時(shí)間：2022-09-12 06:02:04
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇微生物實(shí)驗(yàn)室，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
關(guān)鍵詞：微生物培養(yǎng) 教學(xué)目標(biāo) 實(shí)施設(shè)計(jì)
微生物實(shí)驗(yàn)室純培養(yǎng)在生物技術(shù)中是一個(gè)重要的操作實(shí)驗(yàn)，課題涉及內(nèi)容多、范圍廣，實(shí)驗(yàn)難度很大。為了使學(xué)生更好地了解實(shí)驗(yàn)中的許多工作，包括儀器使用、菌液稀釋、菌株移植、接種等，都要在無菌的或不被污染的條件下進(jìn)行，才能保證做到純粹培養(yǎng)成功，筆者結(jié)合教學(xué)實(shí)際談?wù)剬?duì)本課題的教學(xué)設(shè)計(jì)。
一、教學(xué)目標(biāo)確立
依據(jù)課程內(nèi)容要求，確立本課題教學(xué)目標(biāo)見表1。
表1
二、教學(xué)實(shí)施設(shè)計(jì)
1.制訂實(shí)驗(yàn)計(jì)劃
依據(jù)課程內(nèi)容要求，確立本課題教學(xué)安排見表2。
表2
2.純化大腸桿菌的原理
微生物的純培養(yǎng)，選用平板劃線法或稀釋涂布平板法，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上操作，經(jīng)培養(yǎng)后可分離得到單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，即菌落。
3.準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料
本課題所用材料、儀器及藥品見表3。
表3
實(shí)驗(yàn)材料 大腸桿菌 配制系列稀釋菌液
實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備 培養(yǎng)皿、試管、酒精燈、試管架、移液管、膠頭滴管、接種環(huán)、涂布器、恒溫箱、無脂棉、玻璃棒、消毒棉球、超凈工作臺(tái) 培養(yǎng)皿、試管、移液管、接種環(huán)、涂布器等滅菌（已滅菌備用）
實(shí)驗(yàn)藥品 牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基200ml、無菌水150ml 提前配制（滅菌備用）
4.實(shí)驗(yàn)操作
（1）指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)操作。本課題實(shí)驗(yàn)可按照下面實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行操作：
超凈工作臺(tái)倒平板、接種培養(yǎng)箱純化培養(yǎng)。
（2）接種法。一般是無菌培養(yǎng)基在水浴鍋加熱融化后冷卻至50℃左右倒平板。操作必須始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行，每皿倒入15ml左右并且不要將皿蓋完全打開，冷卻后的平板要倒置。
平板劃線法（圖1）：即用接種環(huán)將菌體沾在平板培養(yǎng)基上。微生物細(xì)胞隨畫線次數(shù)的增多而減少，將微生物單個(gè)地分離，并最終形成標(biāo)準(zhǔn)的菌落。在畫線操作時(shí)應(yīng)注意：一是用接種環(huán)取菌種之前、每次畫線之前和畫線結(jié)束都要進(jìn)行灼燒滅菌，灼燒后要在酒精燈附近冷卻后再操作；二是畫線時(shí)不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基，如果采用分段畫線法操作從第二次操作應(yīng)總在上一次畫線末端開始，首尾區(qū)不能相連；三是操作必須始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行。
稀釋涂布平板法（圖2）：即先將菌液用無菌水進(jìn)行一系列梯度為（如10-1，10-2，10-3）稀釋液，用無菌玻璃涂棒將不同稀釋度的菌液均勻地涂布在平板上。聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。在涂布操作時(shí)應(yīng)注意：一是配制系列梯度稀釋液必須用無菌水配制；二是配制系列梯度稀釋液和轉(zhuǎn)移菌液以及涂布過程等必須都在酒精燈火焰旁進(jìn)行。
（3）培養(yǎng)操作。 將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基（空白）放入37℃恒溫箱中，培養(yǎng)18～24h后，觀察并記錄。這期間安排學(xué)生代表或?qū)嶒?yàn)小組長進(jìn)行定期觀察，并做好記錄，以便及時(shí)讓其他學(xué)生觀察到自己的實(shí)驗(yàn)成果。
三、問題討論
關(guān)鍵詞：微生物 實(shí)驗(yàn)室 質(zhì)量管理 質(zhì)量控制
中圖分類號(hào)：R197.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2013）16-0064-02
現(xiàn)今社會(huì)，在社會(huì)熱點(diǎn)中，微生物及其產(chǎn)生的各類毒素引發(fā)的污染備受關(guān)注。因此，做好微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制對(duì)監(jiān)控食品安全至關(guān)重要。本文就微生物實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制進(jìn)行探討。
1 專業(yè)人員的素質(zhì)
專業(yè)技術(shù)人員在微生物檢驗(yàn)過程中應(yīng)當(dāng)具有較豐富的專業(yè)知識(shí)和較強(qiáng)的分析判斷能力。同時(shí)要有良好的職業(yè)道德，有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和高度的責(zé)任心；檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)確、可靠，因此加強(qiáng)檢驗(yàn)人員質(zhì)量管理教育和技術(shù)業(yè)務(wù)的培訓(xùn)顯得及其必要。可定期組織專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)和進(jìn)修學(xué)習(xí)，促使檢驗(yàn)人員對(duì)新理論、新技術(shù)、新方法及時(shí)掌握，培訓(xùn)工作應(yīng)作為持久的、長效的專業(yè)技術(shù)人員提高素質(zhì)的重要工作內(nèi)容。將定期考核納入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理體系，作為檢驗(yàn)員檢驗(yàn)?zāi)芰皹?biāo)準(zhǔn)熟練程度的一個(gè)驗(yàn)收程序。
2 儀器設(shè)備的控制
微生物實(shí)驗(yàn)室主要檢驗(yàn)用設(shè)備有：生物安全柜、冰箱、培養(yǎng)箱、高壓滅菌器、凈化臺(tái)、顯微鏡、蒸餾設(shè)備等。儀器設(shè)備應(yīng)嚴(yán)格按照出廠提供的有關(guān)規(guī)定和方法正確使用，同時(shí)注意儀器設(shè)備的質(zhì)量控制，制定相關(guān)質(zhì)量管理文件，嚴(yán)格對(duì)照其中儀器設(shè)備管理程序的規(guī)定執(zhí)行。
2.1 儀器的采購
購置儀器過程中，須對(duì)其技術(shù)指標(biāo)、性能進(jìn)行進(jìn)行考察了解，并經(jīng)過有效論證后方能采購。采購貴重、大型設(shè)備儀器時(shí)，供貨方應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行安裝、調(diào)試、核準(zhǔn)。確認(rèn)所有技術(shù)條件符合規(guī)定記錄驗(yàn)收?qǐng)?bào)結(jié)果后，即可交付使用，使用過程中須明確保管人。
2.2 儀器設(shè)備的建檔備案
對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行建檔備案，建立儀器設(shè)備卡（應(yīng)標(biāo)明設(shè)備名稱、編號(hào)、型號(hào)、生產(chǎn)廠名稱、產(chǎn)地和價(jià)款、采購時(shí)間、啟用時(shí)間、出廠編號(hào)等），歸整使用說明書、 檢定/校準(zhǔn)證書、合格證和使用維護(hù)記錄等至統(tǒng)一檔案盒內(nèi)管理保存。
2.3 儀器設(shè)備的檢定和校準(zhǔn)
定期對(duì)強(qiáng)制性檢定的儀器和設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)，檢定的計(jì)量部門須具有相應(yīng)的資歷，儀器檢定合格后方可使用。儀器被移動(dòng)過、維修過或使用一段時(shí)間后，檢測(cè)結(jié)果會(huì)造成一定影響，這時(shí)要對(duì)儀器進(jìn)行期間核查。定期按儀器自校規(guī)程對(duì)不屬于強(qiáng)檢的儀器進(jìn)行自校，據(jù)儀器情況貼"合格”“準(zhǔn)用”或“停用”標(biāo)簽。
3 試劑、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、質(zhì)控物的質(zhì)量控制
3.1 培養(yǎng)基的質(zhì)控
（1）培養(yǎng)基的購置與保存。購置培養(yǎng)基時(shí)注意選擇質(zhì)量和信譽(yù)好的公司，要購買質(zhì)量可靠、未過期、品質(zhì)優(yōu)良的培養(yǎng)基。
微生物實(shí)驗(yàn)室收到培養(yǎng)基后，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有培養(yǎng)基的收貨記錄，記錄詳單應(yīng)包括生產(chǎn)商家培養(yǎng)基的名稱、接收日期、批號(hào)、有效期、包裝及其完整性。培養(yǎng)基在使用前，應(yīng)有專人對(duì)培養(yǎng)基經(jīng)過驗(yàn)證合格，不同批次的培養(yǎng)基應(yīng)做實(shí)驗(yàn)對(duì)照。培養(yǎng)基一般應(yīng)貯存于陰涼干燥處，避免強(qiáng)光直射。有特別說明的培養(yǎng)基須嚴(yán)格按照廠商提供的要求進(jìn)行貯存和使用。
（2）培養(yǎng)基的使用。嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)規(guī)定對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行配制操作。記錄配制量與操作者、日期，并于包裝上標(biāo)明使用期限，定期做質(zhì)量檢查，以保證其有效性。檢驗(yàn)人員應(yīng)熟練掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)，按照相應(yīng)的壓力和溫度要求對(duì)實(shí)驗(yàn)用器材（培養(yǎng)皿、三角瓶、移液管等）及培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌處理。含糖類培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)注意控制在允許溫度范圍內(nèi)，以避免營養(yǎng)成分的喪失。培養(yǎng)基配制用水主要為蒸餾水、離子水或經(jīng)處理后無干擾劑和抑制劑的水。配置用水的電阻率應(yīng)300000Ω/cm（25℃的情況下）以上，重金屬含量0.05mg/L以下。培養(yǎng)基溶解后，應(yīng)注意調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值符合相應(yīng)要求[2]。定期檢查培養(yǎng)基的顏色和透明度，一旦發(fā)現(xiàn)異常，則舍棄不用。每批培養(yǎng)基均應(yīng)做無菌試驗(yàn)和已知菌株對(duì)照試驗(yàn)，確保培養(yǎng)基的配制正確、消毒達(dá)到要求以及操作過程未受污染。如因原料保管不善而變質(zhì)或過期的試劑應(yīng)棄去。
3.2 試劑及血清制品的質(zhì)量控制
（1）實(shí)驗(yàn)過程中，按照要求選用不同等級(jí)試劑。試劑須按照相關(guān)要求定期更換，部分試劑要求現(xiàn)用現(xiàn)配。配好各種試劑后，填寫標(biāo)簽均注明試劑名稱、配制日期、有效期、配制者及配置日期，并作好相關(guān)記錄。為確保試劑的準(zhǔn)確可靠性，定期應(yīng)做試劑性能測(cè)試，具體間隔時(shí)間視試劑的穩(wěn)定性和使用頻率而定。如氧化酶試劑須每次使用前測(cè)試，靛基質(zhì)試劑相對(duì)穩(wěn)定可每周進(jìn)行1次測(cè)試。每次配制好的染色液應(yīng)當(dāng)進(jìn)行檢測(cè)，常用染色液（如革蘭染液）每周檢測(cè)1次，不常用染色液在每次使用前[1]。為確保試劑穩(wěn)定性，選用適當(dāng)?shù)馁A存方法對(duì)試劑貯存。如：氧化酶試劑一般置于棕色瓶于4℃冰箱保存。
（2）酶、抗血清等生物制品具有生物活性，應(yīng)該注意其有效期，過期則舍棄不用。按說明要求進(jìn)行診斷血清的使用和保存，一般要求置于4℃冰箱貯存。在操作過程中要盡快取用，暴露室溫過久則易造成其失效。操作前，尤其要注意這些生物制品的有效期和效價(jià)。一般第一次使用時(shí)，須用相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)菌株檢查抗血清的有效性，常規(guī)工作中每月對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)1次。如出現(xiàn)任何顏色的改變或混濁，即不能使用。
4 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制
實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)在室內(nèi)光線，空氣流通，設(shè)施布局等方面應(yīng)符合要求，不能對(duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、有效性和準(zhǔn)確性造成干擾，同時(shí)還要起到對(duì)工作人員的自身安全和儀器一定的保護(hù)作用。微生物檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈區(qū)（包括超凈工作臺(tái)或潔凈實(shí)驗(yàn)室）進(jìn)行，潔凈區(qū)應(yīng)有明顯標(biāo)示。無菌室潔凈程度要達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，每次使用前需要紫外線燈消毒45min以上，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法，定期對(duì)紫外線空氣消毒效果進(jìn)行測(cè)定。微生物實(shí)驗(yàn)室的空氣質(zhì)量、溫濕度要每天進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并做好記錄，以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性、有效性和準(zhǔn)確性。
參考文獻(xiàn)
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[3]朱建國.淺談食品衛(wèi)生檢驗(yàn)人員的專業(yè)知識(shí)結(jié)構(gòu)[J].鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，1998（01）.
實(shí)驗(yàn)室管理的大忌就是臟和亂，尤其是儀器、物品的放置雜亂無序，會(huì)給工作帶來很大不便，影響工作質(zhì)量，降低工作效率；電器和壓力容器無序地亂放，會(huì)有安全隱患。更為重要的是，實(shí)驗(yàn)室的臟和亂，對(duì)學(xué)生會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面影響，不僅會(huì)影響樹立整潔、有序、勤奮、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)，甚至影響綜合素質(zhì)的培養(yǎng)。多年來，微生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室，能夠常年保持整潔、干凈的良好狀態(tài)，究其主要原因有二：一是管理者具有強(qiáng)烈的事業(yè)心和責(zé)任感。二是具有嚴(yán)格得力的管理措施：第一，每個(gè)學(xué)期的開始和結(jié)束，都要全面、徹底地進(jìn)行室內(nèi)衛(wèi)生大清掃，包括門窗玻璃、桌面、臺(tái)面、地面、儀器、器皿和物品等；第二，每次實(shí)驗(yàn)課結(jié)束后，留下4～8名同學(xué)進(jìn)行清掃和歸弄整理工作，做到桌面上的染料不留任何痕跡，用過的所有玻璃器皿全部洗刷干凈瀝干在筐里，所有物品擺放整齊，格局統(tǒng)一。這樣一來，其每一次實(shí)驗(yàn)課都以干凈、整潔的嶄新面貌迎接教師與學(xué)生們。
2實(shí)驗(yàn)教學(xué)準(zhǔn)備工作幾項(xiàng)準(zhǔn)則
2.1嚴(yán)格進(jìn)行每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)實(shí)驗(yàn)
預(yù)備實(shí)驗(yàn)是保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量的前提，其目的是：檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法及操作規(guī)程是否準(zhǔn)確無誤，所用溶液、試劑和藥品是否合格；進(jìn)一步確定實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間，探索可能出現(xiàn)的問題并擬定解決問題的方案，根據(jù)實(shí)驗(yàn)難易程度確定評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)等[6]。另外，制片及染色技術(shù)實(shí)驗(yàn)，特別是微生物的生長與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，常常出現(xiàn)許多意外現(xiàn)象或不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。諸如，某種溶液和試劑失效，或某種微生物生長不好等等。因此，每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目都應(yīng)當(dāng)提前預(yù)做一次，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、無誤，以保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量。
2.2認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)教學(xué)前期準(zhǔn)備工作
實(shí)驗(yàn)教學(xué)的前期準(zhǔn)備工作，除嚴(yán)格進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)外，尚需認(rèn)真檢查顯微鏡和儀器設(shè)備、玻璃器皿及溶液、試劑等，以及實(shí)驗(yàn)桌凳的完好狀態(tài)。2.2.1顯微鏡的檢查要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)課前認(rèn)真檢查：普通光學(xué)顯微鏡機(jī)械部分的鏡臂、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、標(biāo)本夾、粗細(xì)調(diào)節(jié)器，以及光學(xué)系統(tǒng)的目鏡、物鏡和聚光鏡的完好情況，尤其是要仔細(xì)檢查調(diào)節(jié)器的靈敏度和油鏡的清晰度。2.2.2實(shí)驗(yàn)用儀器設(shè)備完整性的檢查實(shí)驗(yàn)課前應(yīng)當(dāng)認(rèn)真檢查儀器設(shè)備的完整性。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中最忌諱出現(xiàn)缺東少西，以及儀器設(shè)備和物品質(zhì)量不合要求的現(xiàn)象[7]。每堂實(shí)驗(yàn)課所需的所有物品，都應(yīng)當(dāng)備足有余，所用儀器設(shè)備都要保持運(yùn)轉(zhuǎn)良好。實(shí)驗(yàn)用儀器及物品完整性檢查工作是相當(dāng)繁瑣的，工作量也很大。舉例說明，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的前3個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，即光學(xué)顯微鏡的使用與革蘭氏染色法、細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性及其莢膜觀察、酵母菌的死活鑒別，以及放線菌、霉菌制片與細(xì)菌計(jì)數(shù)，所用的滴瓶總計(jì)200多個(gè)，需要逐個(gè)地進(jìn)行嚴(yán)格檢查：膠頭是否漏氣，瓶中的試劑是否失效、夠用，滴芯是否能順利地取出(發(fā)現(xiàn)沉淀和結(jié)晶應(yīng)及時(shí)清洗)，標(biāo)簽變色嚴(yán)重的還要及時(shí)更換。其他儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)桌凳的完好狀態(tài)也都應(yīng)當(dāng)進(jìn)行認(rèn)真檢查，如逐一檢查每個(gè)實(shí)驗(yàn)凳腳是否松動(dòng)，并及時(shí)擰緊等。2.2.3玻璃器皿一定要洗刷干凈微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)所用的玻璃器皿數(shù)量很大，如試管、培養(yǎng)皿和三角燒瓶及載玻片等數(shù)以千計(jì)。用來盛裝微生物培養(yǎng)基的大量試管、培養(yǎng)皿和三角燒瓶，有一丁點(diǎn)不干凈就會(huì)生長霉菌；有的如載玻片上黏附了香柏油，洗刷難度很大。所以，玻璃器皿的洗刷工作是十分重要而艱巨的。玻璃器皿的全部洗刷工作都是教師與同學(xué)們共同完成的。洗刷后的檢查工作采用對(duì)著陽光以流水沖洗的方式進(jìn)行，確保每一個(gè)玻璃器皿干凈明亮。其具體安排程序如下：玻璃器皿經(jīng)學(xué)生洗刷后，再由同學(xué)進(jìn)行檢查，最后由教師抽樣檢查。這樣，不僅保證了玻璃器皿的干凈度，還培養(yǎng)了學(xué)生掌握高精度清洗器皿的基本技能及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。
3重視并完善解決實(shí)驗(yàn)課堂上出現(xiàn)的問題
對(duì)于在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中經(jīng)常出現(xiàn)的一些問題，必須認(rèn)真分析原因，并及時(shí)想辦法解決。在出現(xiàn)的問題中，有些是屬于實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及其技術(shù)方法問題，但常常碰到的是一些由于學(xué)生缺少應(yīng)有的素質(zhì)或經(jīng)驗(yàn)所造成的，都應(yīng)該及時(shí)分析并適當(dāng)解決之。諸如，有的顯微鏡粗鑼旋縫隙里有許多油漬，究其原因是由于同學(xué)們的手不夠清潔所造成的；為此，便要求學(xué)生在使用顯微鏡之前，一定要洗手。再如，個(gè)別同學(xué)有時(shí)將實(shí)驗(yàn)用的標(biāo)本片丟落在載物臺(tái)上，為了避免類似情況再次發(fā)生，便要求學(xué)生每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后一定要清點(diǎn)一下標(biāo)本片的數(shù)量。第三，當(dāng)發(fā)現(xiàn)個(gè)別學(xué)生把臺(tái)微尺扔到放有載玻片的鍋里，為此便不再將其擺放到學(xué)生的座位上，而是現(xiàn)場把臺(tái)微尺發(fā)放給每一組同學(xué)，并講明其價(jià)格昂貴，應(yīng)當(dāng)細(xì)心使用，輕拿輕放，課后由課代表統(tǒng)一交給老師核查。第四，有的學(xué)生把雙層瓶（重層瓶）的玻璃帽和裝有結(jié)晶紫的滴蕊擰碎，為了避免類似情況再次出現(xiàn)，每次上課前都要把其逐一擦拭，并檢查每一個(gè)滴瓶的滴蕊是否松動(dòng)。
4實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理工作者,必需樹立為教學(xué)服務(wù)的理念
實(shí)驗(yàn)室為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，必須配有相應(yīng)的儀器設(shè)備，以滿足開展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求。近幾年來我們中心的微生物實(shí)驗(yàn)室先后經(jīng)過計(jì)量認(rèn)證和實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的初評(píng)審和監(jiān)督評(píng)審，積累了一些經(jīng)驗(yàn)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則的要求：儀器/設(shè)備要求滿足開展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求；制定相關(guān)儀器/設(shè)備的作業(yè)指導(dǎo)書；定期進(jìn)行檢定校準(zhǔn)；做好運(yùn)行狀況記錄；維修后設(shè)備/儀器的再校準(zhǔn)或檢查，應(yīng)具有完整的檢查記錄。
我們對(duì)常用的儀器設(shè)備制定相關(guān)的作業(yè)指導(dǎo)書和檢定校準(zhǔn)計(jì)劃，特別重視對(duì)新購儀器和那些容易漂移儀器的檢定。制定儀器/設(shè)備清單，指定專人保管，每臺(tái)儀器設(shè)備上均須貼有明顯標(biāo)識(shí)，其中資產(chǎn)標(biāo)識(shí)包括編號(hào)、名稱、型號(hào)、生產(chǎn)廠家；狀態(tài)標(biāo)識(shí)：儀器設(shè)備分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定的狀態(tài)。校驗(yàn)合格則貼有綠色合格證（計(jì)量編號(hào)、校驗(yàn)日期和下次校驗(yàn)日期），凡校驗(yàn)不合格、過期、需報(bào)修的設(shè)備儀器應(yīng)貼有紅色停用證。為了保證正確使用各類儀器，做好使用和維修、保養(yǎng)記錄。維修后的設(shè)備/儀器重新檢定并校準(zhǔn)證明其功能指標(biāo)已恢復(fù)，做好完整的檢查記錄，方可使用。
為了做好常用儀器設(shè)備的質(zhì)量控制工作，我們把實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用頻率高且需要監(jiān)控的儀器設(shè)備初步分為三類：（一）培養(yǎng)箱（普通培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、 冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平）；（二）小計(jì)量容器；（三）微生物測(cè)定儀器、微生物鑒定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀等。
1 溫度計(jì) 實(shí)驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)，分別做好標(biāo)識(shí)。工作溫度計(jì)用于日常溫度檢查；參照溫度計(jì)用于校正工作溫度計(jì)。定期檢查溫度計(jì)的運(yùn)行情況，一般半年一次。對(duì)溫度計(jì)日常檢查、校準(zhǔn)檢查和運(yùn)行檢查，都應(yīng)做好相應(yīng)的技術(shù)記錄。
2 培養(yǎng)箱 根據(jù)培養(yǎng)物性質(zhì)及溫度要求，培養(yǎng)箱應(yīng)分別設(shè)置（以用途和溫度分）。培養(yǎng)箱的溫差要求，一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不大于±1℃，箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差（內(nèi)部的溫度均衡性）以及溫度波動(dòng)同樣不大于±1℃。溫度監(jiān)控方法：可將工作溫度計(jì)置甘油中，放入待測(cè)箱體內(nèi)，觀察工作溫度計(jì)的溫度，最好每天監(jiān)控1-2次，并做好記錄。
3 高壓滅菌鍋 實(shí)驗(yàn)室常用生物指示菌法、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法對(duì)其滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)。高壓滅菌鍋要由專人按作業(yè)指導(dǎo)書操作，并做好每一次的使用記錄。日常工作記錄應(yīng)包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶的顏色變化。在使用高壓滅菌鍋時(shí)，鍋內(nèi)放置物品不宜過多，而且單位體積內(nèi)的內(nèi)容物（每瓶內(nèi)的培養(yǎng)基）不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不同耐受溫度。高壓后物品總的暴露時(shí)間最好不要超過45min。高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。
4 干燥滅菌箱 日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息：開始的時(shí)間、到達(dá)滅菌溫度時(shí)的時(shí)間、取出的時(shí)間（或關(guān)閉時(shí)間）。干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試，溫度要求與精確度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者為滅菌2h，后者為30min。干燥滅菌箱校準(zhǔn)時(shí)間一般為一年。
5 天平 要求放置在無振動(dòng)、無氣流影響的水平臺(tái)面上，每次使用做好檢查記錄。天平作為計(jì)量儀器是列入國家強(qiáng)制檢定范圍的，一般1次/年進(jìn)行檢定。運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)照。
6 pH計(jì) 使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。緩沖液使用有效期：PH4.00 有效期約1年； PH7.00 有效期約6個(gè)月；pH9.00 有效期約6個(gè)月。pH計(jì)要定期維護(hù)，電極外表要定期清洗，同時(shí)對(duì)電極敏感性進(jìn)行檢測(cè)及極性恢復(fù)。
7 超凈工作臺(tái) 要求潔凈度為100級(jí)，空氣沉降30min，細(xì)菌數(shù)＜1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái)，細(xì)菌數(shù)＜0.49個(gè)/皿.。凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次應(yīng)每月一次，主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。凈化工作臺(tái)高效過濾膜一般為一年更換一次，并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。
8 紫外燈 檢測(cè)方法包括儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是通過專用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國家消毒技術(shù)規(guī)范中規(guī)定在距離照射1米處，要求強(qiáng)度為90。生物測(cè)試法就是采用一定的細(xì)菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定比例稀釋，菌量控制在200-250個(gè)/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射2min，同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組，后置37℃培養(yǎng)48h，計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。
9 酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī) 每天：核對(duì)濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象；每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵；每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求；每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部件。酶標(biāo)儀工作中常用陽性對(duì)照檢測(cè)其功能的正常性。
10 移液器 定期（每年至少1次）校準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)。 標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。 校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。
11 冰箱和孵育箱 每天檢查和記錄冰箱溫度，每個(gè)工作日檢查記錄孵育箱溫度，并做好記錄，使用經(jīng)過計(jì)量部門校準(zhǔn)合格的溫度計(jì)測(cè)量冰箱和孵育箱的實(shí)際溫度；根據(jù)不同規(guī)格冰箱和凍存樣品性質(zhì)對(duì)溫度要求不同，調(diào)節(jié)相應(yīng)的溫度。放置要求4℃保存的試劑盒的冰箱溫度應(yīng)在2～8℃；用于培養(yǎng)的孵育箱溫度誤差應(yīng)小于1℃；用于冷凍核酸和抗原檢測(cè)的血漿、淋巴細(xì)胞和病毒上清適宜在-70℃冰箱，要求冰箱溫度低于-65℃。
以上十一種儀器是我們?nèi)粘９ぷ髦惺褂妙l率較高的，對(duì)這些儀器設(shè)備的使用和管理我們積累了一些經(jīng)驗(yàn)，日常工作中做好儀器的運(yùn)行情況和使用記錄，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題。這樣就更能保證檢測(cè)過程的順利進(jìn)行，最終保證我們的檢測(cè)結(jié)果更科學(xué)更準(zhǔn)確。
參考文獻(xiàn)
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［3］ 王隴德主編．實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理．北京：人民衛(wèi)生出版社，2005
*通訊作者：關(guān)洪全（1954―），男，遼寧本溪人，教授，主要從事中醫(yī)藥教育與中醫(yī)藥對(duì)免疫調(diào)控的研究。
摘要：在醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中防止實(shí)驗(yàn)室污染十分重要。本文分析了微生物污染實(shí)驗(yàn)室的主要原因，包括自然污染、不認(rèn)真遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則引起的污染以及意外事故引起的污染等；并提出了防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的若干措施，主要包括提高對(duì)微生物污染實(shí)驗(yàn)室危害的認(rèn)識(shí)、完善或建立生物安全實(shí)驗(yàn)室、健全并嚴(yán)格遵守防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度等。
關(guān)鍵詞：微生物；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；實(shí)驗(yàn)室污染
微生物的種類繁多，在自然界中分布非常廣泛。在醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中盡管選用沒有致病性或致病性很弱的微生物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，但若稍不注意，就有可能造成實(shí)驗(yàn)室污染，從而影響教學(xué)、科研等工作的正常進(jìn)行，甚至造成其他危害。
1微生物污染實(shí)驗(yàn)室的主要原因
（1）自然污染。空氣中含有大量的微生物，尤其是真菌孢子較多，可隨氣流進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室引起污染。筆者所在的課題組曾經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，將直徑為9cm含有無菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿開蓋暴露于空氣中20分鐘，其上即可落有數(shù)十乃至數(shù)百個(gè)微生物生長繁殖。
（2）不認(rèn)真遵守微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則引起污染。微生物實(shí)驗(yàn)室有嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室規(guī)則。依據(jù)病原微生物的傳染性、對(duì)個(gè)體或群體的危害程度等將其分為4類；根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)病原微生物的生物安全防護(hù)水平以及實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)，將病原微生物實(shí)驗(yàn)室分為4級(jí)，并嚴(yán)格要求不同致病性的微生物須在不同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)[1]。在培養(yǎng)研究生等過程中，若實(shí)驗(yàn)人員不認(rèn)真遵守上述規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，則可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室污染，甚至引起不良后果。
（3）意外事故引起污染。在進(jìn)行醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)時(shí)，由于意外事故也可造成實(shí)驗(yàn)室污染。如實(shí)驗(yàn)人員不注意打破容有活微生物的培養(yǎng)皿、試管等器材；給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種微生物后，感染微生物的動(dòng)物常由于某些意外原因跑到籠外；防護(hù)病原微生物的措施出現(xiàn)意外等因素均可引起實(shí)驗(yàn)室污染。
2防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的主要對(duì)策
（1）提高對(duì)微生物污染實(shí)驗(yàn)室危害的認(rèn)識(shí)。如果微生物污染實(shí)驗(yàn)室，輕者可影響教學(xué)、科研等工作的正常進(jìn)行，重者可污染環(huán)境，甚至引起實(shí)驗(yàn)人員發(fā)生感染性疾病或超敏反應(yīng)性疾病等現(xiàn)象。因此，微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員必須提高對(duì)微生物污染實(shí)驗(yàn)室危害的認(rèn)識(shí)，教師須對(duì)做微生物實(shí)驗(yàn)的學(xué)生進(jìn)行嚴(yán)格的安全教育，這是防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的首要前提。
（2）完善或建立生物安全實(shí)驗(yàn)室。在本科生醫(yī)學(xué)微生物教學(xué)和培養(yǎng)研究生時(shí)，須按照所使用微生物的致病性及生物安全的要求等完善或建立生物安全實(shí)驗(yàn)室。已有生物安全實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)進(jìn)一步完善其使用與管理制度等，尚未建立或?qū)嶒?yàn)室不符合要求的應(yīng)按照需要盡快建立標(biāo)準(zhǔn)的生物安全實(shí)驗(yàn)室。同時(shí)，須經(jīng)常對(duì)實(shí)驗(yàn)室的房間、設(shè)備等進(jìn)行維護(hù)，使其處于能安全使用的狀態(tài)，否則不能進(jìn)行相應(yīng)的微生物實(shí)驗(yàn)。
（3）健全并嚴(yán)格遵守防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度。醫(yī)學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室須按有關(guān)部門的要求嚴(yán)格遵守防止微生物污染實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度。從事有致病性微生物實(shí)驗(yàn)的教師、研究生等實(shí)驗(yàn)人員除須嚴(yán)格遵守微生物實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度外，還應(yīng)注意以下幾個(gè)問題：①實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)掌握微生物實(shí)驗(yàn)技能、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)等；②須嚴(yán)格遵守有關(guān)部門的要求，在進(jìn)行醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)時(shí)，只做允許做的微生物實(shí)驗(yàn)；③做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要在相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，用畢立即消毒，等等[2]。
（4）防止感染動(dòng)物引起的污染。做動(dòng)物感染微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不可在正常動(dòng)物室內(nèi)進(jìn)行，須在相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過程中，要注意防止帶微生物的動(dòng)物跑到室外。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)把帶微生物的動(dòng)物滅菌后再拿到室外，切切不可把帶微生物動(dòng)物的尸體不經(jīng)滅菌就隨便拋棄，同時(shí)還應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行徹底消毒。
（5）認(rèn)真查找并徹底清除污染源。實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生微生物污染，要認(rèn)真查找并徹底清除污染源。如不清除污染源，則污染很難控制。清除污染源后，還應(yīng)采取可靠的方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行徹底消毒。
參考文獻(xiàn)：
關(guān)鍵詞：食品 微生物檢驗(yàn) 質(zhì)量控制
隨著人民生活水平的提高，人們對(duì)食品的安全性要求也越來越高，不僅要求營養(yǎng)豐富、美味可口，而且要求安全、健康。微生物指標(biāo)作為評(píng)價(jià)食品安全的重要指標(biāo)之一，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)怎么控制好微生物檢驗(yàn)就尤為重要了。目前，控制食品質(zhì)量的微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目主要有:菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌和酵母、腸道致病菌和致病性球菌等。
一、 食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述
質(zhì)量控制是食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室為了保證檢驗(yàn)結(jié)果實(shí)事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。是保證食源性致病菌的培養(yǎng)、分離、鑒定及血清學(xué)試驗(yàn)等的準(zhǔn)確性，避免因操作變化導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤。
質(zhì)量控制分為室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)。室內(nèi)質(zhì)量控制是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部采取的以對(duì)比分析、跟蹤以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性控制計(jì)劃；室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是通過互相校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果所進(jìn)行的評(píng)價(jià)。
二、 食品微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制是微生物檢驗(yàn)質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)，包括以下方面：
1.人員要求
微生物實(shí)驗(yàn)室屬于專業(yè)性較強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)室，所需檢驗(yàn)人員必須具備相應(yīng)的專業(yè)知識(shí)和一定的操作能力。除此之外，檢測(cè)人員還應(yīng)具備一定的經(jīng)驗(yàn)和高度的主觀判斷力。微生物檢驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)常參加內(nèi)部比對(duì)活動(dòng)和能力驗(yàn)證工作，定期對(duì)上崗人員進(jìn)行考核，對(duì)新的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行培訓(xùn)等。
2.設(shè)施和環(huán)境條件要求
從事微生物檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室屬于特殊實(shí)驗(yàn)環(huán)境，也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果保證的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備進(jìn)行微生物檢驗(yàn)所需的適宜、充分的實(shí)施條件，包括檢驗(yàn)設(shè)施和輔助設(shè)施。同時(shí)應(yīng)制定合理的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序，并對(duì)其記錄結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室所涉及微生物檢驗(yàn)的種類和GB 19489-2008《實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求》確定實(shí)驗(yàn)室屬于何種防護(hù)等級(jí)的生物安全實(shí)驗(yàn)室，其基本配置是否滿足該等級(jí)微生物檢驗(yàn)的要求和生物安全要求。
3.檢測(cè)設(shè)備要求
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備開展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的設(shè)備/儀器，并制定和實(shí)施相關(guān)設(shè)備/儀器的維護(hù)、校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證的程序。以確保其處于良好工作狀態(tài)。并根據(jù)使用頻率在特定時(shí)間間隔內(nèi)進(jìn)行維護(hù)和性能驗(yàn)證，并保存相關(guān)記錄。
4.培養(yǎng)基及試劑等的質(zhì)量控制
培養(yǎng)基是微生物檢測(cè)中的基礎(chǔ)物質(zhì)，其質(zhì)量好壞直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。GB/T 27405-2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè)理解與實(shí)施》中明確指出了微生物實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行評(píng)估。因此微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)每次購進(jìn)的培養(yǎng)基必須采用標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株或生化反應(yīng)等措施來進(jìn)行必要的技術(shù)驗(yàn)證，以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量。
5.檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制
檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制可采取以下方法：定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（參考物質(zhì)）進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制；參加實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)或能力驗(yàn)證；利用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)；對(duì)留存的樣品進(jìn)行再檢測(cè)。在整個(gè)檢測(cè)過程中，要設(shè)立陽性、陰性對(duì)照，這項(xiàng)工作實(shí)際上是對(duì)操作過程的質(zhì)量控制，也是對(duì)人員能力、儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、以及環(huán)境的設(shè)施的間接控制。在檢測(cè)過程中如果出現(xiàn)異常情況可及時(shí)查找原因，及時(shí)排除。
6.標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物來驗(yàn)收培養(yǎng)基、驗(yàn)證方法和評(píng)估實(shí)驗(yàn)操作。因此，必須采用形態(tài)、染色反應(yīng)、生理生化及血清學(xué)特性典型和穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)菌株。標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)來源于認(rèn)可的國內(nèi)或國外菌種收藏機(jī)構(gòu)。目前，標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存常采用冷凍干燥法、冰凍保存法和培養(yǎng)基保存法。
7.實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)所操作的生物因子的危害程度采取相應(yīng)的防護(hù)措施，相關(guān)防護(hù)屏障要符合相應(yīng)生物安全級(jí)別的要求。為確保微生物檢驗(yàn)人員不受危害，應(yīng)規(guī)定微生物實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程和檢驗(yàn)人員應(yīng)配備個(gè)人防護(hù)用品。同時(shí)，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有警示標(biāo)識(shí)，以警示進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員了解其可能產(chǎn)生的危害，必須進(jìn)行相關(guān)防護(hù)后才能進(jìn)入。加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的安全知識(shí)培訓(xùn)，樹立“安全第一，預(yù)防為主”的觀念，提高安全防范意識(shí)，確保相關(guān)人員人身安全和財(cái)產(chǎn)安全。微生物實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)實(shí)驗(yàn)過程中所產(chǎn)生的廢棄物通過一定的滅菌處理后才能廢棄。
三、 食品微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量控制是對(duì)質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)，通過互相校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果進(jìn)行的評(píng)價(jià)。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng)，對(duì)其開展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。室間質(zhì)量控制的一般性檢查項(xiàng)目包括：
1、儀器設(shè)備的操作書，使用、保養(yǎng)、維修記錄。
2、培養(yǎng)基和試劑的配制記錄、培養(yǎng)基的保存方法、滅菌質(zhì)量、有效期。
3、室內(nèi)全面質(zhì)量控制的建立，工作人員熟練程度的考核和盲樣試驗(yàn)的進(jìn)行情況，檢驗(yàn)操作手冊(cè)及操作規(guī)范性。
工作人員熟練程度的考核用模擬食品標(biāo)本做質(zhì)量評(píng)價(jià)是目前國內(nèi)外廣泛采用的方法，主要評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室在病原菌的分離、鑒定試驗(yàn)等方面的工作情況。由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)發(fā)放模擬標(biāo)本或菌種，實(shí)驗(yàn)室按照日常的操作方法進(jìn)行相應(yīng)的分離鑒定試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室完成鑒定后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)將結(jié)果反饋至參考實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行評(píng)價(jià)。
質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)對(duì)每次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將每一實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較和統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)回評(píng)估報(bào)告。評(píng)估報(bào)告不僅可評(píng)定檢驗(yàn)結(jié)果的偏差，還可以檢查整個(gè)質(zhì)量控制體系的有效性。
微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性、準(zhǔn)確性由許多因素構(gòu)成，包括人員、設(shè)施和環(huán)境、設(shè)備、檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證和確認(rèn)、各種培養(yǎng)基的質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)菌株的質(zhì)量控制、檢測(cè)過程的質(zhì)量控制等活動(dòng)。只有認(rèn)真開展上述每項(xiàng)工作，最終才能保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠、準(zhǔn)確。
參考文獻(xiàn)：
[1]GB 19489-2008《實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求》
一、切實(shí)提高對(duì)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作重要性的認(rèn)識(shí)
獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全，特別是高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，事關(guān)重大動(dòng)物疫病防控，事關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作人員和公眾健康，事關(guān)公共衛(wèi)生安全。《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》頒布以來，各級(jí)獸醫(yī)行政管理部門按照《條例》和有關(guān)規(guī)章和技術(shù)規(guī)范的要求，采取措施，加強(qiáng)管理，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理水平有了一定提高，但還存在一些不容忽視的問題，如生物安全管理制度不完善、生物安全管理措施執(zhí)行不嚴(yán)、實(shí)驗(yàn)室工作人員安全防范知識(shí)缺乏，甚至存在違法保存高致病性動(dòng)物病原微生物菌(毒)種和未經(jīng)批準(zhǔn)擅自開展高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的現(xiàn)象。同時(shí)，有些地方獸醫(yī)主管部門實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管措施不到位，執(zhí)法監(jiān)督不嚴(yán)，對(duì)違法行為查處力度不夠。當(dāng)前，我省重大動(dòng)物疫病防控形勢(shì)依然嚴(yán)峻，各級(jí)獸醫(yī)主管部門一定要站在全局的高度，高度重視獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，強(qiáng)化安全意識(shí)，完善管理措施，落實(shí)監(jiān)管責(zé)任，嚴(yán)防實(shí)驗(yàn)室生物安全事故的發(fā)生，切實(shí)維護(hù)公共衛(wèi)生安全。
二、采取有效措施，切實(shí)加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管工作
獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管是《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》賦予獸醫(yī)主管部門的一項(xiàng)重要職責(zé)。各地要采取有力措施，加大工作力度，進(jìn)一步做好實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，確保實(shí)驗(yàn)室生物安全。
一是依法把好實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批關(guān)。要嚴(yán)格執(zhí)行高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批制度，未取得三級(jí)、四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室資格或者雖取得三級(jí)、四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室資格未經(jīng)批準(zhǔn)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。對(duì)從事我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的動(dòng)物病原微生物有關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的，或者從事高致病性禽流感、口蹄疫、小反芻獸疫病原分離和鑒定、活病毒培養(yǎng)、感染材料核酸提取、動(dòng)物接種試驗(yàn)有關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的，必須經(jīng)省局初審后，報(bào)農(nóng)業(yè)部審批。
二是切實(shí)加強(qiáng)菌（毒）種安全監(jiān)管。要嚴(yán)格執(zhí)行指定保藏制度。除中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)的國家獸醫(yī)參考實(shí)驗(yàn)室，其他任何實(shí)驗(yàn)室、單位和個(gè)人，不得保存高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種和樣本。違法保存菌（毒）種和樣本的，獸醫(yī)主管部門要監(jiān)督其就地銷毀，或者立即送農(nóng)業(yè)部指定的保藏機(jī)構(gòu)保存。要加強(qiáng)菌（毒）種使用管理，實(shí)行菌（毒）種統(tǒng)一供應(yīng)制度。保藏機(jī)構(gòu)憑省級(jí)以上獸醫(yī)主管部門的批準(zhǔn)文件，向?qū)嶒?yàn)室提供高致病性病原微生物菌（毒）種和樣本。實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)室要及時(shí)將菌（毒）種和樣本就地銷毀或者送交保藏機(jī)構(gòu)保管，并建立銷毀或移交記錄。
三是加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物病料采集管理。要認(rèn)真貫徹落實(shí)《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》，切實(shí)加強(qiáng)動(dòng)物病料管理，防止采集和使用病料不當(dāng)造成病原微生物的傳播。除動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)外，其他任何單位和個(gè)人未經(jīng)農(nóng)業(yè)部或者省局批準(zhǔn)，不得擅自采集、運(yùn)輸、保存病料；不得轉(zhuǎn)讓、贈(zèng)送已初步認(rèn)定為重大動(dòng)物疫病或者已確診為重大動(dòng)物疫病的病料;不得將病料樣本寄往國外或者攜帶出境。
四是做好全國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)填報(bào)工作。“全國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)”是利用計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)，對(duì)各級(jí)各類動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施設(shè)備、生物安全水平、實(shí)驗(yàn)室管理狀況以及保存利用動(dòng)物病原微生物菌(毒)種等情況進(jìn)行收集、統(tǒng)計(jì)、分析的系統(tǒng)，通過該系統(tǒng)逐步建立全國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室信息數(shù)據(jù)庫，是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理的一項(xiàng)基礎(chǔ)工作。各地要高度重視，按照《全國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)填報(bào)說明》的要求，明確專人，負(fù)責(zé)本行政區(qū)域內(nèi)從事動(dòng)物疫病檢測(cè)、研究、教學(xué)、菌(毒)種保藏以及獸用生物制品生產(chǎn)企業(yè)等單位的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室基本情況的網(wǎng)上填報(bào)。
五是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全的宣傳和培訓(xùn)。各地要采取多種形式宣傳獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全知識(shí)，每年至少舉辦一期獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)班，對(duì)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室或者實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立單位進(jìn)行培訓(xùn)；獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室或者實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立單位應(yīng)當(dāng)每年定期對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，保證其掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能，并進(jìn)行考核。工作人員經(jīng)考核合格的，方可上崗。
六是做好新建、改建或者擴(kuò)建一級(jí)、二級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室備案工作。新建、改建或者擴(kuò)建一級(jí)、二級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的單位應(yīng)當(dāng)及時(shí)向所在地省轄市獸醫(yī)主管部門備案，省轄市獸醫(yī)主管部門應(yīng)于每年12月份將備案情況匯總后報(bào)省局。
三、加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)，明確責(zé)任，確保獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全工作落到實(shí)處
1 合理安排實(shí)驗(yàn)室的整體布局
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室設(shè)在教學(xué)樓A 區(qū)五樓實(shí)驗(yàn)室，分別由6 間實(shí)驗(yàn)室構(gòu)成，實(shí)驗(yàn)室編號(hào)為: 529、530、531、532、533、534。這幾間實(shí)驗(yàn)室彼此相鄰，以滿足教學(xué)安排的合理性和緊湊性。
2 實(shí)驗(yàn)室的具體安排和設(shè)計(jì)
2. 1 529 實(shí)訓(xùn)室( 儀器室)
( 1) 承擔(dān)課程。臨床學(xué)檢驗(yàn)、血液學(xué)檢驗(yàn)、儀器分析學(xué)、儀器維修。
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。實(shí)驗(yàn)室的四面墻均設(shè)有電源，分別擺放供實(shí)訓(xùn)課程常用的臨床儀器: 三分類血細(xì)胞分析儀、血沉分析儀、血象分析儀、尿液分析儀、尿沉渣分析儀等。實(shí)驗(yàn)室中間擺放由附屬醫(yī)院提供的示教儀器，包括: 不同品牌的三分類血細(xì)胞分析儀、血沉分析儀、血象分析儀、尿液分析儀、尿沉渣分析儀，其中包括希森美康的各型號(hào)儀器，如: SYSMEX R - 500、SYSMEX SF - 3000 、SYSMEX UF - 50、SYSMEX KX - 21、SYSMEX F -B20 、SYSMEX AD - 270，這些儀器按照型號(hào)排列擺放，相當(dāng)于此品牌儀器在臨床上的一個(gè)發(fā)展史的展示。實(shí)驗(yàn)室配備冰箱1 臺(tái)，供臨床學(xué)檢驗(yàn)和血液學(xué)檢驗(yàn)專用，用于存放一些血液標(biāo)本、血液實(shí)驗(yàn)試劑盒和儀器校準(zhǔn)試劑等。
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。三分類血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用、尿液常規(guī)檢驗(yàn)、尿沉渣檢驗(yàn)、尿液分析儀結(jié)構(gòu)、調(diào)試、使用、維護(hù)等。
( 4) 特點(diǎn)。此實(shí)驗(yàn)室是由原來的教師辦公室改造而成的，所以已具備空調(diào)，可以為實(shí)驗(yàn)儀器提供適宜的運(yùn)行溫度，但是電源插座設(shè)置不是很充足，水池只有一個(gè)符合辦公需求的小水池，有待改進(jìn)。
2. 2 530 實(shí)訓(xùn)室( 采血室)
( 1) 承擔(dān)課程。臨床學(xué)檢驗(yàn)、血液學(xué)檢驗(yàn)
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。五分類血細(xì)胞分析儀、熒光顯微鏡、全自動(dòng)生化分析儀
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。五分類血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用、尿液常規(guī)檢驗(yàn)、尿沉渣檢驗(yàn)等
( 4) 特點(diǎn)。房間較小，相當(dāng)于正規(guī)實(shí)驗(yàn)室面積的一半，且模擬臨床實(shí)景操作，配備采血窗口，以采血窗口為界將實(shí)驗(yàn)室劃分成兩部分。學(xué)生可以在采血窗口模擬臨床的采血過程，然后運(yùn)用采血窗口后面區(qū)域的常規(guī)臨檢儀器，直接進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查。特別值得一提的是，此采血室與其他實(shí)驗(yàn)室配合使用，在校醫(yī)院的監(jiān)督下，可完成每年新生的體檢工作。
2. 3 531 實(shí)訓(xùn)室( 顯微鏡室)
( 1) 承擔(dān)課程。臨床學(xué)檢驗(yàn)、血液學(xué)檢驗(yàn)、寄生蟲學(xué)檢驗(yàn)、免疫學(xué)檢驗(yàn)、微生物學(xué)檢驗(yàn)、儀器分析學(xué)。
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。水浴箱、離心機(jī)、顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱，實(shí)驗(yàn)室配備冰箱1 臺(tái)，供微生物學(xué)檢驗(yàn)專用，主要存放微生物菌種、血平板和微生物生化管和藥敏紙片等。
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。球菌檢驗(yàn)、培養(yǎng)基制備( ss胨水KIAMIU) 、腸桿菌科檢驗(yàn)、非發(fā)酵菌檢驗(yàn)、真菌檢驗(yàn)、線蟲、吸蟲、絳蟲、阿米巴、鞭毛蟲、瘧原蟲、弓形蟲鏡下觀察、復(fù)染色法、單染色法、革蘭染色法、培養(yǎng)基制備、微生物生長性狀觀察及接種技術(shù)、理化因素對(duì)微生物生長的影響、菌種保藏、微生物生化試驗(yàn)( 糖、蛋白質(zhì)、酶) 、常見致病菌鑒定( 編碼技術(shù)) 、細(xì)菌、酵母菌的形態(tài)觀察( 菌體、菌落、芽管、假菌絲) 、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法( 酵母菌) 、平板菌落計(jì)數(shù)法( 土壤中細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)) 、食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)( 大腸菌群計(jì)數(shù)) 。
( 4) 特點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)的顯微鏡室，配備45 臺(tái)顯微鏡，能夠保證實(shí)驗(yàn)學(xué)生每人一臺(tái)顯微鏡，為熟練掌握相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作提供可靠保障。且實(shí)驗(yàn)室兩端有水池，適合微生物和臨檢、血液等較復(fù)雜的染色操作。
2. 4 532 實(shí)訓(xùn)室
( 1) 承擔(dān)課程。免疫學(xué)檢驗(yàn)、儀器分析學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)。
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。722 分光光度計(jì)、水浴箱、離心機(jī)、水浴箱、移動(dòng)式紫外線殺菌車等。所有玻璃儀器按照名稱、規(guī)格、數(shù)量分別儲(chǔ)存在12 個(gè)靠墻的柜子里面，抽屜、柜子分別加鎖分類儲(chǔ)存各檢驗(yàn)專業(yè)課程的常用實(shí)驗(yàn)器材。配備冰箱1 臺(tái): 免疫學(xué)檢驗(yàn)專用，用于儲(chǔ)存免疫學(xué)試劑盒、標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、儀器校準(zhǔn)試劑等。
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。免疫凝集實(shí)驗(yàn)、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、甲胎蛋白的定量檢測(cè)、外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離、膠體金法對(duì)血HBsAg和尿HCG 的檢測(cè)、抗體提取純化實(shí)驗(yàn)、甲型肝炎病毒IgM 抗體的檢測(cè)、乙型肝炎病毒標(biāo)志檢測(cè)、分光光度計(jì)的使用、離心機(jī)結(jié)構(gòu)、調(diào)試、使用、維護(hù)等。
( 4) 特點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室，具有大量的儲(chǔ)物功能，相當(dāng)于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的一個(gè)小型庫房。且實(shí)驗(yàn)室一端有水池，具備標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)臺(tái)，實(shí)驗(yàn)儀器齊全，可以完成很多復(fù)雜實(shí)驗(yàn)的前處理階段。
2. 5 533 實(shí)訓(xùn)室
( 1) 承擔(dān)課程。臨床學(xué)檢驗(yàn)、血液學(xué)檢驗(yàn)、寄生蟲學(xué)檢驗(yàn)、微生物學(xué)檢驗(yàn)、儀器分析學(xué)。
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、水浴箱、離心機(jī)、移動(dòng)式紫外線殺菌車等。配備冰箱1臺(tái)，微生物學(xué)檢驗(yàn)專用，主要存放微生物菌種、血平板和微生物生化管和藥敏紙片等。
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用、RBC計(jì)數(shù)、WBC 計(jì)數(shù)plt 計(jì)數(shù)、血涂片制備、WBC 分類計(jì)數(shù)、三分類血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用、尿液常規(guī)檢驗(yàn)、尿沉渣檢查、RH 血型鑒定、交叉配血、BM 正常形態(tài)閱片、貧血閱片、白血病閱片、球菌檢驗(yàn)、培養(yǎng)基制備( ss? 胨水? KIA? MIU) 、腸桿菌科檢驗(yàn)、非發(fā)酵菌檢驗(yàn)、真菌檢驗(yàn)、線蟲、吸蟲、絳蟲、阿米巴、鞭毛蟲、瘧原蟲、弓形蟲鏡下觀察、不染色法、單染色法、革蘭染色法、培養(yǎng)基制備、微生物生長性狀觀察及接種技術(shù)、理化因素對(duì)微生物生長的影響、菌種保藏、微生物生化試驗(yàn)( 糖、蛋白質(zhì)、酶) 、常見致病菌鑒定( 編碼技術(shù)) 、細(xì)菌、酵母菌的形態(tài)觀察( 菌體、菌落、芽管、假菌絲) 、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法( 酵母菌) 、平板菌落計(jì)數(shù)法( 土壤中細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)) 、食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)( 大腸菌群計(jì)數(shù)) 、光學(xué)顯微鏡的使用。
(4)特點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)的顯微鏡室，配備45 臺(tái)顯微鏡，能夠保證實(shí)驗(yàn)學(xué)生每人一臺(tái)顯微鏡，為熟練掌握相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作提供可靠保障。且實(shí)驗(yàn)室一端有水池，適合微生物和臨檢、血液等較復(fù)雜的染色操作。
2. 6 534 實(shí)訓(xùn)室( PCR 實(shí)驗(yàn)室)
( 1) 承擔(dān)課程。分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)。
( 2) 實(shí)驗(yàn)室配備。PCR 儀、電泳儀、紫外分光光度計(jì)、凝膠成像系統(tǒng)、漩渦混勻振蕩器、低溫冷藏冰箱、藥敏細(xì)菌鑒定儀、超凈臺(tái)、搖床、DNA 測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。
( 3) 主要實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目。乙肝病毒定量、丙肝病毒定量、耐多藥基因表達(dá)、HIV 抗體。
( 4) 特點(diǎn)。PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法分為試劑制備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增產(chǎn)量分析四個(gè)區(qū)域。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔，無任何的空氣直通。空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi)，可通過在室內(nèi)設(shè)置的通風(fēng)、排風(fēng)設(shè)備達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。
【關(guān)鍵詞】臨床微生物檢驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；立體化教學(xué)資源
G642
臨床微生物檢驗(yàn)是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的主要課程之一，該課程具有的顯著特點(diǎn)是操作性強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)性強(qiáng)，與臨床醫(yī)學(xué)有著密切的聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是臨床微生物檢驗(yàn)的重要教學(xué)組織形式。微生物檢驗(yàn)通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)可使學(xué)生動(dòng)手能力顯著增強(qiáng)，科研能力和創(chuàng)新能力從中可得到切實(shí)提高[1]。目前，臨床醫(yī)學(xué)中對(duì)檢驗(yàn)人員提出了更高和更為嚴(yán)格的要求，這就要求提高微生物檢驗(yàn)教育質(zhì)量，使學(xué)生的業(yè)務(wù)水平得到提高，能夠滿足當(dāng)今醫(yī)療環(huán)境的需求。作為微生物檢驗(yàn)的重要課程，實(shí)驗(yàn)教學(xué)也需不斷進(jìn)行改進(jìn)，在教學(xué)資源方面提供更為豐富、多樣化和立體化的專業(yè)素材和資源，使教學(xué)質(zhì)量得到切實(shí)提高。
1.臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的現(xiàn)狀以及影響教學(xué)質(zhì)量的因素
作為微生物檢驗(yàn)重要課程之一的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，其具有的顯著特點(diǎn)是病原微生物種類多、知識(shí)點(diǎn)連續(xù)性差、內(nèi)容龐雜、記憶內(nèi)容多。這就給學(xué)生的日常學(xué)習(xí)帶來困難，學(xué)習(xí)興趣難以得到提高，教學(xué)效果也難以令人滿意。這是這門課程的基本特征和基本現(xiàn)狀。實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改進(jìn)也需從其根本特點(diǎn)入手，尋求有效的方法來提高教學(xué)效果。從整體看，影響臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量的因素主要有以下幾個(gè)方面，首先是教師因素，教師的專業(yè)素質(zhì)、教學(xué)技能以及教學(xué)態(tài)度等對(duì)教學(xué)質(zhì)量產(chǎn)生最直接的影響，教師只有專業(yè)知識(shí)過硬，同時(shí)擁有高度的敬業(yè)精神和高超的教學(xué)水平，教學(xué)質(zhì)量才有望得到提高[2]。其次是學(xué)生因素，學(xué)生對(duì)微生物檢驗(yàn)學(xué)的興趣以及專業(yè)知識(shí)水平等直接影響學(xué)生的接受效果。學(xué)生良好的興趣、積極的學(xué)習(xí)態(tài)度是掌握知識(shí)的一個(gè)基本前提。此外，作為客觀條件之一的實(shí)驗(yàn)室本身也是影響實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量的因素之一。實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的完備程度、使用狀況以及經(jīng)費(fèi)投入等都會(huì)在客觀上影響教學(xué)效果。
2.臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)立體化教學(xué)資源建設(shè)
臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室教學(xué)立體化教學(xué)資源的建設(shè)需從多方面著手，從教材到實(shí)驗(yàn)設(shè)備，從師資到管理模式都需著手改革，這樣方可使實(shí)驗(yàn)教學(xué)立體化教學(xué)資源建設(shè)取得良好的成果。
2.1實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容改革
實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)劣直接影響學(xué)生的專業(yè)水平。因此，為使實(shí)驗(yàn)教學(xué)立體化教學(xué)資源建設(shè)取得良好的成果需對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容中不合時(shí)宜的部分進(jìn)行改革，使教學(xué)內(nèi)容能夠緊跟學(xué)科前沿發(fā)展，使學(xué)生能夠站在學(xué)科專業(yè)的最前沿。比如臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目包括分泌物鏈球菌屬鑒定、血液標(biāo)本中葡萄球菌的鑒定、膿液標(biāo)本中銅綠假單胞菌鑒定等[3]。這些檢驗(yàn)項(xiàng)目均與臨床醫(yī)學(xué)緊密聯(lián)系，同時(shí)其也處于不斷變動(dòng)發(fā)展中。實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容以臨床醫(yī)學(xué)為依托，將最新的醫(yī)學(xué)內(nèi)容和醫(yī)學(xué)案例等帶入課堂，充實(shí)教學(xué)內(nèi)容，不僅使教學(xué)內(nèi)容更加豐富，學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)內(nèi)容具有更直觀認(rèn)識(shí)，教學(xué)效果也可得到提高。
2.2制備多樣化的視頻實(shí)驗(yàn)教學(xué)資料
臨床微生物檢驗(yàn)是一門發(fā)展迅速，與多學(xué)科、多技術(shù)交叉的綜合性較強(qiáng)的學(xué)科。這要求在教學(xué)資源建設(shè)的過程中時(shí)刻關(guān)注其他學(xué)科的發(fā)展，將與之相關(guān)的內(nèi)容納入教學(xué)內(nèi)容[4]。臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室教學(xué)的教學(xué)手段需具有多樣化的特點(diǎn)，視頻教學(xué)是一種直觀的教學(xué)方式，學(xué)生通過視頻可對(duì)所學(xué)知識(shí)獲得最直觀的認(rèn)識(shí)。比如臨床微生物檢驗(yàn)中涉及到多種微生物，包括微生物的形態(tài)特征、生化特征、菌落特征等，這些教學(xué)內(nèi)容僅依靠口頭闡釋或文字?jǐn)⑹鲭y以是使學(xué)生獲得直觀印象，通過多樣化的視頻實(shí)驗(yàn)教學(xué)資料可取得事半功倍的效果。
2.3開設(shè)第二課堂
傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)具有封閉性的特點(diǎn)，教學(xué)地點(diǎn)往往囿于實(shí)驗(yàn)室中。為提高教學(xué)質(zhì)量可在實(shí)驗(yàn)室之外開設(shè)第二課堂。學(xué)校方面可組織學(xué)生到市中心血站、醫(yī)院檢驗(yàn)科、市疾控中心等單位進(jìn)行參觀學(xué)習(xí)，使學(xué)生能夠接觸到微生物檢查第一線。通過這些地點(diǎn)的設(shè)備和技g優(yōu)勢(shì)可開拓學(xué)生眼界，學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解度也可得到深化。比如學(xué)生到醫(yī)院檢驗(yàn)科細(xì)菌室參觀學(xué)習(xí)，學(xué)生可了解到微生物自動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)、自動(dòng)藥敏檢驗(yàn)系統(tǒng)、微生物全自動(dòng)鑒定系統(tǒng)等。通過親身實(shí)踐，學(xué)生的知識(shí)面可得到有效拓寬，與實(shí)驗(yàn)室教學(xué)可起到相輔相成的作用。
2.4強(qiáng)化微生物圖片庫、教學(xué)網(wǎng)絡(luò)課件建設(shè)
多媒體課件一般是教師將所教授的內(nèi)容通過計(jì)算機(jī)多媒體等方式傳達(dá)出來，課件內(nèi)容包括文字、圖片、視頻等。臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室教學(xué)中涉及到的內(nèi)容具有多樣性，可將教學(xué)所涉及到的圖片庫、教學(xué)網(wǎng)絡(luò)課件等進(jìn)行整理，利用學(xué)校信息中心網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)將這些制成網(wǎng)絡(luò)課件放于網(wǎng)上功學(xué)生學(xué)習(xí)。在這個(gè)過程中學(xué)生也可將不懂的內(nèi)容反復(fù)觀看，學(xué)生之間也可進(jìn)行交流，學(xué)習(xí)效果可得到顯著提高。
總結(jié)
臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)立體化教學(xué)資源建設(shè)與臨床微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室教學(xué)有密切聯(lián)系，積極開放教學(xué)資源使微生物實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)教學(xué)取得更好的教學(xué)成果。
參考文獻(xiàn)：
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【關(guān)鍵詞】高等醫(yī)學(xué)院校 ； 實(shí)驗(yàn)室 ； 生物安全 ； 策略
【中圖分類號(hào)】G64 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-3089（2014）22-0009-02
生物安全（biosafety）的概念有狹義和廣義之分。狹義生物安全是指防范由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用（主要指轉(zhuǎn)基因技術(shù)）所產(chǎn)生的負(fù)面影響，即對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境及人體健康可能構(gòu)成的危險(xiǎn)或潛在風(fēng)險(xiǎn)。廣義生物安全大致分為三個(gè)方面：一是指人類的健康安全；二是指人類賴以生存的農(nóng)業(yè)生物安全；三是指與人類生存有關(guān)的環(huán)境生物安全，涉及到預(yù)防醫(yī)學(xué)、環(huán)境保護(hù)、植物保護(hù)、野生動(dòng)物保護(hù)、生態(tài)、農(nóng)藥、林業(yè)等多個(gè)學(xué)科和領(lǐng)域，而管理工作分屬各個(gè)不同的行政管理部門。國內(nèi)對(duì)生物安全的認(rèn)識(shí)很多還局限在狹義的概念里。雖然國際上對(duì)此也還沒有一個(gè)統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)，但一些發(fā)達(dá)國家，如澳大利亞、新西蘭、英國等，在實(shí)際管理中已經(jīng)應(yīng)用了生物安全的廣義內(nèi)涵[1]。生物安全是一個(gè)動(dòng)態(tài)的概念，它所涉及的具體內(nèi)容有一定的時(shí)空范圍，隨著自然界的演進(jìn)，社會(huì)和經(jīng)濟(jì)活動(dòng)的變化及科學(xué)技術(shù)的發(fā)展而變化。實(shí)驗(yàn)室生物安全是指在從事病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室中，避免病原微生物對(duì)工作人員和相關(guān)人員的危害，避免對(duì)環(huán)境的污染和對(duì)公眾的傷害，同時(shí)為了保證實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的科學(xué)性還要保護(hù)被檢測(cè)對(duì)象免受污染。實(shí)驗(yàn)室生物安全管理就是指以實(shí)驗(yàn)室為科研和工作場所時(shí)，避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施[2]。
近年來，隨著禽流感、瘋牛病、艾滋病、SARS事件、甲流疫情等疾病的出現(xiàn)和蔓延，以及炭疽病毒等生物恐怖事件引起的恐慌，特別是近年來隨著新加坡、我國臺(tái)灣以及北京的實(shí)驗(yàn)室相繼發(fā)生的病毒泄漏造成工作人員感染的事件，使實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理隱患變成了現(xiàn)實(shí)損害，這些隱患不僅是實(shí)驗(yàn)室的局部問題，而且已經(jīng)涉及到環(huán)境安全（如危害物的泄漏、排放等）和社會(huì)安全（如危險(xiǎn)品的逸出、丟失等），給各級(jí)各類的生物安全實(shí)驗(yàn)室和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)問題敲響了警鐘，引起了世界范圍內(nèi)各國政府的高度重視，成為全世界普遍關(guān)注的焦點(diǎn)[3-5]。特別是2011年3月至5月，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)27名學(xué)生和1名教師，相繼確診感染了布魯菌病，轟動(dòng)全國。醫(yī)學(xué)院校實(shí)驗(yàn)室和研究室是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科研的工作場所，操作者在進(jìn)行病原生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、病理學(xué)的涂片、染色、鏡檢、培養(yǎng)、鑒定等操作，臨床檢驗(yàn)中的生化、血清分型等不同實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，都要接觸各種病原微生物及危險(xiǎn)因子。而在實(shí)驗(yàn)過程中一些操作人員自我保護(hù)意識(shí)非常淡薄，自我保護(hù)意識(shí)或意識(shí)不強(qiáng)，對(duì)生物安全相關(guān)法規(guī)、業(yè)務(wù)知識(shí)了解不透徹，對(duì)來自實(shí)驗(yàn)室的各種陽性標(biāo)本往往認(rèn)識(shí)不足或存在僥幸心理，對(duì)生物安全的重視不夠[6]。因此，高度重視，采取有效的防護(hù)措施，加強(qiáng)高等醫(yī)學(xué)院校實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，就顯得十分重要。
1.確定實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí) 依據(jù)美國疾病控制與預(yù)防中心和美國國立衛(wèi)生研究所2007年的被國際上公認(rèn)的生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)的《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（第5版），根據(jù)生物安全水平的等級(jí)及從事病原微生物的危害程度，將生物安全實(shí)驗(yàn)室分為4級(jí)，即BSL（Biosafety level）l、2、3、4級(jí)，我國稱為P1、P2、P3、P4級(jí)實(shí)驗(yàn)室。①P1級(jí)：其中的實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人接觸不會(huì)引起疾病的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)配備消毒設(shè)施等，如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等，具有1級(jí)防護(hù)水平。②P2級(jí)：其中的實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人接觸會(huì)引起發(fā)病但不嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)配備生物安全柜等，并有明顯的標(biāo)識(shí)，具有2級(jí)防護(hù)水平。③P3級(jí)：其中的實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人會(huì)引起嚴(yán)重甚至致死疾病的致病微生物及其毒素的實(shí)驗(yàn)室，具有3級(jí)防護(hù)水平。④P4級(jí)：其中的實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人引起嚴(yán)重疾病且造成個(gè)體間傳播，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微事物及其毒素的實(shí)驗(yàn)室，具有4級(jí)防護(hù)水平[7]。P4實(shí)驗(yàn)室是生物安全水平等級(jí)最高的實(shí)驗(yàn)室。目前，醫(yī)學(xué)院校的實(shí)驗(yàn)室多屬于P1、P2級(jí)。
2.建立健全、嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度 認(rèn)真學(xué)習(xí)貫徹國務(wù)院頒發(fā)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》、《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》、《臨床實(shí)驗(yàn)室安全準(zhǔn)則》、《臨床實(shí)驗(yàn)室廢物處理原則》、《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全條例》、《人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)管理辦法》等國家標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)法規(guī)。建立健全實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度，制訂并嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)程。建立有效的監(jiān)督機(jī)制加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室安全檢查，開展生物安全自查自糾，及時(shí)排除安全隱患。在實(shí)驗(yàn)室的生物安全手冊(cè)中詳盡記載生物安全有關(guān)的安全知識(shí)。在掌握實(shí)驗(yàn)室所涉及的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的來源、微生物致病力、傳染途徑、穩(wěn)定性等有效的預(yù)防措施等基礎(chǔ)上，制訂有效的實(shí)驗(yàn)室清潔消毒、實(shí)驗(yàn)室廢物的處理、實(shí)驗(yàn)室微生物菌種的保存和使用等細(xì)則。建立實(shí)驗(yàn)室事故應(yīng)急預(yù)案和處理制度[8]。
3.加強(qiáng)師生的生物安全教育 按照“統(tǒng)籌規(guī)劃，分類培訓(xùn)；自學(xué)為主、培訓(xùn)為輔；從易到難，逐步推進(jìn)”的工作思路[9]，開展實(shí)驗(yàn)室生物安全教育。組織教師認(rèn)真學(xué)習(xí)法規(guī)文件，加強(qiáng)技能培養(yǎng)。要求實(shí)驗(yàn)室工作人員重視生物安全，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程工作，學(xué)生實(shí)驗(yàn)亦把生物安全放在第一位，確保實(shí)驗(yàn)過程中不發(fā)生任何差錯(cuò)。
4.優(yōu)化實(shí)驗(yàn)室布局 實(shí)驗(yàn)室的整體布局應(yīng)符合醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果、專業(yè)特點(diǎn)、樣品污染程度不同，科學(xué)規(guī)劃布局，建立合理工作流程。在科室內(nèi)部應(yīng)劃分污染區(qū)和清潔區(qū)，清潔區(qū)、污染區(qū)之間應(yīng)有物理隔斷，同時(shí)在各個(gè)不同區(qū)域有清晰明顯的標(biāo)識(shí)，做到人流、物流分開，清潔、污染區(qū)無交叉。如：清潔區(qū)包括辦公室、學(xué)習(xí)室和庫房等，半污染區(qū)主要為實(shí)驗(yàn)室工作人員及送檢標(biāo)本人員的公共走廊，污染區(qū)包括所有開展樣本檢測(cè)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室、洗消室。
5.配備安全設(shè)施設(shè)備 不同生物安全級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室對(duì)設(shè)施設(shè)備的要求各不相同。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室多為生物安全二級(jí)水平，實(shí)驗(yàn)室在安全設(shè)施上起碼應(yīng)滿足：（1）實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗并可鎖閉；（2）在靠近實(shí)驗(yàn)室出口處有洗手池；（3）實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面及實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)易于清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕；（4）實(shí)驗(yàn)室如有可開啟的窗戶，要安裝紗窗；（5）有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。實(shí)驗(yàn)室最主要的生物安全設(shè)備就是生物安全柜和高壓滅菌鍋，實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)所開展的臨床檢測(cè)項(xiàng)目和處理的檢測(cè)樣品種類進(jìn)行選擇和配備生物安全柜。在操作病原微生物樣本的實(shí)驗(yàn)間內(nèi)一定要配備生物安全柜。安裝生物安全柜的位置一定要選擇遠(yuǎn)離人員走動(dòng)及有潛在干擾氣流的地方，以確保安全柜的生物安全屏障作用。廢棄標(biāo)本及實(shí)驗(yàn)后器械置于耐用、防漏密閉的容器中，通過實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入洗消室，高壓消毒后方可統(tǒng)一銷毀。
6.建立健康檔案，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù) 為保障實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康和安全，防止傳染病的傳播或擴(kuò)散，維護(hù)公眾的健康權(quán)益和社會(huì)穩(wěn)定。應(yīng)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行健康檢查，建立健康檔案，每年至少一次健康體檢，體檢結(jié)果和病史歸人工作人員健康檔案。預(yù)防接種是提高機(jī)體對(duì)某些病原體的免疫力有效措施。充分重視防護(hù)裝備的使用，做好實(shí)驗(yàn)人員手部、身體、面部、足部等防護(hù)，正確使用帽子、口罩、手套、護(hù)目鏡、洗眼器、防護(hù)服等防護(hù)用品[10]。
7.定期進(jìn)行生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是在樣品采集、運(yùn)送、處理及檢測(cè)過程中，對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)可能帶來的生物危害以及檢測(cè)全過程中外部環(huán)境的變化可能引起的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估[11]。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照我國實(shí)驗(yàn)室生物安全的相關(guān)政策、法規(guī)進(jìn)行定期評(píng)估。查找實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)的來源，確定不同類型的標(biāo)本、不同危害程度的微生物應(yīng)處的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室級(jí)別，明確工作人員的崗位職責(zé)，進(jìn)行相應(yīng)的生物安全防護(hù)，有效對(duì)抗風(fēng)險(xiǎn)威脅，最大程度避免風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)生，努力實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室零感染。
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關(guān)鍵詞 獸醫(yī)微生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)；教學(xué)改革；
中圖分類號(hào)：G642.45 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B
文章編號(hào)：1671-489X（2013）21-0137-02
獸醫(yī)微生物學(xué)是動(dòng)物醫(yī)學(xué)臨床獸醫(yī)學(xué)方向和動(dòng)物防疫檢疫方向的主要專業(yè)基礎(chǔ)課之一，是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。實(shí)驗(yàn)可以提高學(xué)生的動(dòng)手操作能力，也可以加深學(xué)生對(duì)理論課的理解，加強(qiáng)學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際的能力。同時(shí)，它也為專業(yè)課動(dòng)物傳染病、獸醫(yī)生物制品學(xué)、動(dòng)物防疫檢疫學(xué)、獸醫(yī)寄生蟲病等學(xué)科打下基礎(chǔ)，從事畜牧獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)必須具備獸醫(yī)微生物學(xué)相關(guān)的理論知識(shí)和實(shí)踐技能。在執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試中，獸醫(yī)微生物學(xué)所占比例最大，為35%。目前很多學(xué)校獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容多為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，雖然學(xué)生在實(shí)驗(yàn)課上可以掌握微生物學(xué)的常規(guī)基本操作技能，但是在實(shí)踐中遇到具體的問題時(shí)卻無從下手。比如：如何從發(fā)病動(dòng)物體內(nèi)分離到病原菌并進(jìn)行鑒定？如何對(duì)畜牧業(yè)相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行微生物的檢測(cè)？對(duì)簡單的動(dòng)物生物制品如何制備？為了使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)課上掌握的技能充分地應(yīng)用的生產(chǎn)實(shí)際中去，培養(yǎng)應(yīng)用型人才，進(jìn)行獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革是非常必要的。
1 做好實(shí)驗(yàn)前的充分準(zhǔn)備
在實(shí)驗(yàn)前充分做好準(zhǔn)備，能夠有效提高實(shí)驗(yàn)的效率。實(shí)驗(yàn)員及其他相關(guān)人員應(yīng)該對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行定期的檢查及維護(hù)。實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)該貼出每種儀器的使用說明和簡單的操作規(guī)程及使用的注意事項(xiàng)，并要求學(xué)生在正式使用儀器之前先熟悉每種儀器的每個(gè)按鈕的功能，熟練掌握每種儀器使用的注意事項(xiàng)，正確操作。另外，實(shí)驗(yàn)員在每節(jié)實(shí)驗(yàn)課前都應(yīng)該認(rèn)真準(zhǔn)備該節(jié)課的實(shí)驗(yàn)用品及藥品，不要等學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)經(jīng)常找不到實(shí)驗(yàn)所需物品及藥品。此外，在學(xué)生正式上課之前，教師及實(shí)驗(yàn)教師應(yīng)該提前完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)實(shí)驗(yàn)，從而檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)藥品是否可靠、實(shí)驗(yàn)儀器是否正常運(yùn)行，明確實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)中應(yīng)該注意的問題，在給學(xué)生講解時(shí)候能夠有的放矢，保證實(shí)驗(yàn)課的正常運(yùn)行。學(xué)生在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)能夠正確分析原因，找出實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的細(xì)節(jié)問題，發(fā)現(xiàn)問題并及時(shí)解決。
2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件
1）為了豐富和完整獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容，在教學(xué)中應(yīng)該運(yùn)用現(xiàn)代化的教學(xué)手段如多媒體和錄像等，學(xué)生可直觀地認(rèn)識(shí)各種儀器實(shí)物，并利用錄相和幻燈片的視頻播放給學(xué)生演示整個(gè)實(shí)驗(yàn)的基本操作過程，同時(shí)也能豐富學(xué)生的理論知識(shí)，使學(xué)生的知識(shí)體系更加完善，從而順利完成實(shí)驗(yàn)。如學(xué)生在制作完培養(yǎng)基的過程后需要及時(shí)滅菌，微生物實(shí)驗(yàn)室中一般都只有手提式和立式兩種高壓蒸汽滅菌器。而在實(shí)際工作過程中，很多單位應(yīng)用的是臥式高壓蒸汽滅菌器，這樣就可以通過多媒體和錄像給學(xué)生放映，讓學(xué)生對(duì)這樣的高壓蒸汽滅菌器有直觀的印象，豐富學(xué)生的知識(shí)面。
2）學(xué)院應(yīng)在原有實(shí)驗(yàn)設(shè)施基礎(chǔ)上，增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)儀器的投入，如建立獨(dú)立的顯微鏡實(shí)驗(yàn)室，增加顯微鏡的數(shù)量，提高顯微鏡的質(zhì)量。增加PCR儀等分子生物學(xué)儀器、細(xì)菌自動(dòng)化檢測(cè)分析儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)、蛋白層析及純化裝置等先進(jìn)的儀器和設(shè)備，以滿足快速發(fā)展的微生物分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方面的需要。
3）制定完善的學(xué)生實(shí)驗(yàn)室守則和實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)章制度， 實(shí)驗(yàn)室工作人員以身作則，認(rèn)真履行，給學(xué)生樹立良好的榜樣。重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室清潔以及無菌操作技術(shù)在獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要作用，給學(xué)生制定上實(shí)驗(yàn)課的課堂紀(jì)律并和期末成績相結(jié)合，提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，規(guī)范學(xué)生的操作技能并培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的工作態(tài)度。
3 實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的改革
1）根據(jù)動(dòng)物醫(yī)學(xué)培養(yǎng)方案，結(jié)合獸醫(yī)微生物學(xué)課程本身的特點(diǎn)，及該門課程在生產(chǎn)和科研中的重要性，對(duì)獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行合理的改革，主要是去掉一部分驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，增加綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。按照臨床上病原菌的檢驗(yàn)過程，開展設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)思路，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性，把實(shí)驗(yàn)室的基本操作和生產(chǎn)實(shí)際緊密結(jié)合起來，增加學(xué)生對(duì)本門實(shí)驗(yàn)課的興趣。讓學(xué)生充分認(rèn)識(shí)到獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)并不是孤立的，而是一個(gè)連續(xù)不斷的整體，每個(gè)驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)連續(xù)起來就可以解決生產(chǎn)實(shí)踐中的實(shí)際問題，為學(xué)生以后從事臨床生產(chǎn)實(shí)踐工作打下良好的基礎(chǔ)。
2）獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容較多，但是受學(xué)時(shí)所限，課堂只能完成少部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。尤其對(duì)于實(shí)驗(yàn)周期較長的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，不能在課堂上開展。針對(duì)上述矛盾，學(xué)校可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室開放，讓學(xué)生利用晚自習(xí)和假期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。這樣既可以培養(yǎng)學(xué)生參與科研的意識(shí)，也為學(xué)生提供了自由發(fā)揮的空間，學(xué)生可以將所學(xué)知識(shí)充分的發(fā)揮，同時(shí)也可以提高學(xué)生動(dòng)手操作能力和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力。有了學(xué)生的參與，減輕了承擔(dān)科研工作教師的負(fù)擔(dān)并培養(yǎng)了科研助手，使學(xué)生可以早日承擔(dān)科研工作，為以后的繼續(xù)學(xué)習(xí)和工作打下良好的基礎(chǔ)。
4 實(shí)驗(yàn)考核方式的改革
課程考核是檢驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量與教學(xué)效果的重要環(huán)節(jié)，是獲取教學(xué)反饋信息和評(píng)定學(xué)生成績的重要手段和方法。通過考核，可以使學(xué)生的知識(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€(gè)完整的知識(shí)體系，加深學(xué)生對(duì)課程內(nèi)容的理解和掌握。然而，現(xiàn)行的獸醫(yī)微生物學(xué)的課程考核仍普遍采用傳統(tǒng)的考核方式，這在很大程度上阻礙了學(xué)生個(gè)性的發(fā)揮以及創(chuàng)新能力和思維能力的培養(yǎng)。尤其是很多學(xué)校尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)課程考核，這樣不利于學(xué)生對(duì)實(shí)踐技能的充分掌握。為此構(gòu)建新的考核體系尤其是增加實(shí)踐考核非常重要。
獸醫(yī)微生物學(xué)考試改革本著從課程的自身特點(diǎn)和培養(yǎng)應(yīng)用型、實(shí)踐型人才的實(shí)際需要出發(fā)，有利于提高課程的教學(xué)質(zhì)量，有利于促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)，有利于形成良好的學(xué)風(fēng)考風(fēng)，有利于培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力，有利于促進(jìn)全體學(xué)生全面發(fā)展和個(gè)性發(fā)展。
制定實(shí)踐考核的具體方法：分值100分，占期末總成績的10%，考核學(xué)生實(shí)驗(yàn)/實(shí)踐的出勤、實(shí)驗(yàn)操作技能、實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫、學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)。其中，學(xué)生實(shí)驗(yàn)課出勤，占實(shí)驗(yàn)總成績的10%；操作技能、學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)，占實(shí)驗(yàn)總成績的10%；實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫，占實(shí)驗(yàn)總成績的40%；在實(shí)驗(yàn)課結(jié)束后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測(cè)試，占實(shí)驗(yàn)總成績的40%。
獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)通過做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容改革和實(shí)驗(yàn)課考核方式改革等具體措施，一定能培養(yǎng)學(xué)生分析解決問題的能力、獨(dú)立思維和團(tuán)結(jié)協(xié)作的能力，為以后的科研和工作打下良好的基礎(chǔ)。
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【關(guān)鍵詞】 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)；完善；建議
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.710 文章編號(hào)：1004-7484（2012）-08-2992-01
食品微生物檢驗(yàn)工作是評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量，保證消費(fèi)者飲食安全必不可少的手段，所以本文從人員、設(shè)施環(huán)境、設(shè)備及檢驗(yàn)物資的管理與配制六個(gè)等方面闡述了影響食品微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵因素，完善食品微生物檢驗(yàn)工作，使其更加高效、快捷地對(duì)食品微生物進(jìn)行檢測(cè)，出具公正、準(zhǔn)確、可靠的數(shù)據(jù)。
1 人員
檢驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)過一定時(shí)期的正規(guī)化、專業(yè)化的培訓(xùn)，具備必須的的理論知識(shí)、實(shí)踐操作能力。單位應(yīng)對(duì)新參加檢驗(yàn)工作的同志，進(jìn)行專業(yè)知識(shí)培訓(xùn)經(jīng)考試合格后方能持證上崗，同時(shí)要確保實(shí)驗(yàn)室人員得到及時(shí)培訓(xùn)不斷更新知識(shí)，學(xué)習(xí)和掌握新標(biāo)準(zhǔn)、新理論、新技術(shù)和新方法。
2 設(shè)施、環(huán)境
2.1 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施建設(shè) 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施建設(shè)微生物實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)應(yīng)以生物安全為核心，應(yīng)符合《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》的要求，確保實(shí)驗(yàn)室人員的安全和實(shí)驗(yàn)室周圍環(huán)境的安全。同時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有進(jìn)行微生物檢驗(yàn)適宜充分的設(shè)施條件，包括檢測(cè)設(shè)施及輔助設(shè)施，特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。按照不同檢驗(yàn)類別要求設(shè)置實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要合理布局，清潔區(qū)與污染區(qū)劃分明確要有明顯標(biāo)識(shí)。
2.2 環(huán)境條件的檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)時(shí)實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)控制在18-26℃，相對(duì)濕度控制在30%-70%，每次使用進(jìn)行檢測(cè)記錄。無菌室應(yīng)在每次實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行消毒處理，其消毒效果每月檢測(cè)一次，結(jié)果可參照GB15981-1995《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的效果標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行評(píng)價(jià)。具體消毒方法與檢測(cè)如下：
2.2.1 紫外線消毒 在室溫下，220V30W紫外燈下方垂直位置lm處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)≥70μW/cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換，設(shè)置適當(dāng)數(shù)量的紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線消毒時(shí)無菌室內(nèi)應(yīng)保證清潔干燥，應(yīng)在無人條件下進(jìn)行，作用時(shí)間不少于30min。
2.2.2 無菌室空氣消毒效果檢驗(yàn)方法（自然沉降法） 一般情況下無菌室面積≤30m2時(shí)，設(shè)一條對(duì)角線上選取3點(diǎn)，即中心l點(diǎn)、兩端各距墻1米處各取一點(diǎn)；無菌室面積>30m2時(shí)選取東、南、西、北、中5點(diǎn)，其中東、南、西、北點(diǎn)均距墻lm。在所選位點(diǎn)，將9cm直徑普通營養(yǎng)瓊脂平板距地面80厘米處開蓋暴露l5min后送檢。
2.2.3 無菌室工作臺(tái)面消毒效果檢驗(yàn)方法（涂抹法） 一般情況下采集工作臺(tái)面100cm2，用5×5cm2滅菌規(guī)格板，放在臺(tái)面上，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)拭子，連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml滅菌生理鹽水的試管中送檢。
3 設(shè)備及檢驗(yàn)物資管理與配制
3.1 根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求正確配備儀器設(shè)備，并按質(zhì)量管理體系要求對(duì)購置、驗(yàn)收、運(yùn)轉(zhuǎn)情況進(jìn)行控制，按儀器設(shè)備的檢定狀態(tài)分類加貼紅、黃、綠三色狀態(tài)標(biāo)識(shí)以防誤用。對(duì)所有影響檢驗(yàn)結(jié)果的儀器設(shè)備均應(yīng)建立儀器設(shè)備檔案，定期檢定，做好期間核查。
3.1.1 恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴箱、干熱滅菌箱、冰箱等首次安裝時(shí)要對(duì)溫度的穩(wěn)定性和一致性進(jìn)行校準(zhǔn)。記錄培養(yǎng)箱、水浴鍋和干熱滅菌箱的溫度穩(wěn)定性達(dá)到平衡所需的時(shí)間。
3.1.2 高壓蒸汽滅菌器 新購買的高壓蒸汽滅菌器的時(shí)間和溫度指示的準(zhǔn)確度應(yīng)滿足要求，同時(shí)進(jìn)行消毒效果檢測(cè)，檢測(cè)合格后方可使用，并且定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
3.1.3 生物安全柜 在基層疾控機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室中使用生物安全柜基本是Ⅱ級(jí)安全柜，初安裝需由廠家專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)及性能測(cè)試，使用過程中廠家專業(yè)技術(shù)人員應(yīng)定期對(duì)高效過濾器進(jìn)行檢漏或更換，對(duì)風(fēng)速或風(fēng)量、溫濕度、含塵濃度、噪聲、照度等方面進(jìn)行檢測(cè)，以保證檢測(cè)人員、周圍環(huán)境、檢測(cè)樣本的安全性，防止交叉污染，同時(shí)做好消毒、使用、維護(hù)、維修等記錄。
3.2 檢驗(yàn)物資的管理與配制
3.2.1 培養(yǎng)基大多為半成品，按說明配制分裝后進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法不同的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的壓力和時(shí)間均有不同的要求，部分培養(yǎng)基無需高壓蒸汽滅菌只能煮沸滅菌。滅菌后應(yīng)置于冰箱內(nèi)保存，使用前應(yīng)置培養(yǎng)箱內(nèi)做無菌試驗(yàn)。
3.2.2 診斷血清來源必須可靠，在有效期內(nèi)使用和保存，使用時(shí)嚴(yán)格按無菌操作要求，避免造成血清的二次污染。
3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)菌株必須來自權(quán)威機(jī)構(gòu)或具有資質(zhì)證明的機(jī)構(gòu)，專人管理存放地點(diǎn)和設(shè)施應(yīng)采取措施，非管理人員無法隨意獲取。為防止多次傳代后菌株發(fā)生變異，購買時(shí)盡量購買多孔小瓷珠保存的菌株，每次使用取一個(gè)進(jìn)行復(fù)蘇，剩下的繼續(xù)放冰箱中保存以備下次使用。
4 樣品的采集、運(yùn)輸和保存
要獲得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，首先必須采集符合要求的微生物樣品，根據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)方法和檢測(cè)目的選擇和確定相應(yīng)的采樣工具、運(yùn)送容器、采樣方法、采樣部位、采樣時(shí)機(jī)和采樣量。樣品的采集必須具有代表性，要考慮到各種可能影響樣品質(zhì)量的因素，防止因樣品受到外源性污染或者保存不當(dāng)樣品變質(zhì)和細(xì)菌生長，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果失去意義。
5 操作
操作人員必須牢固樹立無菌觀念，整個(gè)操作過程均要求無菌操作，例如操作時(shí)盡量靠近火焰動(dòng)作要迅速；樣品管口火焰滅菌、接種環(huán)每次使用前后均需火焰滅菌等。進(jìn)入無菌室從樣品的制備到檢驗(yàn)都要采取必要措施防止二次污染，取樣加樣前樣品、培養(yǎng)皿、試管、三角瓶等擺放整齊便于操作，操作前要在心中演練一遍，包括一支吸管用幾次加幾回樣。原始記錄要真實(shí)準(zhǔn)確，能夠復(fù)述整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程，要按照GB4789標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定。
6 檢測(cè)方法的選擇
根據(jù)檢測(cè)目的條件優(yōu)先選用國家GB4789系列標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件、人員、設(shè)備選擇哪一法，優(yōu)先選用第一法。目前新的國家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》不斷，應(yīng)及時(shí)購買新的國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，新方法要及時(shí)進(jìn)行學(xué)習(xí)，使用前必須經(jīng)確認(rèn)批準(zhǔn)后方能實(shí)施。
過去食品微生物檢驗(yàn)工作職能一般是由政府和企業(yè)檢驗(yàn)組成，社會(huì)中介力量不足，現(xiàn)在私營檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)逐漸出現(xiàn)，對(duì)我們基層疾控機(jī)構(gòu)起到很大的促進(jìn)作用。雖然活躍了檢驗(yàn)市場，但是不可避免的帶來一些問題，這就需要采取政府部門監(jiān)管、行業(yè)自律以及社會(huì)中介力量三種監(jiān)督相結(jié)合的方式，加強(qiáng)食品微生物檢驗(yàn)的公正性。為使微生物檢測(cè)數(shù)據(jù)更加科學(xué)、可靠和準(zhǔn)確，每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須建立完善的質(zhì)量管理體系，對(duì)實(shí)驗(yàn)室與檢測(cè)活動(dòng)相關(guān)的所有因素進(jìn)行有效的質(zhì)量控制，同時(shí)在日常工作中我們要遵守職業(yè)道德，要有嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)態(tài)度才能使微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性得以保證，為食品安全提供可靠技術(shù)保障。
參考文獻(xiàn)
[1] 齊小秋.病原微生物檢驗(yàn).衛(wèi)生部病原微生物檢驗(yàn)教材編寫組，2009，02.
