈采血3 ml，于 2 h內(nèi)分離血清并上機(jī)測(cè)定完畢。
1.2.2 檢測(cè)方法：采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ECLIA）。儀器為美國羅氏 Elecsys 2010 全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑為原裝配套進(jìn)口試劑，所有操作由儀器自動(dòng)完成，結(jié)果由實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)自動(dòng)打印。
1.2.3 統(tǒng)計(jì)方法：全部數(shù)據(jù)采用x±s表示，組間比較用 t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
甲亢組和甲減組血清 TPOAb 水平明顯高于甲腫組和正常對(duì)照組，有顯著性差異（P＜0.01）；甲腫組和正常對(duì)照組血清 TPOAb 水平無顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)果見表 1。
表1 各組血清甲狀腺激素、TPOAb水平（略)
3 討論
自身免疫性甲狀腺疾病（AITD）是由 T 細(xì)胞所介導(dǎo)的器官特異自身免疫性疾病，患者血清中存在多種針對(duì)甲狀腺抗原的自身抗體，TPOAb 是其中重要的一種，普遍存在于自身免疫性甲狀腺疾病中［1，2］。近年來研究證實(shí)，甲狀腺過氧化物酶（thyroid peroxidase，TPO）是甲狀腺微粒體（TM）的主要抗原成分，存在于患者體內(nèi)的甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）就是甲狀腺微粒體抗體（TMAb），TPOAb與AITD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。一般認(rèn)為，對(duì)于 AITD 的診斷，測(cè)定血清TPOAb比測(cè)定 TMAb 更可靠［1，3］。本文研究結(jié)果表明，甲亢組和甲減組血清 TPOAb 水平明顯高于甲腫組和正常對(duì)照組，有顯著性差異（P＜0.01），也證實(shí)了上述觀點(diǎn)，提示 TPOAb 在AITD 發(fā)病中的重要作用。
TPOAb 還是 AITD 患者體內(nèi)一種重要的免疫學(xué)指標(biāo)，而且對(duì)甲狀腺疾病的診斷有較好的特異性。對(duì)原發(fā)性甲減患者，結(jié)合 hTSH 升高，可以發(fā)現(xiàn)早期甲減病人。對(duì)可疑甲減患者，若 TPOAb 升高，有助于原發(fā)和繼發(fā)甲減的鑒別。HT 患者，TPOAb 終身存在，如臨床表現(xiàn)典型且 TPOAb 持續(xù)高水平，可作為診斷依據(jù)確診［4］。TPOAb 可作為 Graves 病、橋本甲亢等診斷和鑒別診斷的首選指標(biāo)［5］。總之，應(yīng)用 ECLIA 法檢測(cè)血清中 TPOAb 水平，靈敏度高，重復(fù)性好，自動(dòng)化程度高，具有良好的穩(wěn)定性，試劑時(shí)效長，檢測(cè)效率高，能及時(shí)為臨床上診斷、治療甲狀腺疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，值得推廣。
參 考 文 獻(xiàn)
1.邵新華，劉樹業(yè)，張衛(wèi)民，等.甲狀腺過氧化物酶抗體檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用［J］.中華核醫(yī)學(xué)雜志，2003，23（2）：90
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3.蒲丹，本章.過氧化物酶抗體診斷自身免疫性甲狀腺疾病臨床價(jià)值的探討［J］.西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，21（5）：433
【摘要】臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)畢業(yè)生的實(shí)習(xí)帶教工作是給社會(huì)提供高質(zhì)量醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，而臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)的實(shí)習(xí)是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)習(xí)的重要組成部分。根據(jù)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)的學(xué)科特點(diǎn)和筆者多年的帶教經(jīng)驗(yàn)，就如何培養(yǎng)畢血生職業(yè)思想道德品質(zhì)、綜合動(dòng)手能力、理論與實(shí)踐有機(jī)結(jié)合的能力等綜合素質(zhì)進(jìn)行了探討，以期為今后的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的實(shí)習(xí)教學(xué)提供借鑒。
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)屬于實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)，是在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)人體材料進(jìn)行檢測(cè)分析的科學(xué)。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是一個(gè)動(dòng)手能力極強(qiáng)的專業(yè)，其實(shí)習(xí)階段在整個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)中起著舉足輕重的作用。而臨床免疫學(xué)與免疫學(xué)檢驗(yàn)是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的一門重要專業(yè)。臨床免疫學(xué)是將免疫學(xué)基礎(chǔ)理論與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合，用于研究臨床疾病的免疫病理機(jī)制、診斷與鑒別診斷、評(píng)價(jià)治療效果和判斷預(yù)后的多個(gè)分支學(xué)科的總科。實(shí)習(xí)是學(xué)校教學(xué)的延伸，是學(xué)生將學(xué)校所學(xué)的理論知識(shí)與實(shí)踐相結(jié)合的過程。通過實(shí)習(xí)，學(xué)校里所學(xué)到的理論知識(shí)會(huì)得以鞏固，學(xué)生的操作技能會(huì)進(jìn)一步提髙。實(shí)習(xí)也是學(xué)生今后從事臨床科研工作的一個(gè)過渡階段。近十年來，隨著自動(dòng)化儀器設(shè)備的引進(jìn)，先進(jìn)的儀器設(shè)備已成為檢驗(yàn)人員必不可少的工具，它提高了工作效率和工作質(zhì)量，但并不是有了先進(jìn)的設(shè)備，檢驗(yàn)結(jié)果就肯定能準(zhǔn)確，影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素很多，其中檢驗(yàn)人員的素質(zhì)是至關(guān)重要的因素之一。因此，如何向社會(huì)提供高素質(zhì)的人才成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)教育的重中之重。本科室是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生的重要實(shí)習(xí)基地，十多年來，我們?cè)谂R床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)習(xí)帶教中不斷探索創(chuàng)新和實(shí)踐，并有了自己的一些體會(huì)。
1.進(jìn)行必要的崗前培訓(xùn)
醫(yī)學(xué)實(shí)習(xí)生作為具有廣泛科學(xué)知識(shí)和良好實(shí)驗(yàn)技術(shù)的未來醫(yī)務(wù)人員，其職業(yè)道德水平事關(guān)國家醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)興衰，作為教學(xué)醫(yī)院，培養(yǎng)出來的學(xué)生不單是技術(shù)上要過硬，思想上、作風(fēng)上更要過硬。因此，一定要加強(qiáng)職業(yè)道德教育，強(qiáng)調(diào)組織紀(jì)律，明確規(guī)章制度，著重培養(yǎng)實(shí)習(xí)學(xué)生不計(jì)名利、熱愛本專業(yè)的思想，同時(shí)，還應(yīng)向?qū)W生講明醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)習(xí)的重要性，讓學(xué)生在工作中時(shí)刻嚴(yán)格遵守操作規(guī)程、做到一絲不茍，培養(yǎng)其嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)。每批到科室實(shí)習(xí)的學(xué)生在進(jìn)人臨床免疫專業(yè)組之前，首先閱讀本實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（standardoperationpro-ceed，SOP）。從標(biāo)本的接收，編號(hào)，平衡，離心分離血清到最后實(shí)驗(yàn)操作，審核報(bào)告，熟悉每一步操作規(guī)程。同時(shí)要求學(xué)生認(rèn)真閱讀每臺(tái)儀器的操作說明書和實(shí)驗(yàn)室管理制度，遵守各項(xiàng)規(guī)章制度，防止沒事到處串崗的情況出現(xiàn)。
2.注重生物安全意識(shí)和防護(hù)技能的培養(yǎng)
我國在經(jīng)歷SARS后將醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全問題提到前所未有的高度，近年來相繼發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室感染事件，也給醫(yī)院各類實(shí)驗(yàn)室敲響了警鐘。同時(shí)，學(xué)生在校期間由于生物安全方面無專門課程培訓(xùn)，掌握不牢固，實(shí)際運(yùn)用不夠，對(duì)實(shí)驗(yàn)室感染和生物安全并未引起足夠重視，必須積極進(jìn)行生物安全防護(hù)知識(shí)和技能教育。
安排學(xué)生系統(tǒng)學(xué)習(xí)生物安全知識(shí)，學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室生物安全的操作規(guī)程和管理制度，學(xué)習(xí)《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》、《實(shí)驗(yàn)生物安全通用要求》等法律法規(guī)，提高生物安全的防范意識(shí)。并要告訴學(xué)生自己已成為實(shí)驗(yàn)室的一份子，關(guān)系到整個(gè)實(shí)驗(yàn)室甚至整個(gè)醫(yī)院的生物安全，必須以管理者的姿態(tài)嚴(yán)格要求自己。比如實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格區(qū)分污染區(qū)和非污染區(qū)，嚴(yán)禁在污染區(qū)進(jìn)食，嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室消毒滅菌與廢棄物處理制度。在實(shí)驗(yàn)室操作過程中，提高安全意識(shí)，規(guī)范操作規(guī)程，減少各種生物安全事件的發(fā)生。學(xué)會(huì)基本的安全防護(hù)技能，比如日常工作必須掌握的正確洗手方法，口罩、帽子和防護(hù)服等個(gè)人防護(hù)裝備的使用；廢棄的一次性手套不能到處亂放；意外傷害時(shí)的正確洗眼、淋浴，皮膚傷口的正確處理等，都要求學(xué)生能熟練掌握。
3.重視免疫學(xué)檢驗(yàn)基本技能的培養(yǎng)
基本技能的培養(yǎng)是引導(dǎo)實(shí)習(xí)生步人成熟的基礎(chǔ)。學(xué)生在學(xué)校主要是接受基礎(chǔ)理論知識(shí)教育，實(shí)驗(yàn)課程相對(duì)較少，學(xué)生動(dòng)手能力相對(duì)薄弱。因此重視基礎(chǔ)知識(shí)的同時(shí)還應(yīng)強(qiáng)化基本技能訓(xùn)練，做到理論與實(shí)際融洽地結(jié)合起來，以提高學(xué)生對(duì)操作技能的興趣，增強(qiáng)動(dòng)手能力。帶教老師要耐心示范各種檢驗(yàn)儀器的正確使用方法，及時(shí)糾正學(xué)生的不正確姿勢(shì)，同時(shí)強(qiáng)調(diào)各種操作誤差和人為誤差引起的檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，并要求每個(gè)學(xué)生都要自己動(dòng)手。有時(shí)，帶教老師不事先把檢測(cè)標(biāo)本的結(jié)果告訴同學(xué)，而是檢查同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并作比較，然后總結(jié)這次實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)和操作技巧。希望能通過實(shí)習(xí)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的學(xué)生能夠做到拿到一份免疫檢測(cè)項(xiàng)目的說明書，就能把實(shí)驗(yàn)做完、做好，并了解其中的臨床意義。同時(shí)，運(yùn)用以問題為基礎(chǔ)啟發(fā)學(xué)生思考問題，以提髙他們解決臨床實(shí)際問題的能力。當(dāng)儀器檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常值的時(shí)候，要啟發(fā)學(xué)生思考為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的結(jié)果，是所患疾病本身還是標(biāo)本采集不當(dāng)所致，還是檢測(cè)過程中出現(xiàn)了什么問題，應(yīng)該如何解決。而不是盲目相信自動(dòng)化儀器，簡(jiǎn)單地發(fā)個(gè)報(bào)告了事。現(xiàn)在，全國各大醫(yī)院檢驗(yàn)科均已從以前的手工操作步人自動(dòng)化儀器檢測(cè)階段。
自動(dòng)化儀器在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用，既豐富了檢測(cè)方法，也大大提高了檢驗(yàn)效率。應(yīng)充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性，使學(xué)生認(rèn)識(shí)到自動(dòng)化儀器在臨床檢驗(yàn)中的作用。根據(jù)免疫室的工作性質(zhì)特點(diǎn)，充分利用下午時(shí)間，對(duì)每臺(tái)儀器從原理、操作到參數(shù)的設(shè)置，儀器的曰常保養(yǎng)、定標(biāo)、質(zhì)控情況作細(xì)致的講解。讓他們親自動(dòng)手，熟練掌握儀器操作。因免疫學(xué)檢驗(yàn)是一門實(shí)踐性較強(qiáng)的專業(yè)，就要求著重培養(yǎng)實(shí)習(xí)生的動(dòng)手能力。免疫學(xué)的實(shí)習(xí)主要是技能操作和概念性知識(shí)的掌握。我們把技能操作大致分為兩種：一是一般性操作，這種操作技術(shù)性要求不高，只要按要求操作及一定經(jīng)驗(yàn)就能得到正確結(jié)果，如酶標(biāo)儀的使用、普通的TRUST試驗(yàn)等；另一種是新技術(shù)、新項(xiàng)目的操作，因現(xiàn)代免疫學(xué)的飛速發(fā)展，誕生了各種新的免疫學(xué)方法，針對(duì)這一現(xiàn)象我科引進(jìn)了一批新儀器，如電化學(xué)發(fā)光、生物微矩陣檢測(cè)系統(tǒng)等。這些操作需在老師的帶領(lǐng)下操作，要求實(shí)習(xí)生多看、多問、多總結(jié)，逐步上機(jī)。在實(shí)習(xí)生“動(dòng)手”的同時(shí)引導(dǎo)學(xué)生學(xué)會(huì)理論與實(shí)踐相結(jié)合。例如我們?cè)谶M(jìn)行乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)過程中，由于乙型肝炎病毒的抗原成分較為復(fù)雜，首先讓學(xué)生講述乙型肝炎病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，然后分析其抗原組分，帶教老師再講解乙型肝炎病毒感染后其主要抗原和抗體系統(tǒng)的特性及其“陽性”時(shí)的臨床意義，最后讓學(xué)生根據(jù)檢查報(bào)告分析討論臨床上乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)哪些模式，如什么是人們通常講的“大三陽”和“小三陽”，其代表的臨床意義如何？對(duì)于表面抗原在什么情況下出現(xiàn)抗原抗體的同時(shí)陽性？乙型肝炎病毒的熒光定量PCR測(cè)定的臨床意義是什么？以提問的方式幫助實(shí)習(xí)生回顧所學(xué)的理論基礎(chǔ)知識(shí)，縮短理論到實(shí)踐的距離，培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維能力，再通過實(shí)際的實(shí)驗(yàn)操作很快把所學(xué)的理論與實(shí)踐融會(huì)貫通。此外應(yīng)注意培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維及創(chuàng)造能力。啟發(fā)學(xué)生積極思維，例如在用ELISA方法測(cè)定HBsAg時(shí)，帶教老師提出以下問題：HBsAg測(cè)定的原理；HBsAg檢測(cè)為何不采用一步法；什么是鈞狀效應(yīng)(HOOK)；如何解決高濃度HBsAg檢測(cè)的假陰性問題，等等。挖掘?qū)W生潛藏的求知欲，發(fā)展學(xué)生的想象力，培養(yǎng)更多有創(chuàng)新意識(shí)的學(xué)生。而“為創(chuàng)造性而教”已經(jīng)成為當(dāng)前教育界的一句盛行的口號(hào)，創(chuàng)造性的培養(yǎng)應(yīng)該成為高等學(xué)校教學(xué)的主要目標(biāo)之一。
因此，重點(diǎn)應(yīng)把握好三個(gè)方面：一是老師帶教，實(shí)習(xí)開始由專職老師帶領(lǐng)，邊操作邊講解，使學(xué)生學(xué)會(huì)從操作中了解技術(shù)知識(shí)及方法，在腦海中留下烙印；二是放手不放眼，多讓學(xué)生練習(xí)技術(shù)操作能力。學(xué)生親自動(dòng)手操作，老師雖然放手，但是不放眼，指導(dǎo)技術(shù)操作，發(fā)現(xiàn)不當(dāng)之處，馬上指出，即鍛煉了具體操作能力，又掌握了技術(shù)知識(shí)；三是培養(yǎng)結(jié)果分析能力，操作結(jié)束后，對(duì)于結(jié)果的判斷，老師要認(rèn)真幫助學(xué)生分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，陽性結(jié)果可能與什么原因有關(guān)，陰性結(jié)果有何原因，或者不排除相關(guān)疾病，既鍛煉了操作技能，又培養(yǎng)了思考分析能力。
4.重視建立與培養(yǎng)學(xué)生的“全面質(zhì)置控制”觀
質(zhì)量控制是質(zhì)量管理的一部分，致力于滿足質(zhì)量要求所釆取的作業(yè)技術(shù)和活動(dòng)。檢驗(yàn)質(zhì)量的高低直接關(guān)系臨床診斷與治療，關(guān)系到患者生命健康。為保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，必須對(duì)實(shí)驗(yàn)全過程進(jìn)行控制。簡(jiǎn)單的說“全面質(zhì)量控制”是指：分析前、分析中、分析后的質(zhì)量控制。
4.1分析前質(zhì)量控制
包括患者的準(zhǔn)備標(biāo)本的采集、儲(chǔ)存及運(yùn)輸?shù)冗^程。對(duì)臨床免疫檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大影響的是樣本采集不當(dāng)及各種原因造成的溶血。如為了使學(xué)生看到溶血對(duì)于結(jié)果的影響，對(duì)溶血標(biāo)本，通知臨床重新留取標(biāo)本，兩個(gè)標(biāo)本對(duì)照做（平時(shí)我們會(huì)舍棄溶血標(biāo)本），溶血標(biāo)本對(duì)ELISA的結(jié)果造成假陽性，通過結(jié)果差異的對(duì)比，加深對(duì)分析前質(zhì)量控制的了解。
4.2分析中的質(zhì)量控制
即實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的質(zhì)量控制。質(zhì)量控制項(xiàng)目包括試劑、診斷血清、儀器等。每天的操作都應(yīng)帶有質(zhì)控，并做好記錄繪制質(zhì)控圖，以確保試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。對(duì)失控的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)分析和找出原因，并重做以糾正實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤。操作中注意嚴(yán)防污染，每個(gè)標(biāo)本用一個(gè)吸頭，不能交叉反復(fù)使用。每天作好儀器設(shè)備的使用登記等。但并不是室內(nèi)質(zhì)控合格任何檢測(cè)報(bào)告都可以發(fā)出。為此我們?cè)趲Ы讨袝r(shí)刻提醒學(xué)生執(zhí)行“三查三對(duì)”制度和“差錯(cuò)記錄”制度。對(duì)于任何異常報(bào)告都不能輕易發(fā)出，必要時(shí)與臨床聯(lián)系，做好臨床的“偵察兵”。
4.3分析后的質(zhì)量控制
包括結(jié)果計(jì)算、發(fā)出等過程。在這—過程中主要建立“結(jié)果反饋”制度。對(duì)過高或過低的檢測(cè)結(jié)果，要求學(xué)生再一次核對(duì)及復(fù)查，確認(rèn)無誤后再發(fā)出報(bào)告，同時(shí)與臨床聯(lián)系看結(jié)果是否與臨床相符，如不符重留標(biāo)本復(fù)査^通過這一過程，使學(xué)生直接感受到我們的工作在患者治療過程中的作用。
5.注重科研能力的培養(yǎng)
我們醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)本科生的培養(yǎng)應(yīng)該是具有綜合素質(zhì)的髙級(jí)人才，其中包括他們的科研能力。因他們初次接觸科研，對(duì)科研方法、基本過程不了解，科研效率低。表現(xiàn)為文獻(xiàn)査找和獲取的速度慢，技巧不足；立題較表淺，進(jìn)行回顧性分析的較多；寫作水平不高；寫作速度慢％。而實(shí)習(xí)這一年是他們鍛煉科研能力的最佳時(shí)機(jī)。首先選擇年資較髙的具有多年科研工作經(jīng)驗(yàn)的老師作為他們的畢業(yè)論文指導(dǎo)教師，讓他們從文獻(xiàn)的檢索、科研設(shè)計(jì)、科學(xué)實(shí)驗(yàn)、課題總結(jié)到論文撰寫等諸多環(huán)節(jié)上都能得到正規(guī)的訓(xùn)練，使他們初步掌握科學(xué)研究的基本方法，為將來他們自己開展科研工作打下良好的基礎(chǔ)^而且畢業(yè)論文實(shí)施可全面考核學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的掌握和適用能力，為學(xué)生今后走向工作崗位起到一個(gè)良好的指導(dǎo)作用。
6.提高臨床免疫學(xué)專業(yè)外語能力，把握學(xué)科進(jìn)展
分子免疫學(xué)的快速發(fā)展推動(dòng)了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)技術(shù)的突飛猛進(jìn)，對(duì)于臨床醫(yī)學(xué)工作者一方面要攝取大量的國外信息需要扎實(shí)的專業(yè)外語基礎(chǔ)，另一方面在實(shí)際工作過程中大量進(jìn)口診斷試劑的應(yīng)用也需要對(duì)專業(yè)外語應(yīng)用自如。大部分實(shí)習(xí)學(xué)生具有一定的公共外語基礎(chǔ)，但對(duì)專業(yè)單詞常常感到陌生，專業(yè)外語學(xué)習(xí)不可能在很短時(shí)間內(nèi)一蹴而就，實(shí)習(xí)期間由于時(shí)間緊，需要實(shí)習(xí)的亞專業(yè)又非常多，總結(jié)我們的經(jīng)驗(yàn)，把專業(yè)外語實(shí)習(xí)教學(xué)貫穿在整個(gè)實(shí)習(xí)過程中，第一，從臨床免疫學(xué)大量的簡(jiǎn)寫入手，讓學(xué)生牢記簡(jiǎn)寫的英文全稱，如Ab的全稱為antibody、ELISA的全稱為enzyme linked immunosorbent assay、Ig的全稱為immunoglobulin、HBsAg的全稱為hepatitis B Surface an-tigen、外-斐試驗(yàn)的全稱為Weil-Felix、McAb的全稱為mono-clonal antibody、HCV的全稱為hepatitis C Virus、AFP的全稱為alpha-fetoprotein等等，在潛移默化中掌握大部分常用免疫學(xué)簡(jiǎn)寫；第二，在ELISA應(yīng)用過程中，找一份標(biāo)準(zhǔn)的全英文使用說明書，先讓實(shí)習(xí)學(xué)生初步翻譯，講出其主要內(nèi)容，對(duì)于一些相對(duì)專業(yè)一點(diǎn)的單詞，查閱專業(yè)詞典，分段講解其操作原理、步驟、注意事項(xiàng)等，舉一反三讓學(xué)生牢記其內(nèi)容，實(shí)際上此類實(shí)驗(yàn)的操作說明大同小異，學(xué)生就可以觸類旁通。通過上述努力，不但提高了學(xué)生的興趣，而且初步奠定其專業(yè)外語能力，為實(shí)習(xí)生走向工作崗位后很快適應(yīng)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)工作需要打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
7.重視服務(wù)意識(shí)培養(yǎng)
在新的醫(yī)療形勢(shì)下，檢驗(yàn)人員要更新服務(wù)理念，特別是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)模式已由傳統(tǒng)的生物醫(yī)學(xué)模式向現(xiàn)代的生物一一心理——社會(huì)醫(yī)學(xué)模式轉(zhuǎn)變，患者的需求是與之相適應(yīng)的服務(wù)。檢驗(yàn)人員應(yīng)時(shí)刻樹立“以人為本，以患者為中心，全心全意為人民健康事業(yè)服務(wù)”的宗旨，應(yīng)努力做到把患者的利益作為第一考慮，把患者的滿意作為第一標(biāo)準(zhǔn)，用新的服務(wù)理念帶給患者全新的感受。總之，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，離開實(shí)踐，猶如紙上談兵。臨床實(shí)習(xí)是學(xué)生走向工作崗位前的關(guān)鍵教學(xué)環(huán)節(jié)，是專業(yè)理論與臨床工作的銜接階段，為適應(yīng)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)現(xiàn)代化發(fā)展的需要，作為臨床帶教老師必須不斷探索與改革臨床帶教方法，為迎接新世紀(jì)的挑戰(zhàn)，而努力培養(yǎng)高素質(zhì)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才。
Abstract： This paper introduced the principles, developing and the using of many molecular biotechnology, such as enzyme linked immuno-sorbent assay, genechip technique, molecular imprinting technique, polymerase chain reaction, scrip quick testing technology, flow injection immuno-analysis, Biosensors, etc, for the detection of the hazardous substances in the farm products．
關(guān)鍵詞： 農(nóng)產(chǎn)品；有毒有害物質(zhì)；分子生物學(xué)；檢測(cè)技術(shù)
Key words： farm products; hazardous substances; molecular biotechnology; testing technology
中圖分類號(hào)：S1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1006-4311（2011）04-0186-02
0前言
農(nóng)產(chǎn)品安全性要求農(nóng)產(chǎn)品中不應(yīng)含有可能損害或威脅人體的物質(zhì)或因素，它關(guān)系到人體健康和社會(huì)穩(wěn)定。隨著世界經(jīng)濟(jì)全球化、貿(mào)易自由化和農(nóng)產(chǎn)品國際貿(mào)易的迅速發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品安全已成為事關(guān)人民健康和構(gòu)建和諧社會(huì)的重大戰(zhàn)略問題，及時(shí)、安全、準(zhǔn)確地檢測(cè)出農(nóng)產(chǎn)品中的病原微生物是農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)的重要內(nèi)容。隨著農(nóng)產(chǎn)品分析物質(zhì)的不斷微量和痕量化，農(nóng)產(chǎn)品基質(zhì)的不斷復(fù)雜，僅使用傳統(tǒng)分析技術(shù)已難以解決所有的問題。分子生物學(xué)技術(shù)不僅可以簡(jiǎn)化前處理過程、而且操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)成本低、安全可靠，且能進(jìn)行特異性處理分析，其在農(nóng)產(chǎn)品分析中占據(jù)越來越高的比例[1]，目前在農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中常用的技術(shù)包括：酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELISA）、基因芯片技術(shù)、分子印跡技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)、試紙條快速檢測(cè)技術(shù)、流動(dòng)注射免疫分析技術(shù)、生物傳感器技術(shù)（biosensor）、等。分子生物學(xué)技術(shù)解決了傳統(tǒng)農(nóng)產(chǎn)品前處理所不能解決的問題，特別是在農(nóng)產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)檢測(cè)中發(fā)揮了重要的作用。
1應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)中的分子生物學(xué)技術(shù)
1.1 酶聯(lián)免疫分析技術(shù)[2-3]酶聯(lián)免疫分析技術(shù)是20世紀(jì)70年代初期由荷蘭學(xué)者Weeman與Schurrs和瑞典學(xué)者Engvall與Perlman幾乎同時(shí)提出的。最初ELISA主要用于病毒和細(xì)菌的檢測(cè)，20世紀(jì)70年代后期開始廣泛應(yīng)用于抗原、抗體的測(cè)定，范圍涉及到一些藥物、激素、毒素等半抗原分子的定性定量檢測(cè)。它是在RIA理論的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)。它利用酶標(biāo)記物同抗原抗體復(fù)合物的免疫反應(yīng)與酶的催化放大作用相結(jié)合，既保持了酶催化反應(yīng)的敏感性，又保持了抗原抗體反應(yīng)的特異性，極大的提高了靈敏度，且克服了RIA操作過程中放射性同位素對(duì)人體的傷害。酶聯(lián)免疫分析法在農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)中最為常用。農(nóng)獸藥殘留免疫分析方法的建立包括待測(cè)物選擇、半抗原合成、人工抗原合成、抗體制備、測(cè)定方法建立、樣本前處理方法和方法評(píng)價(jià)等步驟。ELISA具有樣品前處理簡(jiǎn)單，純化步驟少，大量樣本分析時(shí)間短，適合于做成試劑盒現(xiàn)場(chǎng)篩選等優(yōu)點(diǎn)，使其可試驗(yàn)快速現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)，是現(xiàn)階段農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用較多的一項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)。目前酶聯(lián)免疫檢測(cè)的農(nóng)、獸藥殘留種類主要包括：有機(jī)磷農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥、有機(jī)氯類農(nóng)藥、氨基甲酸酯類、獸藥類等。
1.2 基因芯片技術(shù)[4-5]基因芯片技術(shù)是采用原位合成或顯微打印手段，將數(shù)以萬計(jì)的核酸探針固化于支持物表面，與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過檢測(cè)雜交信號(hào)來實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的快速檢測(cè)。基因芯片技術(shù)是基于芯片上的探針與樣品中的靶基因片段之間發(fā)生的特異性核酸雜交。基因芯片的基本原理與核酸雜交相似，但它將大量按檢測(cè)要求設(shè)計(jì)好的探針固化，僅通過一次雜交便可檢測(cè)出多種靶基因的相關(guān)信息，具有高通量、多參數(shù)同步分析，快速全自動(dòng)分析，高精確度、高精密度和高靈敏度分析的特點(diǎn)，是目前鑒別有害微生物的最有效的手段之一。近年來，許多學(xué)者利用基因芯片對(duì)常見致病菌進(jìn)行了分析檢測(cè)。
1.3 分子印跡檢測(cè)技術(shù)[6-7]分子印跡技術(shù)利用化學(xué)手段合成一種高分子聚合物―分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer, MIP)，MIP能夠特異性吸附作為印跡分子的待測(cè)物，在免疫分析中可以取代生物抗體，被科學(xué)家譽(yù)為“人工抗體”。它具有一定的預(yù)定性，識(shí)別性和實(shí)用性等特點(diǎn)，在農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)中的潛力已引起了人們的關(guān)注。由于農(nóng)獸藥在農(nóng)產(chǎn)品基質(zhì)中的痕量殘留性以及基質(zhì)的復(fù)雜性，需要對(duì)待側(cè)的農(nóng)獸藥物質(zhì)進(jìn)行分離，凈化和富集。MIPs的固相萃取(MISPE)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于藥物、生物、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境樣品分析，作為監(jiān)測(cè)藥物、生物大分子、煙堿 、除草劑 、農(nóng)藥等的預(yù)富集處理。根據(jù)直接競(jìng)爭(zhēng)免疫分析方法，采用熒光標(biāo)記示蹤物，靈敏度雖不及生物抗體免疫分析得到的結(jié)果，但分析時(shí)間縮短而且該放生抗體具有上百次的可再生使用次數(shù)。使用MIPs作為生物傳感器的識(shí)別元件是另一具有發(fā)展前景的應(yīng)用。較之抗體、受體或酶，MIPs制成的傳感膜有明顯的優(yōu)越性，如適用范圍廣、能夠長期穩(wěn)定、耐高溫和耐腐蝕。
1.4 PCR技術(shù)[8-11]聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)誕生于1985年，由美國Cetus公司和加州大學(xué)聯(lián)合創(chuàng)建。PCR技術(shù)利用變性與復(fù)性原理，在體外使用DNA聚合酶，在引物的引導(dǎo)和脫氧核糖核苷酸（dNTP）的參與下將模板在數(shù)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行百萬倍擴(kuò)增。該技術(shù)可選擇性地放大特定的DNA序列，因此在農(nóng)產(chǎn)品致病性微生物檢測(cè)方面發(fā)揮著越來越重要的作用。實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)是近年發(fā)展起來的新型技術(shù)，該技術(shù)通過直接測(cè)定PCR過程中熒光信號(hào)的變化，利用電腦分析軟件對(duì)PCR過程中產(chǎn)生的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和自動(dòng)定量，從而成功地實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍。而且，使用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)不需要進(jìn)行凝膠電泳，避免了交叉污染，使反應(yīng)具有更強(qiáng)的特異性和更高的自動(dòng)化程度。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，多重PCR、標(biāo)記PCR和不對(duì)稱PCR等多種不同的PCR方法都被應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中，它們的應(yīng)用使PCR技術(shù)擁有了更高的靈敏度和更短的周期。
1.5 試紙條快速檢測(cè)技術(shù)（即膜載體免疫分析快速檢測(cè)技術(shù)）[12-13]
試紙條與試劑盒相比較具有更加易于攜帶、檢測(cè)更加迅速等優(yōu)勢(shì)。在實(shí)際檢測(cè)過程中，特別是現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，并不一定需要對(duì)每個(gè)樣品都獲得定量數(shù)據(jù)而只需要定性地判別出某個(gè)樣品是否含有某種農(nóng)獸藥，含量是否超過規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)既可。因此只需要幾分鐘或十幾分鐘就可以獲得結(jié)果的快速檢測(cè)試紙條是最為合適的檢測(cè)工具。試紙條技術(shù)與試劑盒相類似，其特點(diǎn)是以微孔膜作為固相載體。標(biāo)記物可用酶或各種有色微粒子，如彩色乳膠、膠體金、膠體硒等，以紅色的膠體金最為常用。固相膜的特點(diǎn)在于其類似濾紙的多孔性。液體可穿過固相膜流出，也可以通過毛細(xì)管層析作用在膜上向前移行。常用的固相載體膜為硝酸纖維素膜、尼龍膜等。試紙條技術(shù)主要包括酶標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)（immunoenzyme labeling technique）和膠體金標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)（immunogold labelling technique）。酶標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)是以酶為示蹤標(biāo)記物，而膠體金標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。酶標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)包括flow-through和dip-stick兩種形式，膠體金標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)包括flow-through和lateral-flow兩種形式。
1.6 流動(dòng)注射免疫分析技術(shù)[14]流動(dòng)注射免疫分析法是將速度快、自動(dòng)化程度高、重現(xiàn)性好的流動(dòng)注射分析與特異性強(qiáng)、靈敏度高的免疫分析集為一體。這種分析方法具有分析時(shí)間短、需要樣品量小和操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。利用FIIA對(duì)一些樣品分析，測(cè)定耗時(shí)不足1min。FIIA有：均相FIIA和非均相FIIA。流動(dòng)注射免疫分析主要包括：流動(dòng)注射脂質(zhì)體免疫分析技術(shù)、流動(dòng)注射熒光檢測(cè)、流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光檢測(cè)、流動(dòng)注射分光光度檢測(cè)和流動(dòng)注射電化學(xué)檢測(cè)。利用FIIA是一種靈敏性、專一性、準(zhǔn)確性好、快速、節(jié)約成本的方法，樣品也不需要預(yù)處理和富集。
1.7 其他分析技術(shù)[15-18]免疫親和（Immunoaffinity）是利用生物分子間專一的親和力而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。其原理是利用偶聯(lián)親和配基的親和吸附介質(zhì)為固定相親和吸附目標(biāo)產(chǎn)物，使目標(biāo)產(chǎn)物得到分離純化的液相層析法。親和層析已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物分子的分離和純化，如結(jié)合蛋白、酶、抑制劑、抗原、抗體、激素、激素受體、糖蛋白、核酸及多糖類等；也可以用于分離細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒等。
毛細(xì)管電泳免疫分析技術(shù)是將毛細(xì)管電泳技術(shù)(CE)與免疫分析技術(shù)(IA)相結(jié)合起來的一種新型的免疫分析技術(shù)。毛細(xì)管電泳免疫分析分為競(jìng)爭(zhēng)性毛細(xì)管電泳免疫分析和非競(jìng)爭(zhēng)性毛細(xì)管電泳免疫分析。與毛細(xì)管電泳免疫分析的檢測(cè)器主要有激光誘導(dǎo)熒光和紫外檢測(cè)器。其中激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器因具有較高的檢測(cè)靈敏度，通過對(duì)抗體或是抗原進(jìn)行熒光標(biāo)記而被廣泛使用。此外還有生物傳感器、熒光免疫分析技術(shù)、放射免疫分析技術(shù)、磁免疫分析技術(shù)、蛋白質(zhì)芯片、等。
2結(jié)語
隨著經(jīng)濟(jì)的全球化發(fā)展和農(nóng)產(chǎn)品的跨區(qū)域、跨國際流通，對(duì)農(nóng)產(chǎn)品病原菌的檢測(cè)要求也越來越高。從定性和定量兩方面出發(fā)，準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)方法是農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)的發(fā)展方向。盡管分子生物學(xué)檢測(cè)方法具有諸多優(yōu)點(diǎn)，但目前它們大多處于實(shí)驗(yàn)室階段，不能廣泛應(yīng)用于實(shí)踐，僅能作為標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法的參考。因此，在今后的工作中應(yīng)進(jìn)一步加快研究步伐，建立真正實(shí)用的農(nóng)產(chǎn)品快速檢測(cè)方法。
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